مختبرات نيو إنجلاند البيولوجية، M0282S، APE 1

الفئات ذات الصلة: إنزيمات إصلاح الحمض النووي وإنزيمات النوكلياز الداخلية المتخصصة بالبنية. التطبيقات: بوليميرازات لمعالجة الحمض النووي. المواصفات: تعريف الوحدة : تُعرَّف الوحدة الواحدة بأنها كمية الإنزيم اللازمة لقطع 20 بيكومول من جزيء أوليغونوكليوتيد مزدوج مكون من 34 قاعدة، يحتوي على موقع AP واحد*، في حجم تفاعل إجمالي قدره 10 ميكرولتر خلال ساعة واحدة عند درجة حرارة 37 درجة مئوية. *يتم إنشاء موقع AP بمعالجة 20 بيكومول من جزيء أوليغونوكليوتيد مزدوج مكون من 34 قاعدة، يحتوي على بقايا يوراسيل واحدة، بوحدة واحدة من إنزيم يوراسيل-دي إن إيه جليكوزيلاز (UDG) لمدة دقيقتين عند درجة حرارة 37 درجة مئوية. شروط التفاعل: محلول NEBuffer™ 4 بتركيز 1X، يُحضن عند 37 درجة مئوية. محلول NEBuffer™ 4 بتركيز 1X، يحتوي على: 50 ملي مولار أسيتات البوتاسيوم، 20 ملي مولار أسيتات التريس، 10 ملي مولار أسيتات المغنيسيوم، 1 ملي مولار DTT (الأس الهيدروجيني 7.9 عند 25 درجة مئوية). محلول التخزين: 10 ملي مولار Tris-HCl، 50 ملي مولار كلوريد الصوديوم، 1 ملي مولار DTT، 0.05 ملي مولار EDTA، 200 ميكروغرام/مل BSA، 50% جلسرين، الأس الهيدروجيني 8 عند 25 درجة مئوية. التعطيل الحراري: 65 درجة مئوية لمدة 20 دقيقة. شروط فحص الوحدة : محلول NEBuffer™ 4 بتركيز 1X يحتوي على 20 بيكومول من ثنائي النوكليوتيد الموسوم بالفلورسنت في حجم تفاعل إجمالي قدره 10 ميكرولتر. الأسئلة الشائعة : س: ما هو نشاط APE 1 في محاليل NEBuffer™ 1-4؟ ج: يتمتع إنزيم APE 1 بنشاط 100% في محلول NEBuffer 4 و50% في محاليل NEBuffer 1-3. س: ما هو الوزن الجزيئي لإنزيم APE 1؟ ج: يبلغ الوزن الجزيئي لإنزيم APE 1 حوالي 35 كيلو دالتون. س: هل إنزيم APE 1 بروتين مُوسَم؟ ج: لا، إنزيم APE 1 ليس بروتينًا مُوسَمًا. س: ما هي الركيزة المستخدمة لاختبار نشاط إنزيم APE 1؟ ج: الركائز المستخدمة لاختبار إنزيماتنا موصوفة في تعريف الوحدة لكل إنزيم. يتم اختبار إنزيم APE 1 باستخدام جزيء أوليغونوكليوتيد مزدوج مكون من 34 قاعدة يحتوي على موقع AP واحد.