نيو إنجلاند بيولابس، M0288L، RNase HII

الفئات ذات الصلة RNases، مواصفات تحليل Epitranscriptome تعريف الوحدة يتم تعريف الوحدة الواحدة على أنها كمية الإنزيم المطلوبة لإنتاج إشارة فلورية تتوافق مع قطع 100 بيكومول من ركيزة الحمض النووي المزدوجة الاصطناعية التي تحتوي على نيوكليوتيد ريبوزي واحد بالقرب من مثبط زوج الفلوروفور/المثبط في 30 دقيقة عند 37 درجة مئوية في محلول ThermoPol 1X. شروط التفاعل: محلول تفاعل ThermoPol® بتركيز 1X، يُحضن عند 37 درجة مئوية. محلول تفاعل ThermoPol® بتركيز 1X، 20 ملي مولار Tris-HCl، 10 ملي مولار (NH4)2SO4، 10 ملي مولار KCl، 2 ملي مولار MgSO4، 0.1% Triton® X-100 (الأس الهيدروجيني 8.8 عند 25 درجة مئوية). محلول التخزين: 20 ملي مولار Tris-HCl، 100 ملي مولار NaCl، 1 ملي مولار DTT، 1 ملي مولار EDTA، 50% جلسرين. التعطيل الحراري: لا توجد وحدة. شروط فحص الوحدة : محلول تفاعل ThermoPol® بتركيز 1X مع 30 نانومولار من جزيء dsDNA اصطناعي مكون من 26 قاعدة يحتوي على نيوكليوتيد ريبوزي داخلي في حجم تفاعل إجمالي قدره 150 ميكرولتر. الأسئلة الشائعة : س: لا يمكن تعطيل RNase HII بالحرارة. كيف يمكن تعطيل RNase HII؟ ج: يمكن تعطيل إنزيم RNase HII بإضافة SDS إلى التفاعل بتركيز نهائي قدره 0.1%. س: من أي جانب من النيوكليوتيد الريبي يقطعه إنزيم RNase HII؟ ج: يقوم إنزيم RNase HII بقطع الطرف 5' للنيوكليوتيد الريبي ضمن سياق جزيء DNA مزدوج. ويترك طرفًا فوسفاتيًا في الطرف 5' وطرفًا هيدروكسيليًا في الطرف 3'.