مختبرات نيو إنجلاند البيولوجية، M0336S، hSMUG1

الفئات ذات الصلة: إنزيمات إصلاح الحمض النووي وإنزيمات النوكلياز الداخلية الخاصة بالبنية. تعريف الوحدة: تُعرف الوحدة الواحدة بأنها كمية الإنزيم المطلوبة لاستئصال 1 بيكومول من ديوكسي يوراسيل من جزيء أوليغونوكليوتيد مزدوج مكون من 34 قاعدة يحتوي على موقع ديوكسي يوراسيل واحد في حجم تفاعل إجمالي قدره 10 ميكرولتر في ساعة واحدة عند درجة حرارة 37 درجة مئوية. شروط التفاعل: محلول NEBuffer™ 1 بتركيز 1X، مُضاف إليه 100 ميكروغرام/مل من الألبومين المُعاد تركيبه، من الدرجة المستخدمة في البيولوجيا الجزيئية. يُحضن عند درجة حرارة 37 درجة مئوية. محلول NEBuffer™ 1 بتركيز 1X، 10 ملي مولار من ثنائي-تريس-بروبان-هيدروكلوريد، 10 ملي مولار من كلوريد المغنيسيوم، 1 ملي مولار من ثنائي ثيوثريتول (DTT) (الأس الهيدروجيني 7 عند 25 درجة مئوية). محلول التخزين: 10 ملي مولار من تريس-هيدروكلوريد، 250 ملي مولار من كلوريد الصوديوم، 1 ملي مولار من ثنائي ثيوثريتول (DTT)، 0.1 ملي مولار من حمض الإيثيلين ديامين رباعي الأسيتيك (EDTA)، 200 ميكروغرام/مل من الألبومين المُعاد تركيبه، 50% جلسرين، 0.15% تريتون® X-100، الأس الهيدروجيني 7.4 عند 25 درجة مئوية. التثبيط الحراري: 65 درجة مئوية لمدة 20 دقيقة. الوزن الجزيئي النظري: 29861 دالتون. شروط فحص الوحدة : محلول NEBuffer™ 1 بتركيز 1X مُضاف إليه 100 ميكروغرام/مل من الألبومين المُعاد تركيبه. ميكروغرام/مل من الألبومين المؤتلف يحتوي على 5 بيكومول من ثنائي أوليغونوكليوتيد موسوم بصبغة فلورية في حجم تفاعل إجمالي قدره 10 ميكرولتر. بعد تحرير dU، يُفصل الأوليغونوكليوتيد بمعالجة موقع AP الناتج بـ 100 ملي مولار من هيدروكسيد الصوديوم لمدة 10 دقائق عند 80 درجة مئوية. الأسئلة الشائعة : س: ما هو نشاط hSMUG1 في محاليل NEBuffers من 1 إلى 4؟ ج: يتمتع hSMUG1 بنشاط كامل في NEBuffer 1، وNEBuffer r1.1، وNEBuffer 4، وrCutSmart. تبلغ فعاليته 25% في NEBuffer 3. لا يُنصح باستخدامه في NEBuffer 2. س: ما هو الوزن الجزيئي لـ hSMUG1؟ ج: الوزن الجزيئي لـ hSMUG1 هو 29.86 كيلو دالتون. س: ما هي الركيزة المستخدمة لاختبار hSMUG1؟ ج: تُدرج الركائز المستخدمة لاختبار نشاط الإنزيم ضمن تعريف الوحدة لكل إنزيم. يُختبر hSMUG1 باستخدام أوليغونوكليوتيد مكون من 34 قاعدة يحتوي على موقع dU واحد. س: هل hSMUG1 بروتين مُوسَم؟ ج: لا، hSMUG1 ليس بروتينًا مُوسَمًا.