نيو إنجلاند بيولابس، M0569S، إنزيم ربط الحمض النووي T4 المثبت

هل تبحث عن تركيبات وأنواع إضافية من إنزيم T4 DNA Ligase؟ الفئات ذات الصلة: تطبيقات إنزيمات DNA Ligase، ربط الحمض النووي غير المستنسخ، ربط الحمض النووي، ربط الحمض النووي المستنسخ. المواصفات: شروط التفاعل: محلول تفاعل T4 DNA Ligase بتركيز 1X، محلول تفاعل T4 DNA Ligase بتركيز 1، 50 ملي مولار Tris-HCl، 10 ملي مولار MgCl2، 1 ملي مولار ATP، 10 ملي مولار DTT (الأس الهيدروجيني 7.5 عند 25 درجة مئوية). تركيز الاستخدام: 10 مليغرام/مل. محلول التخزين: 10 ملي مولار Tris-HCl، 1 ملي مولار DTT، 0.1 ملي مولار EDTA، 50 ملي مولار KCl، 50% جلسرين، الأس الهيدروجيني 7.4 عند -20 درجة مئوية. التعطيل الحراري: 65 درجة مئوية لمدة 10 دقائق. شروط فحص الوحدة: المنتج متوفر بتركيز 10 مليغرام/مل، مما يوفر 60 وحدة طرفية متماسكة (CEU) لكل ميكرولتر من المعلق. الأسئلة الشائعة : س: كيف يُخزَّن ويُعالَج إنزيم T4 DNA Ligase المُثبَّت (NEB #M0569)؟ ج: يُخزَّن إنزيم T4 DNA Ligase المُثبَّت عند درجة حرارة -20 درجة مئوية. لا يُخزَّن الخرز عند درجة حرارة -80 درجة مئوية لتجنب دورات التجميد والذوبان المتكررة. عند استلام المنتج، نوصي بتدوير الأنبوب لفترة وجيزة باستخدام جهاز طرد مركزي صغير لجمع الخرز ومحلول التخزين معًا في قاع الأنبوب. قد يؤدي الخلط غير المقصود أثناء الشحن إلى انفصال الخرز عن المحلول، مما قد يتسبب في جفاف الخرز داخل الأنبوب أثناء التخزين وفقدان نشاط الإنزيم. يحتوي محلول التخزين على الجلسرين لتحقيق الاستقرار الأمثل، ولذلك، لا يتجمد المحلول تمامًا عند درجة حرارة -20 درجة مئوية، على عكس أنواع الخرز الأخرى. كما أن الخرز لا يتكتل أو يتحلل بشكل دائم عند تجميده. س: كيف أخلط أو أُعيد تعليق خرز إنزيم T4 DNA Ligase المُثبَّت (NEB #M0569) قبل الاستخدام؟ أ: يجب إخراج إنزيم T4 DNA Ligase المُثبَّت من درجة حرارة -20 درجة مئوية ووضعه مباشرةً على الثلج قبل استخدامه. قبل الاستخدام، نوصي بتدوير الأنبوب لفترة وجيزة في جهاز طرد مركزي صغير، ثم مزجه باستخدام ماصة لإعادة تعليق الخرزات بالكامل وتحقيق التجانس. يجب توخي الحذر لأن المحلول لزج: اغمر طرف الماصة فقط عند السحب، وتجنب تكوين رغوة أثناء المزج. يمكن إجراء المزج بضبط حجم الماصة على حوالي 50% من حجم الأنبوب (لتجنب دخول الهواء) وسحب المحلول لأعلى ولأسفل 10 مرات على الأقل. بعد استخدام الكمية المطلوبة، قم بتدوير الأنبوب لفترة وجيزة في جهاز طرد مركزي صغير قبل إعادة المنتج إلى درجة حرارة -20 درجة مئوية للتخزين.