نيو إنجلاند بيولابس، N0494S، سلم الحمض النووي فائق الالتفاف الممتد

يتيح سلم الحمض النووي الممتد فائق الالتفاف تحديد الحجم الدقيق لمجموعة واسعة من الحمض النووي فائق الالتفاف، بما في ذلك البلازميدات فائقة الالتفاف التي يصل حجمها إلى 15 كيلوبايت، ويحتوي على نطاق مرجعي ملائم عند 6 كيلوبايت. الفئات ذات الصلة: علامات وسلالم الحمض النووي، تطبيقات علامات وسلالم الحمض النووي، مواصفات تحليل الحمض النووي، القواعد، كتلة القطعة (نانوغرام) زوج قاعدي 1 45 14996 2 45 12000 3 45 10002 4 45 8001 5 136 6000 6 45 5000 7 45 4000 8 45 3001 9 45 2017 نطاق الحجم الفعال من 2017 إلى 14996 زوج قاعدي، محلول التخزين: 10 ملي مولار Tris-HCl، 1 ملي مولار EDTA، درجة الحموضة 8 عند 25 درجة مئوية، الأسئلة الشائعة : س: هل يمكنني استخدام صبغة Midori Green مع سلالم الحمض النووي من NEB؟ ج: سلالم الحمض النووي من NEB، بما في ذلك سلم الحمض النووي Quick-Load Purple 1 kb Plus (NEB #N0550)، متوافقة مع صبغة Midori Green دون أي تداخل ملحوظ. يرجى اتباع توصيات الشركة المصنعة للصبغة بدقة. نظرًا لانخفاض شدة الصبغة، قد تحتاج إلى تحميل ما بين 1 و2 ميكروغرام من سلم الحمض النووي لتحقيق رؤية جيدة في ظل ظروف الإضاءة فوق البنفسجية القياسية. س: هل يمكنني استخدام صبغات SYBR® و/أو GelRed® مع سلالم الحمض النووي من NEB؟ ج: نظرًا لأن الصبغات ذات الألفة العالية لربط الأحماض النووية قد تؤثر على هجرة الحمض النووي أثناء الفصل الكهربائي، يُنصح بشدة بتلوين الهلامات بعد الفصل الكهربائي باستخدام صبغات SYBR وGelRed. يؤدي التلوين بعد الفصل الكهربائي إلى حساسية فائقة ويزيل احتمال تداخل الصبغة مع هجرة الحمض النووي. على الرغم من إمكانية تحضير هلامات الأغاروز مسبقًا بهذه الصبغات، إلا أن هجرة و/أو دقة بعض سلالم الحمض النووي قد تتأثر. لذلك، قد تتطلب بعض سلالم الحمض النووي تحسينًا/تخفيفًا عند تشغيلها على هلامات مُحضرة مسبقًا بهذه الصبغات. للحصول على أفضل النتائج، يرجى اتباع توصيات الشركة المصنعة للصبغة وبروتوكولاتها بعناية، وخاصة فيما يتعلق بكميات التحميل. نوصي باستخدام سلم الحمض النووي 1 كيلوبايت بلس للتلوين الآمن (NEB #N0559) عند استخدام SYBR أو GelRed كأصباغ جاهزة، حيث تم تحسين سلم الحمض النووي هذا خصيصًا لهذا التطبيق. بالإضافة إلى ذلك، تجنب استخدام أصباغ التحميل التي تحتوي على SDS، لأن SDS قد يتسبب في ظهور نمط غير طبيعي للحزم في الهلامات الجاهزة. نوصي باستخدام صبغة تحميل الهلام، بنفسجية (6X)، خالية من SDS (NEB #B7025) لهذا التطبيق. س: لماذا يطفو سلم الحمض النووي الخاص بي خارج الآبار؟ لماذا لا تظهر أي حزم في مسار هلام سلم الحمض النووي الخاص بي؟ ج: إذا تم تجميد سلم الحمض النووي الجاهز للتحميل أو صبغة التحميل 6X المرفقة مع السلم في أي وقت، فسيشكل محلول فيكول تدرجًا في الكثافة في القارورة عند إذابته. أي حجم يتم سحبه بالماصة من أعلى القارورة سيحتوي فقط على كمية صغيرة من عامل الكثافة وسيطفو خارج الآبار. لمنع ذلك، اخلط جيدًا عند الاستلام وقبل الاستخدام.