نيو إنجلاند بيولابس، N3239S، سلم الحمض النووي Quick-Load® 1 kb Extend

الفئات ذات الصلة علامات وسلالم الحمض النووي تطبيقات تحليل الحمض النووي المواصفات القواعد كتلة القطعة (نانوغرام) زوج قاعدي 1 30 48,502 2a 15 20,066 2b 15 19,871 3 45 15,000 4 33 10,002 5 33 8,001 6 40 6,001 7 33 5,001 8 26 4,001 9 100 3,001 10 37 2,000 11 27 1,500 12 33 1,000 13a 18 517 13b 17 500 التحضير يتم هضم الحمض النووي المزدوج بالكامل باستخدام إنزيمات التقييد المناسبة، ويتم استخلاص الفينول ومعادلته في محلول التخزين. نطاق الحجم الفعال : من 500 إلى 48502 زوجًا قاعديًا. محلول التخزين: 2.5% فيكول-400، 11 ملي مولار إيدتا، 3.3 ملي مولار تريس-هيدروكلوريد، 0.017% إس دي إس، 0.015% أزرق بروموفينول، درجة الحموضة 8 عند 25 درجة مئوية. الأسئلة الشائعة : س: لماذا تظهر سلالم الحمض النووي في لطخة ساوثرن؟ ما هو تسلسل أو تركيب حزم السلم؟ ج: لوحظت هذه الظاهرة في العديد من المختبرات، وعلى الرغم من عدم وجود تفسير قاطع، إلا أن هناك مصدرين محتملين للتهجين غير المحتمل على ما يبدو بين مسبار المستخدم والحمض النووي للسلم. أحد الاحتمالات هو أنه إذا تم توليد المجس نفسه من بلازميد قائم على pUC أو pBR، فقد يكون هناك مستوى منخفض من تلوث البلازميد في المجس الذي يتهجن مع نطاقات السلم، والتي تحتوي معظمها على تسلسلات شبيهة بـ pUC. بدلاً من ذلك، قد يكون هناك مجرد تشابه عشوائي منخفض التخصص بين المجس وجزء من أجزاء السلم. تتكون النطاقات بالكامل من الحمض النووي المشتق إما من pUC أو من الحمض النووي لفيروس غدي 2، والذي يُستخدم كحمض نووي حشو لتوليد بلازميدات بالحجم المناسب للعلامات. نظرًا لأن الكمية المولية للحمض النووي في نطاقات السلم غالبًا ما تكون فائضة جدًا مقارنةً بالحمض النووي الذي يتم فحصه، حتى التشابه المنخفض نسبيًا يمكن أن يؤدي إلى دمج كافٍ من المجس لإعطاء إشارة قابلة للكشف بسهولة. س: لماذا يطفو سلم الحمض النووي الخاص بي خارج الآبار؟ لماذا لا توجد نطاقات مرئية في مسار هلام سلم الحمض النووي الخاص بي؟ ج: إذا تم تجميد سلم الحمض النووي الجاهز للتحميل أو صبغة التحميل 6X المرفقة به في أي وقت، فسيتشكل تدرج كثافة في محلول الفيكول داخل القارورة عند إذابته. أي كمية يتم سحبها من أعلى القارورة ستحتوي على كمية صغيرة فقط من عامل الكثافة وستطفو خارج الآبار. لمنع ذلك، يُرجى خلط المحلول جيدًا عند الاستلام وقبل الاستخدام.