نيو إنجلاند بيولابس، P0753S، فوسفاتاز البروتين لامدا (لامدا PP)

فوسفاتاز البروتين لامدا هو Mn الفئات ذات الصلة فوسفاتازات البروتين التطبيقات فوسفاتازات البروتين والكينيزات المواصفات تعريف الوحدة يتم تعريف الوحدة الواحدة على أنها كمية الإنزيم التي تحلل 1 نانومول من فوسفات بارا-نيتروفينيل (50 ملي مولار) (NEB #P0757) في دقيقة واحدة عند 30 درجة مئوية في حجم تفاعل إجمالي قدره 50 ميكرولتر. شروط التفاعل: عبوة واحدة من محلول NEBuffer لإنزيمات الفوسفاتاز المعدنية البروتينية (PMP)، مضاف إليها 1 ملي مول من كلوريد المنغنيز (MnCl2)، حضن عند 30 درجة مئوية. عبوة واحدة من محلول NEBuffer لإنزيمات الفوسفاتاز المعدنية البروتينية (PMP)، 50 ملي مول من HEPES، 100 ملي مول من كلوريد الصوديوم (NaCl)، 2 ملي مول من DTT، 0.01% من Brij 35 (الأس الهيدروجيني 7.5 عند 25 درجة مئوية). محلول التخزين: 50 ملي مول من HEPES، 100 ملي مول من كلوريد الصوديوم (NaCl)، 2 ملي مول من DTT، 0.01% من Brij 35، 0.1 ملي مول من EGTA، 0.1 ملي مول من كلوريد المنغنيز (MnCl2)، 50% جلسرين، الأس الهيدروجيني 7.5 عند 25 درجة مئوية. التعطيل الحراري : 65 درجة مئوية لمدة 60 دقيقة. الوزن الجزيئي النظري: 25 كيلو دالتون. النشاط النوعي : 800,000 وحدة/ملغ. ملاحظات التخزين: تجنب دورات التجميد/الذوبان المتكررة. ملاحظات الشحن: يُشحن على ثلج جاف. الأسئلة الشائعة: س: هل يمكنك التوصية بمحلول تحلل خلوي متوافق مع فوسفاتاز بروتين لامدا (NEB #P0753)؟ ج: فوسفاتاز بروتين لامدا (لامدا PP) حساس للغاية لمحاليل التفاعل المختلفة. يُثبط SDS الإنزيم بأي تركيز. من الناحية المثالية، يجب أن يكون لمحلول التحلل تركيب أقرب ما يكون إلى المحلول الأمثل الموصى به لـ لامدا PP، وهو: محلول NEBuffer 1X لـ PMP: 50 مليمولار HEPES، 100 مليمولار NaCl، 2 مليمولار DTT، 0.01% Brij-35، درجة الحموضة 7.5، مُضاف إليه 1 مليمولار MnCl2. تُرفق هذه المحاليل مع الإنزيم. يمكن أن يحتوي محلول التحلل المثالي أيضًا على أي منظف غير أيوني خفيف مثل 1% NP-40 أو Triton X-100. إذا لم يكن محلول PMP مثاليًا، فإن محلول التحلل الموصى به الآخر هو: 20 ملي مولار Tris-HCl، 150 ملي مولار NaCl، 1 ملي مولار EDTA، 1 ملي مولار EGTA، 1% Triton X-100، 1 ميكروغرام/مل leupeptin، درجة الحموضة 7.5.