مختبرات نيو إنجلاند البيولوجية، P6010L، كازين كيناز II (CK2)

إنزيم كازين كيناز II (CKII) هو كيناز بروتين سيرين/ثريونين نشط بشكل دائم، ويتكون من وحدتين فرعيتين محفزتين من نوع ألفا (α) بوزن 44 كيلو دالتون، ووحدتين فرعيتين تنظيميتين من نوع بيتا (β) بوزن 26 كيلو دالتون، مرتبة في تكوين α2β2 لتشكيل متغايرات رباعية مستقرة. النمط العام للتعرف على الفسفرة بواسطة CKII هو SXXE/D. التصنيفات ذات الصلة: كينازات البروتين، التطبيقات، فوسفاتازات وكينازات البروتين، المواصفات، تعريف الوحدة: وحدة واحدة من الإنزيم تحفز فسفرة 1 بيكومول من الركيزة RRRDDD S DDD في 10 دقائق عند درجة حرارة 30 درجة مئوية. شروط التفاعل: محلول NEBuffer™ 1X لبروتينات الكيناز (PK)، مع إضافة 200 ميكرومول من ATP، يُحضن عند 30 درجة مئوية. محلول NEBuffer™ 1X لبروتينات الكيناز (PK): 50 ملي مول من Tris-HCl، 10 ملي مول من MgCl2، 0.1 ملي مول من EGTA، 2 ملي مول من DTT، 0.01% من Brij 35 (الأس الهيدروجيني 7.5 عند 25 درجة مئوية). محلول التخزين: 20 ملي مول من Tris-HCl، 350 ملي مول من NaCl، 1 ملي مول من EDTA، 2 ملي مول من DTT، 0.1% من Triton® X-100، الأس الهيدروجيني 7.5 عند 25 درجة مئوية. ملاحظات التخزين: تجنب دورات التجميد والذوبان المتكررة. الأسئلة الشائعة: س: هل يمكنك التوصية بمثبطات لـ CK2 (P6010)؟ ج: يثبط الهيبارين عند قيمة Ki تبلغ 1.4 نانومول. س: ما هي كمية كازين كيناز II (NEB# P6010) التي يجب استخدامها؟ ج: تختلف كمية الإنزيم المطلوبة باختلاف الركائز المستخدمة. ابدأ بـ 1-2 ميكرولتر لكل 1 ميكروغرام من البروتين لمدة ساعة واحدة في تفاعل حجمه 10-25 ميكرولتر. إذا بقيت مادة غير مُفسفرة، اترك التفاعل طوال الليل. س: ما هو التسلسل المتفق عليه لهذا الكيناز CK2 (P6010)؟ ج: التسلسل المتفق عليه هو SXXE/D. يقوم هذا الكيناز بفسفرة بقايا السيرين أو الثريونين الموجودة في الطرف الأميني للأحماض الأمينية الحمضية.