نيو إنجلاند بيولابس، P7718S، معيار البروتين الملون مسبقًا باللون الأزرق، نطاق واسع (11-250 كيلو دالتون)

معيار البروتين الأزرق المصبوغ مسبقًا، واسع النطاق، هو مزيج من بروتينات مُعاد تركيبها عالية النقاء، مُصبوغة مسبقًا، مرتبطة تساهميًا بصبغة زرقاء، والتي تنفصل إلى 11 حزمة حادة عند إجراء الفصل الكهربائي. الفئات ذات الصلة : معايير البروتين، العلامات والسلالم، تطبيقات معايير البروتين، أدوات تحليل البروتين. المواصفات: محلول التخزين : 62.5 ملي مولار فوسفات ثلاثي، 1 ملي مولار EDTA، 2% SDS، 10 ملي مولار DTT، 1 ملي مولار NaN3، 33% جلسرين، درجة الحموضة 7.5 عند -20 درجة مئوية. الأسئلة الشائعة : س: ما الفرق بين معيار البروتين الأزرق المصبوغ مسبقًا الجديد، واسع النطاق، ومعيار البروتين الأزرق المصبوغ مسبقًا السابق من NEB؟ ج: يمكن استخدام معيار البروتين الأزرق المصبوغ مسبقًا الجديد (NEB #P7718) كبديل مباشر لمعيار البروتين الأزرق المصبوغ مسبقًا السابق (NEB #P7706). تختلف البروتينات المستخدمة في معيار البروتين الأزرق الملون الجديد عن تلك المستخدمة في معيار البروتين الأزرق الملون السابق، لذا من المهم ملاحظة أن الأوزان الجزيئية الظاهرية ستكون مختلفة قليلاً. يحتوي معيار البروتين الأزرق الملون الجديد على 11 بروتينًا تتراوح أوزانها الجزيئية بين 11 و250 كيلو دالتون؛ بينما احتوى معيار البروتين الأزرق الملون السابق على 11 بروتينًا تتراوح أوزانها الجزيئية بين 11 و190 كيلو دالتون. س: ما هو تركيز البروتين في معيار البروتين الأزرق الملون ذي النطاق الواسع؟ ج: يبلغ تركيز البروتين الإجمالي في معيار البروتين الأزرق الملون ذي النطاق الواسع حوالي 2.5 ملغم/مل. ومع ذلك، فهذا مجرد تقدير. لا نوصي باستخدام هذا المعيار أو أي معيار بروتيني آخر كأداة للقياس الكمي الدقيق لتركيز البروتين. هذه المنتجات مخصصة لتقدير الوزن الجزيئي للبروتين. س: ما هو حجم العبوة الصغيرة والعبوة الكبيرة من معايير البروتين من NEB؟ ج: تحتوي العبوات الصغيرة من معايير البروتين من NEB (NEB #P7717، #P7718، #P7719) على 0.45 مل، وهو ما يعادل 150 مسارًا هلاميًا عند حجم التحميل الموصى به وهو 3 ميكرولتر للهلام المصغر. أما العبوات الكبيرة فتحتوي على 2.25 مل، وهو ما يعادل 750 مسارًا هلاميًا عند حجم التحميل الموصى به وهو 3 ميكرولتر للهلام المصغر. س: لاحظتُ أن الأوزان الجزيئية التي ألاحظها تختلف قليلًا عن تلك المذكورة. هل يمكنك توضيح ذلك؟ ج: قد تختلف قيم الوزن الجزيئي الظاهري لمعيار البروتين الأزرق الملون مسبقًا، واسع النطاق، عند تشغيله على أنواع ونسب هلامية مختلفة. ويعود سبب هذا التباين إلى اختلاف تركيبات الهلامات المختلفة (عوامل التخزين المؤقت، والقوة الأيونية، ودرجة الحموضة). وتنتج هذه الاختلافات عن الارتباط التساهمي للصبغة بالبروتينات المستخدمة في المعيار. يمكن لهذه الجزيئات أن تحمل شحنة كهربائية، مما يُغير قدرة SDS على الارتباط بالبروتين، بالإضافة إلى مساهمتها في الشحنة الكلية للبروتين. هذه الشحنة المتغيرة ستؤثر على حركته داخل الهلام. لقد قمنا بتحليل معيار البروتين الأزرق المُلوّن مسبقًا من NEB، ذو النطاق الواسع، باستخدام أنواع مختلفة من الهلامات الشائعة الاستخدام. النتائج موضحة أدناه: س: تركتُ معيار البروتين الخاص بي عن طريق الخطأ في درجة حرارة الغرفة لعدة أيام. هل لا يزال من الآمن استخدامه؟ ج: أظهرت اختبارات الثبات أن معايير البروتين من NEB ستظل ثابتة لمدة تصل إلى أسبوعين في درجة حرارة الغرفة (25 درجة مئوية) ولمدة تصل إلى عام واحد في درجة حرارة 4 درجات مئوية. مع ذلك، لا نوصي بتخزين معيار البروتين الخاص بك في أي درجة حرارة أخرى غير درجة حرارة التخزين المثلى، وهي -20 درجة مئوية، لضمان صلاحية لمدة عامين.