نيو إنجلاند بيولابس، P8109S، إندوبروتياز LysC

إنزيم LysC الداخلي هو إنزيم سيرين داخلي يقوم بفصل الروابط الببتيدية عند الطرف الكربوكسيلي لليسين. يُعد LysC إنزيمًا عالي الجودة مناسبًا لتحليل التسلسل، وهو ملائم لتطبيقات علم البروتينات وعلم السكريات. التصنيفات ذات الصلة : البروتيازات، تطبيقات تحليل البروتينات، علم السكريات وعلم البروتينات السكرية، العلاجات الحيوية وتحليل الأجسام المضادة، هضم البروتينات. المواصفات: الاستخدام: التركيز: 100 نانوغرام/ميكرولتر ، الوزن الجزيئي الظاهري : 30000 دالتون. الأسئلة الشائعة : س: ما هي ظروف المحلول المنظم التي يمكن استخدام إنزيم LysC الداخلي فيها؟ هل هناك أي تطبيقات خاصة يكون فيها LysC فعالًا بشكل خاص؟ ج: يعمل LysC في نطاق واسع من الرقم الهيدروجيني، ويمكنه أيضًا العمل في ظل بعض الظروف المسببة لتشوه البروتينات، مثل تركيز اليوريا العالي (5-8 مولار). لهذا السبب، يُستخدم هذا الإنزيم غالبًا مع البروتينات أو مخاليط البروتينات صعبة الهضم. يُستخدم عادةً نطاق درجة حموضة للمحلول المنظم يتراوح بين 7 و9. يمكن استخدام إنزيم إندوبروتياز LysC في ظروف محاليل منظمة حمضية، بما في ذلك أسيتات الصوديوم بتركيز 20 ملي مولار ودرجة حموضة تتراوح بين 4.5 و6.5. س: ما هي كمية إنزيم إندوبروتياز LysC التي أحتاجها لهضم البروتين؟ ج: نوصي بنسبة LysC إلى الركيزة بين 1:50 و1:100. مع ذلك، لاحظنا وجود نواتج هضم كبيرة باستخدام نسبة منخفضة تصل إلى 1:250. كشف بحث في قاعدة البيانات عن تغطية تسلسلية بنسبة 65% للنسبة الأخيرة، وأكثر من 80% للنسبة الأولى. س: هل يمكن استخدام إنزيم إندوبروتياز LysC في هضم مزدوج مع تريبسين ألترا؟ ج: وُجد أن الهضم المشترك بالتريبسين وLysC يُحسّن تغطية البروتين في دراسات البروتينات، خاصةً بين البروتينات منخفضة الوفرة. وقد استُخدمت بنجاح العديد من الظروف المختلفة. يُرجى الرجوع إلى المراجع أدناه لمزيد من التفاصيل. ★️ ... وانغ، واي. وآخرون، 2016، "تطوير طريقة لتحضير العينات لرصد الروابط ثنائية الكبريتيد الصحيحة للأجسام المضادة وحيدة النسيلة باستخدام كروماتوغرافيا السائل-مطياف الكتلة"، مجلة الكيمياء الحيوية التحليلية، 495، 21-28. س: هل يمكن استخدام إنزيم إندوبروتياز LysC في محاليل منظمة حمضية؟ ج: نعم، يمكن استخدام إنزيم إندوبروتياز LysC في محاليل منظمة حمضية. وقد لوحظ انقسام قوي ينتج عنه النواتج في المحاليل المنظمة التالية: أسيتات الصوديوم 20 ملي مولار، الرقم الهيدروجيني 4.5، أسيتات الصوديوم 20 ملي مولار، الرقم الهيدروجيني 5.5، أسيتات الصوديوم 20 ملي مولار، الرقم الهيدروجيني 6.0، أسيتات الصوديوم 20 ملي مولار، الرقم الهيدروجيني 6.5. كما يمكن إجراء الهضم في محلول منظم Tris ضمن نطاق الرقم الهيدروجيني من 7.0 إلى 9.1.