مختبرات نيو إنجلاند البيولوجية، R0138S، SalI

تم إيقاف إنتاج الحجم الكبير المركز من هذا المنتج في 15 ديسمبر 2025. وسيظل الحجم الصغير المركز متوفرًا. الفئات ذات الصلة: إنزيمات القطع المحددة S، إنزيمات قطع محددة موفرة للوقت. التطبيقات: الاستنساخ السريع: سرّع عمليات الاستنساخ باستخدام كواشف من NEB. مواصفات هضم إنزيم القطع: تعريف الوحدة : تُعرَّف الوحدة الواحدة بأنها كمية الإنزيم اللازمة لهضم 1 ميكروغرام من الحمض النووي λ (هضم HindIII) في ساعة واحدة عند 37 درجة مئوية في حجم تفاعل إجمالي قدره 50 ميكرولتر. شروط التفاعل: محلول NEBuffer™ r3.1 بتركيز 1X، يُحضن عند درجة حرارة 37 درجة مئوية. محلول NEBuffer™ r3.1 بتركيز 1X، يحتوي على: 100 ملي مولار كلوريد الصوديوم، 50 ملي مولار Tris-HCl، 10 ملي مولار كلوريد المغنيسيوم، 100 ميكروغرام/مل ألبومين مُعاد التركيب (الأس الهيدروجيني 7.9 عند 25 درجة مئوية). النشاط في محاليل NEBuffer : NEBuffer™ r1.1: أقل من 10%، NEBuffer™ r2.1: أقل من 10%، NEBuffer™ r3.1: 100%، محلول rCutSmart™: أقل من 10%. توافق المخفف : المخفف أ: محلول التخزين، يحتوي على: 10 ملي مولار Tris-HCl، 50 ملي مولار كلوريد البوتاسيوم، 1 ملي مولار DTT، 0.1 ملي مولار EDTA، 300 ميكروغرام/مل ألبومين مصل البقر، 50% جلسرين، الأس الهيدروجيني 7.5 عند 25 درجة مئوية. التثبيط الحراري 65 درجة مئوية لمدة 20 دقيقة. حساسية المثيلة : مثيلة Dam: غير حساسة، مثيلة Dcm: غير حساسة، مثيلة CpG: محظورة. الأسئلة الشائعة: س: هل يتأثر إنزيم SalI بالمثيلة؟ ج: يتم حظر إنزيم SalI بواسطة مثيلة CpG. للحصول على معلومات محدثة حول حساسية المثيلة، يرجى زيارة صفحة مثيلة Dam-Dcm وCpG أو REBASE. س: هل إنزيم SalI حساس لدرجة الحموضة؟ ج: ينخفض ​​نشاط إنزيم SalI إذا لم تكن درجة حموضة محلول التفاعل بين 7.8 و8.0. س: هل يتأثر إنزيم SalI بنشاط النجوم؟ ج: نعم، يمكن أن يؤدي ارتفاع نسبة الجلسرين أو ارتفاع تركيز الإنزيم أو طول مدة التفاعل إلى زيادة نشاط إنزيم SalI. س: هل يُظهر إنزيم SalI نشاطًا منخفضًا على الحمض النووي فائق الالتفاف؟ ج: قد تتطلب البلازميدات فائقة الالتفاف ما يصل إلى 10 أضعاف كمية إنزيم SalI اللازمة للهضم الكامل مقارنةً بالحمض النووي الخطي. س: كم عدد القواعد التي يحتاجها إنزيم SalI للقطع بالقرب من النهايات؟ ج: عند قطع الحمض النووي بالقرب من نهاياته، يجب إجراء القطع عند درجة حرارة 37 درجة مئوية لمدة ساعة واحدة باستخدام 10 وحدات/ميكروغرام من الحمض النووي مع حد أدنى من 3 قواعد على كل جانب من تسلسل التعرف. س: ما هو الوزن الجزيئي لإنزيم SalI؟ ج: 30 كيلو دالتون. س: هل يلزم عدد أكبر من وحدات إنزيم SalI لقطع الحمض النووي فائق الالتفاف مقارنةً بالحمض النووي لامدا؟ ج: تتطلب بلازميدات ليموزين فائقة الالتفاف، وpBR322، وpUC ما يصل إلى 10 أضعاف كمية الإنزيم لإتمام عملية الهضم. س: ما هو نشاط إنزيم SalI عند درجة حرارة 25 درجة مئوية؟ ج: يتراوح نشاطه بين 50 و75%. س: هل يجب عليّ تحضير عمليات الهضم باستخدام إنزيمات Time-Saver™ المعتمدة لمدة تتراوح بين 5 و15 دقيقة؟ هل يمكنني إجراء عملية هضم لفترة أطول؟ ج: تتميز إنزيمات Time-Saver™ من NEB بسرعة عملها (5-15 دقيقة)، كما أنها مصممة ومؤهلة لتحمل عمليات الهضم طوال الليل دون تحلل الحمض النووي. س: ما هي إنزيمات التقييد من NEB التي يتم تزويدها بصبغة تحميل الجل، البنفسجي (6X)؟ ج: يتم تزويد جميع إنزيمات التقييد HF ومعظم إنزيمات التقييد غير HF من NEB بصبغة تحميل الجل، البنفسجي (6X). الإنزيمات المقيدة غير HF التي تأتي مع الصبغة الأرجوانية هي: AatII AsiSI BsmBI-v2 EagI MboI NlaIII PvuI SmaI Acil AvrII BspHI EcoRI MboII NotI RsaI SpeI AfeI BamHI BsrGI EcoRV MluI NspI SacI StuI AflII BbsI ClaI Esp3I FseI MseI PacI SacII AgeI BglII DdeI HaeIII MspI PciI Sali XbaI AluI BsaI DpnI HindIII NcoI PmeI SapI XhoI ApaI BseYI DpnII HpaI NdeI PsiI-v2 SfaNI XmaI ApeKI BsiWI DraI KpnI NheI PstI SfiI XmnI AscI * يتم أيضًا توفير جميع إنزيمات تقييد HF مع تحميل الجل الصبغ، الأرجواني (6X) س: هل يمكنك معرفة ذلك هل يمكنك إخباري بالمزيد عن التحول من الألبومين البقري المصل (BSA) إلى الألبومين المُعاد تركيبه (rAlbumin) في محاليل NEBuffers؟ ج: يسرّ شركة NEB أن تعلن عن استبدال محاليل التفاعل المحتوية على الألبومين البقري المصل (NEBuffer 1.1، 2.1، 3.1، وCutSmart® Buffer) بمحاليل تحتوي على الألبومين المُعاد تركيبه (NEBuffer r1.1، r2.1، r3.1، وrCutSmart™ Buffer). كما أننا بصدد تحويل جميع تركيبات إنزيمات التقييد لتشمل الألبومين المُعاد تركيبه. ونعتقد أن التخلي عن المنتجات الحيوانية خطوة في الاتجاه الصحيح، ونقدم هذا التحسين بنفس السعر.