مختبرات نيو إنجلاند البيولوجية، R0169L، Sau3AI

تمت إعادة صياغة Sau3AI باستخدام الألبومين المؤتلف (rAlbumin) بدءًا من رقم الدفعة 10317346. الفئات ذات الصلة: إنزيمات القطع المحددة. التطبيقات: هضم إنزيمات القطع. المواصفات: تعريف الوحدة : تُعرَّف الوحدة الواحدة بأنها كمية الإنزيم اللازمة لهضم 1 ميكروغرام من الحمض النووي λ في ساعة واحدة عند درجة حرارة 37 درجة مئوية في حجم تفاعل إجمالي قدره 50 ميكرولتر. شروط التفاعل: محلول NEBuffer™ r1.1 بتركيز 1X، يُحضن عند درجة حرارة 37 درجة مئوية. يحتوي المحلول على: 10 ملي مولار من ثنائي-تريس-بروبان-هيدروكلوريد، 10 ملي مولار من كلوريد المغنيسيوم، 100 ميكروغرام/مل من الألبومين المؤتلف (الأس الهيدروجيني 7 عند 25 درجة مئوية). النشاط في محاليل NEBuffer : NEBuffer™ r1.1: 100%، NEBuffer™ r2.1: 50%، NEBuffer™ r3.1: 10%، محلول rCutSmart™: 100%. توافق المخفف : محلول التخزين المخفف A: 10 ملي مولار من تريس-هيدروكلوريد، 50 ملي مولار من كلوريد البوتاسيوم، 1 ملي مولار من ثنائي ثيوثريتول، 0.1 ملي مولار من حمض الإيثيلين ديامين رباعي الأسيتيك، 200 ميكروغرام/مل من الألبومين المؤتلف، 50% جلسرين، الأس الهيدروجيني 7.4 عند 25 درجة مئوية. التثبيط الحراري. 65 درجة مئوية لمدة 20 دقيقة. حساسية المثيلة : مثيلة dam: غير حساسة. مثيلة dcm: غير حساسة. مثيلة CpG: محجوبة بالتداخل. الأسئلة الشائعة: س: ما الفرق بين DpnI وDpnII وMboI وSau3AI؟ ج: جميعها تتعرف على نفس التسلسل، ولكن تختلف في حساسيتها للمثيلة. يقوم DpnI بقطع مواقع dam المُؤَدْنَة بالكامل ومواقع dam المُؤَدْنَة جزئيًا ببطء 60 مرة. يتشارك DpnII وMboI في حساسية المثيلة، ويقومان بقطع مواقع dam التي تفتقر إلى الأدينوميثيل؛ ويتم حجب كل منهما بواسطة مثيلة dam الكاملة، وربما بواسطة المثيلة الجزئية أيضًا. يقوم Sau3AI بقطع جميع مواقع dam بغض النظر عن الأدينوميثيل، ولكنه يُحجب تمامًا بواسطة السيتوزينات المُمَثْيَلَة داخل تسلسل dam. س: هل هذا الإنزيم حساس لمثيلة dam أو dcm أو CpG في الثدييات؟ ج: نعم. لا يستطيع هذا الإنزيم قطع مواقع التعرف في الحمض النووي الجينومي للثدييات التي تُحجب بتداخل مثيلة CpG. للحصول على معلومات مُحدثة حول حساسية المثيلة، يُرجى زيارة Dam-Dcm ومثيلة CpG أو REBASE. س: هل يُمكنكم إخباري المزيد عن التحوّل من الألبومين البقري المصل (BSA) إلى الألبومين المُعاد تركيبه (rAlbumin) في محاليل NEBuffers؟ ج: تُعلن NEB بفخر عن استبدال محاليل التفاعل المحتوية على الألبومين البقري المصل (NEBuffer 1.1، 2.1، 3.1 وCutSmart® Buffer) بمحاليل تحتوي على الألبومين المُعاد تركيبه (NEBuffer r1.1، r2.1، r3.1 وrCutSmart™ Buffer). كما أننا بصدد تحويل جميع تركيبات إنزيمات التقييد لتشمل الألبومين المُعاد تركيبه. نشعر أن الابتعاد عن المنتجات التي تحتوي على مكونات حيوانية هو خطوة في الاتجاه الصحيح، ونحن قادرون على تقديم هذا التحسين بنفس السعر.