مختبرات نيو إنجلاند البيولوجية، R0600S، BmrI

الفئات ذات الصلة: إنزيمات القطع المحددة B ، التطبيقات: هضم إنزيم القطع، المواصفات، تعريف الوحدة: تُعرف الوحدة الواحدة بأنها كمية الإنزيم المطلوبة لهضم 1 ميكروغرام من الحمض النووي λ (هضم Hind III) في ساعة واحدة عند 37 درجة مئوية في حجم تفاعل إجمالي قدره 50 ميكرولتر. شروط التفاعل: محلول NEBuffer™ r2.1 بتركيز 1X، يُحضن عند درجة حرارة 37 درجة مئوية. يحتوي المحلول على: 50 ملي مولار كلوريد الصوديوم، 10 ملي مولار Tris-HCl، 10 ملي مولار كلوريد المغنيسيوم، و100 ميكروغرام/مل من الألبومين المؤتلف (الأس الهيدروجيني 7.9 عند 25 درجة مئوية). النشاط في محاليل NEBuffer : NEBuffer™ r1.1: 75%، NEBuffer™ r2.1: 100%، NEBuffer™ r3.1: 75%، rCutSmart™ Buffer: 100%. توافق المخفف: محلول التخزين (المخفف B): 10 ملي مولار Tris-HCl، 300 ملي مولار كلوريد الصوديوم، 1 ملي مولار DTT، 0.1 ملي مولار EDTA، 500 ميكروغرام/مل BSA، 50% جلسرين، الأس الهيدروجيني 7.4 عند 25 درجة مئوية. التثبيط الحراري. 65 درجة مئوية لمدة 20 دقيقة. حساسية المثيلة : مثيلة dam: غير حساسة، مثيلة dcm: غير حساسة، مثيلة CpG: غير حساسة. الأسئلة الشائعة: س: هل ترتبط النهايات الناتجة عن BmrI جيدًا؟ ج: ينتج BmrI شظايا DNA ذات امتداد 3' أحادي القاعدة، وهي أصعب في الربط من الشظايا ذات النهايات غير المتداخلة. بعد هضم زائد بمقدار الضعف باستخدام BmrI، يمكن ربط أكثر من 85% من شظايا DNA. ومن بين هذه الشظايا، يمكن إعادة قطع أكثر من 95%. س: هل يُنصح بالهضم المطول باستخدام BmrI؟ ج: الهضم المطول غير مفيد لأن الإنزيم غير مستقر في التفاعل. س: هل هذا الإنزيم حساس لمثيلة dam أو dcm أو مثيلة CpG في الثدييات؟ ج: لا. هذا الإنزيم غير حساس لمثيلة dam أو dcm أو مثيلة CpG في الثدييات. للحصول على أحدث المعلومات حول حساسية المثيلة، يُرجى زيارة Dam-Dcm وCpG Methylation أو REBASE. س: هل يُمكنكم إخباري المزيد عن التحوّل من الألبومين البقري (BSA) إلى الألبومين المُعاد تركيبه (rAlbumin) في محاليل NEBuffers؟ ج: يسرّ شركة NEB أن تُعلن عن استبدال محاليل التفاعل المحتوية على الألبومين البقري (NEBuffer 1.1، 2.1، 3.1 وCutSmart® Buffer) بمحاليل تحتوي على الألبومين المُعاد تركيبه (NEBuffer r1.1، r2.1، r3.1 وrCutSmart™ Buffer). كما أننا بصدد تحويل جميع تركيبات إنزيمات التقييد لتشمل الألبومين المُعاد تركيبه. ونعتقد أن الابتعاد عن المنتجات الحيوانية خطوة في الاتجاه الصحيح، ونُقدّم هذا التحسين بنفس السعر.