مختبرات نيو إنجلاند البيولوجية، R0604L، SwaI

تمت إعادة صياغة SwaI باستخدام الألبومين المؤتلف (rAlbumin) بدءًا من رقم الدفعة 10115114. الفئات ذات الصلة: إنزيمات القطع المحددة S، إنزيمات القطع المحددة المؤهلة لتوفير الوقت. التطبيقات: الاستنساخ السريع: تسريع عمليات الاستنساخ باستخدام الكواشف من NEB. مواصفات هضم إنزيم القطع : تعريف الوحدة : تُعرَّف الوحدة الواحدة بأنها كمية الإنزيم اللازمة لهضم 1 ميكروغرام من حمض pXba DNA في ساعة واحدة عند 25 درجة مئوية في حجم تفاعل إجمالي قدره 50 ميكرولتر. شروط التفاعل: حضانة محلول NEBuffer™ r3.1 بتركيز 1X عند درجة حرارة 25 درجة مئوية. محلول NEBuffer™ r3.1 بتركيز 1X، 100 ملي مولار كلوريد الصوديوم، 50 ملي مولار Tris-HCl، 10 ملي مولار كلوريد المغنيسيوم، 100 ميكروغرام/مل ألبومين مُعاد التركيب (الأس الهيدروجيني 7.9 عند 25 درجة مئوية). النشاط في محاليل NEBuffer : NEBuffer™ r1.1: 10%، NEBuffer™ r2.1: 10%، NEBuffer™ r3.1: 100%، محلول rCutSmart™: 10%. توافق المخفف: محلول التخزين B: 10 ملي مولار Tris-HCl، 400 ملي مولار كلوريد الصوديوم، 1 ملي مولار DTT، 0.1 ملي مولار EDTA، 50% جلسرين، 200 ميكروغرام/مل ألبومين مُعاد التركيب، الأس الهيدروجيني 7.4 عند 25 درجة مئوية. تسخين. تعطيل عند 65 درجة مئوية لمدة 20 دقيقة. حساسية المثيلة : مثيلة dam: غير حساسة، مثيلة dcm: غير حساسة، مثيلة CpG: غير حساسة. النشاط عند درجة حرارة 37 درجة مئوية: 25%. الأسئلة الشائعة : س: لماذا لا يقوم SwaI بالقطع؟ ج: درجة حرارة تفاعل SwaI هي 25 درجة مئوية. الإنزيم غير مستقر للغاية عند 37 درجة مئوية. س: هل يجب عليّ تحضير عمليات الهضم باستخدام إنزيمات Time-Saver™ المعتمدة لمدة 5-15 دقيقة؟ هل يمكنني الهضم لفترة أطول؟ ج: تتميز إنزيمات Time-Saver™ من NEB بسرعة عملها (5-15 دقيقة)، كما أنها مصممة ومؤهلة لتحمل عمليات الهضم طوال الليل دون تحلل الحمض النووي. س: هل هذا الإنزيم حساس لمثيلة dam أو dcm أو مثيلة CpG في الثدييات؟ ج: لا. هذا الإنزيم غير حساس لمثيلة dam أو dcm أو مثيلة CpG في الثدييات. للحصول على أحدث المعلومات حول حساسية المثيلة، يُرجى زيارة Dam-Dcm وCpG Methylation أو REBASE. س: هل تُوفر NEB أي إنزيمات تقييد خالية من BSA و/أو خالية من المكونات الحيوانية لتسلسل البلازميدات في تطوير لقاحات mRNA؟ ج: نعم، قامت NEB بتطوير بعض إنزيمات التقييد (بما في ذلك BspQI، وهو نظير SapI) بدون مكونات حيوانية المنشأ، ولا يحتوي تركيبها النهائي على BSA. بالإضافة إلى ذلك، لدينا العديد من إنزيمات التقييد المتاحة بدون BSA أو أي مكونات حيوانية المنشأ في تركيبها النهائي. تشمل هذه القائمة: BbsI-HF، BsaI-HFv2، BspQI، وهو نظير LguI، متوفر الآن بدرجة GMP*، BspQI-HF، ClaI، HindIII-HF، PacI، SapI، SpeI، SwaI، XbaI، XhoI، XmnI. يمكن تطوير إنزيمات أخرى عند الطلب. يُرجى الاستفسار هنا. * يُستخدم مصطلحا "GMP Grade" و"GMP-grade" كعلامات تجارية من قِبل شركة NEB لوصف المنتجات المصنعة أو المُنجزة في مصنعها في رولي. صُمم مصنع رولي لتصنيع المنتجات وفقًا لبنية تحتية وضوابط عمليات أكثر صرامة، وذلك لتحقيق مواصفات منتجات أكثر دقة وتلبية متطلبات العملاء. تُصنّع المنتجات في مصنع رولي التابع لشركة NEB وفقًا لمعايير نظام إدارة الجودة ISO 9001 وISO 13485. مع ذلك، لا تُصنّع شركة NEB حاليًا أو تبيع منتجات تُعرف باسم المكونات الصيدلانية الفعالة (APIs)، كما أنها لا تُصنّع منتجاتها بما يتوافق مع جميع لوائح ممارسات التصنيع الجيدة الحالية. س: هل يُمكنكم إطلاعي على المزيد حول التحول من الألبومين البقري (BSA) إلى الألبومين المُعاد تركيبه (rAlbumin) في محاليل NEBuffers؟ يسرّ شركة NEB أن تعلن عن استبدال محاليل التفاعل المحتوية على الألبومين البقري (NEBuffer 1.1، 2.1، 3.1 وCutSmart® Buffer) بمحاليل تحتوي على الألبومين المُعاد تركيبه (NEBuffer r1.1، r2.1، r3.1 وrCutSmart™ Buffer). كما أننا بصدد تحويل جميع تركيبات إنزيمات التقييد لتشمل الألبومين المُعاد تركيبه. ونرى أن التخلي عن المنتجات الحيوانية خطوة في الاتجاه الصحيح، ونقدم هذا التحسين بنفس السعر.