مختبرات نيو إنجلاند البيولوجية، R0650L، FatI

تمت إعادة صياغة FatI باستخدام الألبومين المؤتلف (rAlbumin) بدءًا من رقم الدفعة 10201943. الفئات ذات الصلة: إنزيمات القطع المحددة، تطبيقات CG، مواصفات هضم إنزيمات القطع، تعريف الوحدة: تُعرَّف الوحدة الواحدة بأنها كمية الإنزيم اللازمة لهضم 1 ميكروغرام من حمض pUC19 النووي في ساعة واحدة عند 55 درجة مئوية في حجم تفاعل إجمالي قدره 50 ميكرولتر. شروط التفاعل: محلول NEBuffer™ r2.1 بتركيز 1X، يُحضن عند 55 درجة مئوية. يحتوي المحلول على: 50 ملي مولار كلوريد الصوديوم، 10 ملي مولار Tris-HCl، 10 ملي مولار كلوريد المغنيسيوم، 100 ميكروغرام/مل ألبومين مُعاد التركيب (الأس الهيدروجيني 7.9 عند 25 درجة مئوية). النشاط في محاليل NEBuffer : NEBuffer™ r1.1: 10%، NEBuffer™ r2.1: 100%، NEBuffer™ r3.1: 50%، محلول rCutSmart™: 50%. توافق المخفف : محلول التخزين المخفف A: 10 ملي مولار Tris-HCl، 50 ملي مولار كلوريد الصوديوم، 0.1 ملي مولار EDTA، 1 ملي مولار DTT، 50% جلسرين، 200 ميكروغرام/مل ألبومين مُعاد التركيب، الأس الهيدروجيني 7.4 عند 25 درجة مئوية. التثبيط الحراري. 80 درجة مئوية لمدة 20 دقيقة. حساسية المثيلة : مثيلة dam: غير حساسة، مثيلة dcm: غير حساسة، مثيلة CpG: غير حساسة. النشاط عند درجة حرارة 37 درجة مئوية: 100%. الأسئلة الشائعة : س: كم عدد أزواج القواعد التي يجب إضافتها في نهاية بادئ PCR بعد موقع تعرف FatI لضمان قطع FatI بشكل صحيح؟ ج: يوصى بإضافة 6 أزواج من القواعد. س: هل لـ FatI أي نظائر جديدة؟ ج: نعم. CviAII وNlaIII هما نظائر جديدة لـ FatI. للحصول على أحدث المعلومات حول النظائر المتماثلة/النظائر الجديدة، يرجى الرجوع إلى REBASE. س: هل هذا الإنزيم حساس لمثيلة dam أو dcm أو مثيلة CpG في الثدييات؟ ج: لا. هذا الإنزيم غير حساس لمثيلة dam أو dcm أو مثيلة CpG في الثدييات. للحصول على أحدث المعلومات حول حساسية المثيلة، يُرجى زيارة Dam-Dcm وCpG Methylation أو REBASE. س: هل يُمكنكم إخباري المزيد عن التحوّل من الألبومين البقري (BSA) إلى الألبومين المُعاد تركيبه (rAlbumin) في محاليل NEBuffers؟ ج: يسرّ شركة NEB أن تُعلن عن استبدال محاليل التفاعل المحتوية على الألبومين البقري (NEBuffer 1.1، 2.1، 3.1 وCutSmart® Buffer) بمحاليل تحتوي على الألبومين المُعاد تركيبه (NEBuffer r1.1، r2.1، r3.1 وrCutSmart™ Buffer). كما أننا بصدد تحويل جميع تركيبات إنزيمات التقييد لتشمل الألبومين المُعاد تركيبه. ونعتقد أن الابتعاد عن المنتجات الحيوانية خطوة في الاتجاه الصحيح، ونُقدّم هذا التحسين بنفس السعر.