مختبرات نيو إنجلاند البيولوجية، R0712S، BspQI

تعرف على دقة الليغاز وتجاوز حدود الفئات ذات الصلة ، إنزيمات القطع المحددة B، تطبيقات إنزيمات القطع المحددة المؤهلة لتوفير الوقت، حلول الاستنساخ عالية الإنتاجية والأتمتة، تجميع NEBridge® Golden Gate، الاستنساخ السريع: تسريع عمليات الاستنساخ الخاصة بك باستخدام الكواشف من NEB، تعريف وحدة المواصفات : تُعرف الوحدة الواحدة بأنها كمية الإنزيم المطلوبة لهضم 1 ميكروغرام من الحمض النووي λ في ساعة واحدة عند 50 درجة مئوية في حجم تفاعل إجمالي قدره 50 ميكرولتر. شروط التفاعل: حضانة عند 50 درجة مئوية باستخدام محلول NEBuffer™ r3.1 بتركيز 1X. NEBuffer™ r3.1: 100 ملي مولار كلوريد الصوديوم، 50 ملي مولار Tris-HCl، 10 ملي مولار كلوريد المغنيسيوم، 100 ميكروغرام/مل ألبومين مُعاد التركيب (الأس الهيدروجيني 7.9 عند 25 درجة مئوية). النشاط في محاليل NEBuffer : NEBuffer™ r1.1: 100%، NEBuffer™ r2.1: 100%، NEBuffer™ r3.1: 100%، rCutSmart™ Buffer: 100%. توافق المخفف : المخفف B: محلول التخزين : 10 ملي مولار Tris-HCl، 100 ملي مولار كلوريد البوتاسيوم، 1 ملي مولار DTT، 0.1 ملي مولار EDTA، 200 ميكروغرام/مل ألبومين مُعاد التركيب، 50% جلسرين، الأس الهيدروجيني 7.4. تعطيل بالحرارة عند 25 درجة مئوية، ثم عند 80 درجة مئوية لمدة 20 دقيقة. حساسية المثيلة : مثيلة dam: غير حساسة، مثيلة dcm: غير حساسة، مثيلة CpG: غير حساسة. النشاط عند درجة حرارة 37 درجة مئوية: 50%. الأسئلة الشائعة: س: هل يجب عليّ تحضير عمليات الهضم باستخدام إنزيمات Time-Saver™ المعتمدة لمدة 5-15 دقيقة؟ هل يمكنني الهضم لفترة أطول؟ ج: تتميز إنزيمات Time-Saver™ من NEB بسرعة عملها (5-15 دقيقة)، كما أنها مصممة ومؤهلة لتحمل عمليات الهضم طوال الليل دون إتلاف الحمض النووي. س: هل هذا الإنزيم حساس لمثيلة dam أو dcm أو مثيلة CpG في الثدييات؟ ج: لا. هذا الإنزيم غير حساس لمثيلة dam أو dcm أو مثيلة CpG في الثدييات. للحصول على أحدث المعلومات حول حساسية المثيلة، يرجى زيارة صفحة مثيلة Dam-Dcm وCpG أو REBASE. س: هل تُقدّم شركة NEB أي إنزيمات تقييد خالية من الألبومين البقري المصل (BSA) و/أو من أصل حيواني لتسلسل البلازميدات في تطوير لقاحات mRNA؟ ج: نعم، قامت NEB بتطوير بعض إنزيمات التقييد (بما في ذلك BspQI، وهو نظير SapI) بدون مكونات مشتقة من الحيوانات، ولا يظهر الألبومين البقري المصل في تركيبتها النهائية. بالإضافة إلى ذلك، لدينا العديد من إنزيمات التقييد المتاحة بدون الألبومين البقري المصل أو أي مكونات أخرى مشتقة من الحيوانات في تركيبتها النهائية. تشمل هذه القائمة: BbsI-HF، BsaI-HFv2، BspQI، وهو نظير LguI، متوفر الآن بدرجة GMP*، BspQI-HF، ClaI، HindIII-HF، PacI، SapI، SpeI، SwaI، XbaI، XhoI، XmnI. يمكن تطوير إنزيمات أخرى عند الطلب. يُرجى الاستفسار هنا. * "GMP Grade" و"GMP-grade" مصطلحات تجارية تستخدمها NEB لوصف المنتجات المصنعة أو المُنجزة في منشأة NEB في رولي. صُمم مصنع رولي لتصنيع المنتجات وفقًا لبنية تحتية وضوابط عمليات أكثر صرامة، وذلك لتحقيق مواصفات منتجات أكثر دقة وتلبية متطلبات العملاء. تُصنّع المنتجات في مصنع رولي التابع لشركة NEB وفقًا لمعايير نظام إدارة الجودة ISO 9001 وISO 13485. مع ذلك، لا تقوم NEB حاليًا بتصنيع أو بيع المنتجات المعروفة باسم المكونات الصيدلانية الفعالة (APIs)، كما أنها لا تُصنّع منتجاتها بما يتوافق مع جميع لوائح ممارسات التصنيع الجيدة الحالية. س: هل يمكنك إخباري المزيد عن التحول من الألبومين البقري (BSA) إلى الألبومين المُعاد تركيبه (rAlbumin) في محاليل NEBuffers؟ ج: يسرّ NEB أن تُعلن عن استبدال محاليل التفاعل المحتوية على الألبومين البقري (NEBuffer 1.1، 2.1، 3.1 وCutSmart® Buffer) بمحاليل تحتوي على الألبومين المُعاد تركيبه (NEBuffer r1.1، r2.1، r3.1 وrCutSmart™ Buffer). نعمل حاليًا على تحويل جميع تركيبات إنزيمات التقييد لتشمل الألبومين المُعاد تركيبه. ونعتقد أن التخلي عن المنتجات الحيوانية خطوة في الاتجاه الصحيح، ونستطيع تقديم هذا التحسين بنفس السعر.