نيو إنجلاند بيولابس، T3018L، مونارك® RNase A

إنزيم Monarch RNase A هو أحد مكونات مجموعة تنقية الحمض النووي الجينومي Monarch ( الفئات ذات الصلة : إنزيمات RNase، استخلاص الحمض النووي عالي الوزن الجزيئي، تحليل الإبيترانسكريبتوم، التطبيقات، مواصفات تنقية الأحماض النووية، محلول التخزين: 50 ملي مولار Tris-HCl، 50% جلسرين، درجة الحموضة 7.4). الأسئلة الشائعة : س: هل يمكنني استخدام إنزيم RNase A مختلف مع مجموعة استخلاص الحمض النووي الجينومي Monarch® Spin؟ ج: طالما أن إنزيم RNase A له تركيز ومواصفات نشاط مماثلة، فلا بأس باستخدامه. مع ذلك، لا تتمتع العديد من منتجات RNase A بنفس مواصفات الجودة لإنزيم Monarch RNase A، الذي لا يحتوي على أي نشاط قابل للكشف من إنزيمات النوكلياز الداخلية والخارجية والديوكسي ريبونيوكلياز والبروتياز، وهو خالٍ من الحمض النووي. قد تكون هذه المواصفات مهمة لتطبيقاتك اللاحقة. س: هل يمكنني حذف خطوة هضم RNase A من البروتوكول؟ ج: نعم، تم تصميم إجراء تنقية الحمض النووي الجينومي Monarch لتقليل كمية الحمض النووي الريبوزي (RNA) التي يتم تنقيتها بشكل مشترك. النسب المئوية النموذجية تبلغ نسبة الحمض النووي الريبوزي (RNA) الموجود في مستخلصات الحمض النووي الجينومي (gDNA) من مونارك عند حذف خطوة هضم RNase A، 1% (بروتوكول الدم)، و10% (بروتوكول الخلايا)، و1-5% (بروتوكول الأنسجة). لا تؤثر هذه الكميات المنخفضة عادةً على معظم التطبيقات اللاحقة. في حال تضمين خطوة هضم RNase A في كل بروتوكول، فإن كميات الحمض النووي الريبوزي (RNA) النهائية التي يتم تنقيتها مع الحمض النووي الجينومي (gDNA) تتراوح بين 0-1%، وهي كميات لا يمكن الكشف عنها بمعظم الطرق. س: هل يمكنني استخدام Monarch® RNase A لتطبيقات/سير عمل أخرى غير تنقية الحمض النووي الجينومي (gDNA)؟ ج: على الرغم من أن شركة NEB لم تتحقق تحديدًا من استخدام Monarch RNase A في تطبيقات خارج نطاق تنقية الحمض النووي الجينومي (gDNA)، إلا أن الإنزيم يعمل بشكل جيد في التطبيقات الأخرى التي تستخدم RNase A. س: لم يتم تخزين الإنزيمات الموجودة في المجموعة عند درجة حرارة -20 درجة مئوية فورًا. هل ستظل فعالة؟ ج: نعم، إنزيمات Monarch Proteinase K وRNAse A غير المفتوحة مستقرة في درجات الحرارة المحيطة على المدى القصير. بعد الفتح، يجب تخزين كل من إنزيم RNase A من شركة Monarch عند درجة حرارة -20 درجة مئوية. س: هل إنزيم RNase A من شركة Monarch مُضمّن في محلول Monarch B1؟ ج: لا، محلول Monarch B1 غير مُضمّن مع إنزيم RNase A من شركة Monarch. إنزيم RNase A من شركة Monarch (NEB #T3018) متوفر للشراء بشكل منفصل. يتطلب محلول Monarch B1 إضافة إنزيم RNase A من شركة Monarch لتطبيقات تحضير البلازميدات المصغرة. يُرجى الرجوع إلى تعليمات تحضير المحلول المناسبة لسير عملك المحدد قبل الاستخدام.