مجموعة استخلاص الحمض النووي الخالي من الخلايا (cfDNA) من شركة نيو إنجلاند بيولابس، طراز T4070V، مونارك® ماج

الفئات ذات الصلة: تنقية الأحماض النووية باستخدام الخرز المغناطيسي، تطبيقات تنقية الأحماض النووية، الأسئلة الشائعة حول تنقية الأحماض النووية. س: ما أنواع العينات التي يمكنني استخدامها مع مجموعة استخلاص الحمض النووي الخالي من الخلايا Monarch® Mag (NEB #T4070)؟ ج: تم تقييم هذه المجموعة لعينات البلازما والبول. كما أنها متوافقة مع عينات بيولوجية أخرى، مثل السائل النخاعي الشوكي. س: هل يمكنني إضافة محلول Monarch® StabiLyse DNA/RNA Buffer (NEB #T2111) إلى البلازما وتخزينها لاستخلاصها لاحقًا؟ ج: نعم، يمكن إضافة محلول Monarch StabiLyse DNA/RNA Buffer إلى البلازما بالنسب الموصى بها في خطوة هضم العينة من دليل مجموعة استخلاص الحمض النووي الخالي من الخلايا Monarch® Mag (NEB #T4070)، ويُخزن الخليط عند درجة حرارة -20 درجة مئوية أو -80 درجة مئوية حتى يصبح جاهزًا للاستخدام. س: استقرت حبيبات Monarch® Mag Beads M2 (NEB #T4105) في قاع الزجاجة. هل يُعدّ هذا مشكلة؟ ج: من الطبيعي أن تستقر حبيبات Monarch Mag Beads M2 بسرعة عند عدم تحريكها أو استخدامها. لا يؤثر هذا على فعالية الحبيبات. قبل الاستخدام، من المهم خلط الحبيبات جيدًا باستخدام جهاز الخلط الدوامي لضمان تجانسها. س: هل يُمكنني شراء مكونات مجموعة استخلاص الحمض النووي الخالي من الخلايا (cfDNA) Monarch® Mag (NEB #T4105) بشكل منفصل؟ ج: نعم، جميع مكونات هذه المجموعة متاحة للشراء بشكل فردي. يُرجى الاطلاع على جدول مكونات المجموعة الذي يحتوي على روابط لصفحات المنتجات المعنية، أو البحث عن أسماء المكونات على موقع neb.com. س: ما هو تركيب كل كاشف مُرفق مع مجموعة استخلاص الحمض النووي الخالي من الخلايا (cfDNA) Monarch® Mag (NEB #T4070)؟ ج: جميع معلومات تركيب الكواشف سرية. س: عند استخدام مجموعة استخلاص الحمض النووي الخالي من الخلايا (cfDNA) من Monarch® Mag (NEB #T4070)، هل يمكنني تحضير مزيج ربط من هذه المكونات الثلاثة بدلاً من إضافة محلول Monarch BX والإيزوبروبانول والخرز المغناطيسي بشكل منفصل إلى العينة؟ ج: نعم، يمكن تحضير مزيج ربط من محلول Monarch BX والإيزوبروبانول وخرز Monarch Mag M2 لاستخدامه خلال يوم واحد. تأكد من مزجه جيدًا قبل إضافته إلى أنبوب العينة. س: ما هو أقل حجم استخلاص يمكنني استخدامه عند استخدام مجموعة استخلاص الحمض النووي الخالي من الخلايا (cfDNA) من Monarch® Mag (NEB #T4070)؟ ج: يعتمد حجم الاستخلاص الأمثل على حجم العينة والخرز المغناطيسي. للحصول على استخلاص مثالي، يجب أن يكون حجم الاستخلاص نصف حجم الخرز المستخدم، على الرغم من أن حجم استخلاص أقل، على سبيل المثال، ثلث حجم الخرز المستخدم، يُعطي أيضًا استخلاصًا جيدًا. تشمل العوامل الأخرى التي يجب مراعاتها عند اختيار حجم محلول الإذابة محتوى الحمض النووي الخالي من الخلايا (cfDNA) المتوقع في العينة ومتطلبات الإدخال للتطبيق اللاحق. س: عند استخدام مجموعة استخلاص الحمض النووي الخالي من الخلايا (cfDNA) من Monarch® Mag (NEB #T4070)، ما هو تركيز الحمض النووي المطلوب للتطبيقات اللاحقة؟ ج: عادةً ما توفر أحجام الإذابة الموصى بها ناتجًا كافيًا بالتركيز المطلوب لإعداد مكتبة NGS اللاحقة، وتساعد في التخلص من الحاجة إلى خطوة تركيز إضافية بعد استخلاص الحمض النووي الخالي من الخلايا. ومع ذلك، إذا كنت ترغب بشدة في تركيز أعلى، يتوفر بروتوكول على صفحة المنتج. قد يحدث بعض فقدان الناتج مع خطوات التركيز الإضافية. س: عند استخدام مجموعة استخلاص الحمض النووي الخالي من الخلايا (cfDNA) من Monarch® Mag (NEB #T4070)، لاحظت أن أحجام محلول الغسل هي نفسها بغض النظر عن حجم إدخال العينة. هل يمكنني استخدام أحجام أقل من محاليل الغسل مع حجم عينة صغير؟ ج: @font-face {font-family:"Cambria Math"; بانوز-1:2 4 5 3 5 4 6 3 2 4؛ mso-font-charset:0; MSO-generic-font-family:roman; mso-font-pitch:variable; mso-font-signature:-536870145 1107305727 0 0 415 0;}@font-face {font-family:Aptos; بانوز-1:2 11 0 4 2 2 2 2 2 4؛ mso-font-charset:0; mso-generic-font-family:swiss; mso-font-pitch:variable; mso-font-signature:536871559 3 0 0 415 0;}@font-face {font-family:"Arial Nova"; بانوز-1:2 11 5 4 2 2 2 2 2 4؛ mso-font-charset:0; mso-generic-font-family:swiss; mso-font-pitch:variable; mso-font-signature:655 2 0 0 415 0;}p.MsoNormal, li.MsoNormal, div.MsoNormal {mso-style-unhide:no; mso-style-qformat:yes; mso-style-parent:""; الهامش العلوي: 0 بوصة؛ الهامش الأيمن: 0 بوصة؛ الهامش السفلي: 8.0 نقطة؛ الهامش الأيسر: 0 بوصة؛ ارتفاع الخط: 116%؛ MSO-ترقيم الصفحات:أرملة يتيمة؛ حجم الخط: 12.0 نقطة؛ عائلة الخط: "Aptos"، sans-serif؛ mso-ascii-font-family:Aptos; mso-ascii-theme-font:minor-latin; mso-fareast-font-family:"Times New Roman"; MSO-fareast-theme-font:minor-fareast; mso-hansi-font-family:Aptos; mso-hansi-theme-font:minor-latin; mso-bidi-font-family:"Times New Roman"; mso-bidi-theme-font:minor-bidi; mso-fareast-language:JA;}p.MsoListParagraph, li.MsoListParagraph, div.MsoListParagraph {mso-style-priority:34; mso-style-unhide:no; mso-style-qformat:yes; الهامش العلوي: 0 بوصة؛ الهامش الأيمن: 0 بوصة؛ الهامش السفلي: 8.0 نقطة؛ margin-left: 0.5in; mso-add-space: auto; line-height: 116%; mso-pagination: widow-orphan; font-size: 12.0pt; font-family: "Aptos", sans-serif; mso-ascii-font-family: Aptos; mso-ascii-theme-font: minor-latin; mso-fareast-font-family: "Times New Roman"; mso-fareast-theme-font: minor-fareast; mso-hansi-font-family: Aptos; mso-hansi-theme-font: minor-latin; mso-bidi-font-family: "Times New Roman"; mso-bidi-theme-font: minor-bidi; mso-fareast-language:JA;}p.MsoListParagraphCxSpFirst, li.MsoListParagraphCxSpFirst, div.MsoListParagraphCxSpFirst {mso-style-priority:34; mso-style-unhide:no; mso-style-qformat:yes; نوع نمط MSO: للتصدير فقط؛ الهامش العلوي: 0 بوصة؛ الهامش الأيمن: 0 بوصة؛ الهامش السفلي: 0in؛ الهامش الأيسر: .5 بوصة؛ mso-add-space:auto; ارتفاع الخط: 116%؛ MSO-ترقيم الصفحات:أرملة يتيمة؛ حجم الخط: 12.0 نقطة؛ عائلة الخط: "Aptos"، sans-serif؛ mso-ascii-font-family:Aptos; mso-ascii-theme-font:minor-latin; mso-fareast-font-family:"Times New Roman"; MSO-fareast-theme-font:minor-fareast; mso-hansi-font-family:Aptos; mso-hansi-theme-font:minor-latin; mso-bidi-font-family:"Times New Roman"; mso-bidi-theme-font:minor-bidi; mso-fareast-language:JA;}p.MsoListParagraphCxSpMiddle, li.MsoListParagraphCxSpMiddle, div.MsoListParagraphCxSpMiddle {mso-style-priority:34; mso-style-unhide:no; mso-style-qformat:yes; نوع نمط MSO: للتصدير فقط؛ الهامش العلوي: 0 بوصة؛ الهامش الأيمن: 0 بوصة؛ الهامش السفلي: 0in؛ الهامش الأيسر: .5 بوصة؛ mso-add-space:auto; line-height:116%; mso-pagination:widow-orphan; font-size:12.0pt; font-family:"Aptos",sans-serif; mso-ascii-font-family:Aptos; mso-ascii-theme-font:minor-latin; mso-fareast-font-family:"Times New Roman"; mso-fareast-theme-font:minor-fareast; mso-hansi-font-family:Aptos; mso-hansi-theme-font:minor-latin; mso-bidi-font-family:"Times New Roman"; mso-bidi-theme-font:minor-bidi; mso-fareast-language:JA;}p.MsoListParagraphCxSpLast, li.MsoListParagraphCxSpLast, div.MsoListParagraphCxSpLast {mso-style-priority:34; mso-style-unhide:no; mso-style-qformat:yes; نوع نمط MSO: للتصدير فقط؛ الهامش العلوي: 0 بوصة؛ الهامش الأيمن: 0 بوصة؛ الهامش السفلي: 8.0 نقطة؛ الهامش الأيسر: .5 بوصة؛ mso-add-space:auto; ارتفاع الخط: 116%؛ MSO-ترقيم الصفحات:أرملة يتيمة؛ حجم الخط: 12.0 نقطة؛ عائلة الخط: "Aptos"، sans-serif؛ mso-ascii-font-family:Aptos; mso-ascii-theme-font:minor-latin; mso-fareast-font-family:"Times New Roman"; MSO-fareast-theme-font:minor-fareast; mso-hansi-font-family:Aptos; mso-hansi-theme-font:minor-latin; mso-bidi-font-family:"Times New Roman"; mso-bidi-theme-font:minor-bidi; mso-fareast-language:JA;}.MsoChpDefault {mso-style-type:export-only; mso-default-props:yes; عائلة الخط: "Aptos"، sans-serif؛ mso-ascii-font-family:Aptos; mso-ascii-theme-font:minor-latin; mso-fareast-font-family:"Times New Roman"; MSO-fareast-theme-font:minor-fareast; mso-hansi-font-family:Aptos; mso-hansi-theme-font:minor-latin; mso-bidi-font-family:"Times New Roman"; mso-bidi-theme-font:minor-bidi; mso-font-kerning:0pt; mso-ligatures:none; mso-fareast-language:JA;}.MsoPapDefault {mso-style-type:export-only; margin-bottom:8.0pt; line-height:116%;}div.WordSection1 {page:WordSection1;} بالنسبة لعينات بحجم 2 مل و4 مل، نوصي باستخدام حجم غسيل 1 مل. أما بالنسبة للعينات التي يقل حجمها عن 1 مل، فيمكن استخدام حجم غسيل أقل إذا رغبت في ذلك، على سبيل المثال، 500-700 ميكرولتر. س: أنا مهتم باستخلاص الحمض النووي الريبوزي الحر (cfRNA). هل يُمكنني استخدام مجموعة استخلاص الحمض النووي الخالي من الخلايا (cfDNA) من Monarch® Mag (NEB #T4070) لاستخلاص الحمض النووي الريبوزي الخالي من الخلايا (cfRNA)؟ ج: تم تحسين الكواشف وطريقة العمل المُرفقة مع مجموعة استخلاص الحمض النووي الخالي من الخلايا (cfDNA) من Monarch Mag لاستخلاص الحمض النووي الخالي من الخلايا. يُرجى توجيه الاستفسارات حول التطبيقات الأخرى، مثل استخلاص الحمض النووي الريبوزي الخالي من الخلايا (cfRNA)، إلى الدعم الفني لشركة NEB. س: لقد استخدمتُ جميع بروتينيز K (NEB #P8200) المُضمن في مجموعة Monarch. هل يُمكنني شراء المزيد؟ ج: نعم، بروتينيز K، من الدرجة الجزيئية (NEB #P8107)، مُتاح للشراء بشكل مُنفصل، ويُمكن استخدامه كبديل مُباشر لـ (NEB #P8200) في جميع بروتوكولات Monarch دون أي تعديلات.