نيو إنجلاند بيولابس، T4130V، مجموعة تنظيف الحمض النووي Monarch® Mag PCR (5 ميكروغرام)

الفئات ذات الصلة: تنقية الأحماض النووية باستخدام الخرز المغناطيسي، تنقية الحمض النووي بعد تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR)، تطبيقات تنقية الأحماض النووية، الأسئلة الشائعة حول تنقية الأحماض النووية: س: هل يمكنني شراء خرز Monarch® Mag Beads M2 إضافي لمجموعة Monarch Mag PCR & DNA Cleanup Kit (5 ميكروغرام) (NEB #T4130) بشكل منفصل؟ ج: نعم، الخرز المغناطيسي (NEB #T4105) لمجموعة Monarch Mag PCR & DNA Cleanup Kit (5 ميكروغرام) متوفر أيضًا بشكل منفصل. س: هل يمكنني استخدام الماء لاستخلاص الحمض النووي عند استخدام مجموعات Monarch® Mag PCR & DNA Cleanup Kit (5 ميكروغرام) (NEB #T4130)؟ ج: نعم، يمكن استخدام الماء لاستخلاص الحمض النووي. وللحصول على أقصى كفاءة استخلاص، تأكد من أن الماء خالٍ من النيوكلياز وأن درجة الحموضة (pH) تتراوح بين 7 و8.5. غالبًا ما يكون ماء Milli-Q™ حمضيًا قليلاً، مما يتطلب تعديل درجة الحموضة. إذا كنت ستخزن الحمض النووي لفترة طويلة، فننصح باستخدام محلول Monarch Buffer EY المرفق (محلول استخلاص الحمض النووي)، والذي يحتوي على 0.1 ملي مول من EDTA. س: هل يمكنني استخدام مجموعة Monarch® Mag PCR & DNA Cleanup Kit (5 ميكروغرام) (NEB #T4130) لاختيار الحجم؟ ج: صُممت مجموعة Monarch® Mag PCR & DNA Cleanup Kit (5 ميكروغرام) (NEB #T4130) للتنقية والتنظيف، وهي تزيل البادئات والنيوكليوتيدات ومكونات التفاعل الأخرى بكفاءة. مع ذلك، لا تدعم هذه المجموعة تطبيقات اختيار الحجم. س: هل يجب تجفيف الخرز المغناطيسي في مجموعة Monarch® Mag PCR & DNA Cleanup Kit (5 ميكروغرام) (NEB #T4130) تمامًا قبل استخلاص الحمض النووي؟ ج: يُعد تجفيف الخرز المغناطيسي بشكل صحيح خطوة أساسية لضمان استخلاص الحمض النووي الأمثل ونقائه. يجب تجفيف الخرز بما يكفي لإزالة أي سائل مرئي، مع الحفاظ على مظهره اللامع ذي اللون البني الداكن. يشير هذا إلى جاهزيتها للاستخلاص. تجنب التجفيف المفرط، فقد يؤثر سلبًا على استخلاص الحمض النووي. عادةً ما تبدو الخرزات المجففة بشكل مفرط باهتة وبنية فاتحة، وقد يصعب إعادة تعليقها. س: هل مجموعة Monarch® Mag PCR & DNA Cleanup Kit (5 ميكروغرام) (NEB #T4130) متوافقة مع سير العمل الآلي؟ ج: نعم، المجموعة متوافقة مع سير العمل الآلي والأجهزة. يمكن دمجها في منصات معالجة السوائل المختلفة لتنقية الحمض النووي بكفاءة عالية. يتيح شكل الخرز المغناطيسي سهولة أتمتة خطوات الربط والغسل والاستخلاص. س: هل مجموعة Monarch® Mag PCR & DNA Cleanup Kit (5 ميكروغرام) (NEB #T4130) متوافقة مع عينات الحمض النووي الريبوزي (RNA)؟ ج: على الرغم من إمكانية استخلاص الحمض النووي الريبوزي (RNA) باستخدام مجموعة Monarch® Mag PCR & DNA Cleanup Kit (5 ميكروغرام) (NEB #T4130)، إلا أن المحاليل والبروتوكولات المستخدمة غير مصممة للعمل في ظروف خالية من إنزيم RNase أو لتنقية الحمض النووي الريبوزي (RNA) بشكل موثوق. لذلك، لا نوصي باستخدام هذه المجموعة لتنقية الحمض النووي الريبوزي (RNA). س: ما هو تركيب كل محلول منظم مُرفق مع مجموعة Monarch® Mag PCR & DNA Cleanup Kit (5 ميكروغرام) (NEB #T4130)؟ ج: تركيب المحاليل المنظمة خاص بالشركة. ومع ذلك، يمكننا مشاركة المعلومات التالية: محلول Monarch BZ: محلول ربط قائم على الغوانيدين والإيزوبروبانول. محلول Monarch WZ: محلول غسيل قائم على الإيثانول. محلول Monarch EY: محلول إزالة مكون من 10 ملي مولار من Tris، و0.1 ملي مولار من EDTA، ودرجة حموضة 8.5. س: ما هي أقصى سعة ربط لخرز Monarch® Mag M2 المرفقة مع مجموعة Monarch® Mag PCR & DNA Cleanup Kit (5 ميكروغرام) (NEB #T4130)؟ ج: تتمتع خرزات Monarch® Mag Beads M2 بقدرة ربط تصل إلى 5 ميكروغرام من الحمض النووي لكل عينة عند استخدام سير العمل القياسي (20 ميكرولتر من الخرزات) في تطبيق تنقية الحمض النووي. هذه القدرة مرنة ويمكن تعديلها بزيادة أو تقليل حجم الخرزات المستخدمة. تتوفر بروتوكولات لدعم زيادة أو تقليل حجم التفاعل، مما يسمح بإدخال كمية من الحمض النووي أقل أو أكثر من 5 ميكروغرام، حسب متطلبات التجربة. س: ما هو أصغر حجم من محلول الإذابة الذي يمكن استخدامه مع مجموعة Monarch® Mag PCR & DNA Cleanup Kit (5 ميكروغرام) (NEB #T4130)؟ ج: بالنسبة لسير العمل القياسي، نوصي بحجم إذابة يتراوح بين 25 و50 ميكرولتر عند استخدام هذه المجموعة. بالنسبة لسير العمل الآلي، يمكن استخدام نفس نطاق الإذابة (25-50 ميكرولتر) بشكل عام؛ ومع ذلك، يعتمد التوافق على منصة التشغيل الآلي المحددة. نوصي بالتحقق من مواصفات الجهاز للتأكد من أن الحجم المُختار يُلبي الحد الأدنى المسموح به لحجم العينة في المنصة. س: ما هو حجم الحمض النووي الذي يُمكن تنقيته باستخدام مجموعة Monarch® Mag PCR & DNA Cleanup Kit (5 ميكروغرام) (NEB #T4130)؟ ج: يُمكن استخلاص الحمض النووي بأحجام تتراوح من 50 زوجًا قاعديًا إلى 25 كيلوبايت باستخدام مجموعة Monarch® Mag PCR & DNA Cleanup Kit (5 ميكروغرام) (NEB #T4130). تقل الكفاءة مع زيادة طول الحمض النووي نظرًا لارتباطه الوثيق بالمصفوفة. يُمكن تحسين استخلاص الحمض النووي الذي يبلغ طوله 15 كيلوبايت أو أكثر بتعديل طريقة الإذابة، باستخدام محلول إذابة مُسخن (50 درجة مئوية) وإطالة فترات الحضانة. للحصول على أفضل استخلاص لقطع الحمض النووي الكبيرة، يُرجى اتباع البروتوكول المُحدد المُتاح. س: ما هي أنواع عينات الحمض النووي المُتوافقة مع مجموعة Monarch® Mag PCR & DNA Cleanup Kit (5 ميكروغرام) (NEB #T4130)؟ هل توجد بروتوكولات مُحددة مُتاحة؟ ج: نعم، تتوافق هذه المجموعة مع نطاق واسع من أنواع الحمض النووي، بما في ذلك الحمض النووي الخطي، مثل: قليل النوكليوتيدات وشظايا الحمض النووي القصيرة: يمكن استخلاص قليل النوكليوتيدات أحادية السلسلة وثنائية السلسلة باستخدام هذه المجموعة. يُرجى الرجوع إلى بروتوكول تنقية قليل النوكليوتيدات باستخدام مجموعة Monarch® Mag PCR & DNA Cleanup Kit (5 ميكروغرام) (NEB #T4130). الحمض النووي الدائري: يمكن تنقية الحمض النووي الدائري أحادي السلسلة وثنائي السلسلة باستخدام بروتوكول تنقية الحمض النووي وتفاعل البوليميراز المتسلسل القياسي في سير عمل يدوي باستخدام مجموعة Monarch Mag PCR & DNA Cleanup Kit (5 ميكروغرام) (NEB #T4130). شظايا الحمض النووي الكبيرة (>25 كيلوبايت)، بما في ذلك الحمض النووي الجينومي: يمكن تنقيتها بكفاءة باستخدام بروتوكول تنقية الحمض النووي الجينومي (gDNA) باستخدام مجموعة Monarch® Mag PCR & DNA Cleanup Kit (5 ميكروغرام) (NEB #T4130). منتجات تضخيم الدائرة المتدحرجة (RCA): تُنتج تفاعلات تضخيم الدائرة المتدحرجة (RCA) عادةً تركيزًا عاليًا من الحمض النووي، ويمكن تنقيته باستخدام بروتوكول تنظيف تفاعل RCA باستخدام مجموعة Monarch® Mag PCR & DNA Cleanup Kit (5 ميكروغرام) (NEB #T4130). للحصول على أفضل النتائج، يُرجى استخدام البروتوكول المناسب على موقعنا الإلكتروني والمُصمم خصيصًا لنوع عينتك. سؤال: عند استخدام مجموعة Monarch® Mag PCR & DNA Cleanup Kit (5 ميكروغرام) (NEB #T4130)، لاحظتُ وجود خرزات متبقية في الحمض النووي المُستخلص. كيف يُمكنني تجنب انتقال الخرزات؟ جواب: استخدم مغناطيسًا قويًا لضمان فصل الخرزات المغناطيسية بكفاءة. عند إزالة السائل الطافي، احرص على عدم تحريك حبيبات الخرز. في حال تحريك الحبيبات عن طريق الخطأ، كرر خطوة الفصل المغناطيسي للسماح للخرزات بالتجمع مرة أخرى بالكامل قبل المتابعة في إزالة السائل الطافي.