بروميج، NP4050، نظام انتقائية الكيناز NanoBRET® لاستهداف K192

انتقائية الملف الشخصي عبر مجموعة متنوعة من الكينازات في الخلايا الحية
تحديد الانتقائية الخلوية للمركب ضد مجموعة من 192 كينازًا بشريًا، تمثل بشكل عام الكينوم
يوفر البروتوكول الخلوي المُحسَّن، الذي يعتمد على الإضافة فقط، بيانات كمية عن شغل المركبات لـ 192 كيناز كامل الطول في تجربة واحدة
يوفر نظام K192 لوحة ناقل الكيناز K192 الجاهزة للنقل، بالإضافة إلى اختبار كيناز NanoBRET® TE واحد
تحديد:
NanoBRET® Nano-Glo® الركيزة N157D 1 × 3.3 مل
محلول تخفيف التتبع N219B 1 × 50 مل
مثبط نانولوك® خارج الخلية N235C، عبوة واحدة × 1.1 مل
NanoBRET® Tracer K-10 N264B 10 × 300 ميكرولتر
لوحة NanoBRET® TE K192 Vector Plate A NP401A، عدد 2 × 1 لكل منها
NanoBRET® TE K192 لوحة المتجهات B NP402A 2 × 1 لكل منهما
أغطية لاصقة من رقائق معدنية NP4000، قطعة واحدة × قطعة واحدة
NanoBRET® Nano-Glo® الركيزة N157D 1 × 3.3 مل
محلول تخفيف التتبع N219B 1 × 50 مل
مثبط نانولوك® خارج الخلية N235C، عبوة واحدة × 1.1 مل
NanoBRET® Tracer K-10 N264B 10 × 300 ميكرولتر
حامل الحمض النووي E488B للتحويل الجيني 1 × 100 ميكروغرام
pNL1.1.CMV[ N109A 1 × 20 ميكروغرام
ناقل الاندماج NanoLuc®-HIPK2 NV322A 1 × 20 ميكروغرام
لوحة NanoBRET® TE K192 Vector Plate A NP401A، عدد 2 × 1 لكل منها
NanoBRET® TE K192 لوحة المتجهات B NP402A 2 × 1 لكل منهما
أغطية لاصقة من رقائق معدنية NP4000، قطعة واحدة × قطعة واحدة
لوحة NanoBRET® TE K192 Vector Plate A NP401A، عدد 2 × 1 لكل منها
NanoBRET® TE K192 لوحة المتجهات B NP402A 2 × 1 لكل منهما
أغطية لاصقة من رقائق معدنية NP4000، قطعة واحدة × قطعة واحدة
لوحة NanoBRET® TE K192 Vector Plate A NP401A، قطعة واحدة × قطعة واحدة
NanoBRET® TE K192 لوحة المتجهات B NP402A 1 × 1 لكل منهما
أغطية لاصقة من رقائق معدنية NP4000، قطعة واحدة × قطعة واحدة
يستطيع نظام NanoBRET® Target Engagement (TE) K192 Kinase Selectivity System قياس شغل المركبات داخل الخلايا كميًا مقابل مجموعة من 192 كينازًا في تجربة واحدة. ويعتمد النظام على
تقنية NanoBRET® TE
تعتمد طريقة نقل طاقة الرنين البيولوجي الضوئي (BRET) على استخدام جزيء لوسيفيراز NanoLuc® الصغير شديد السطوع كمصدر للطاقة، ومتتبع NanoBRET® TE القابل للنفاذ الخلوي كمستقبل لها. يُعد نظام K192 لانتقائية الكيناز طريقةً للخلايا الحية، تعتمد على إضافة جزيئات الكيناز فقط، وتُجرى عليها فحوصات NanoBRET® TE كيناز لمرة واحدة. وقد صُمم نظام NanoBRET® TE K192 لانتقائية الكيناز خصيصًا لكل كيناز لتوفير بيانات كمية دقيقة عن شغل مواقع الارتباط، مما يُتيح تحليل تفاعلات الكيناز مع المركبات على مستوى الخلية.
يشرح الدكتور مارتن ماتزوك أهمية NanoBRET® TE في أبحاثهم.
تعرف على كيفية تحسين نظام NanoBRET® TE K192 Kinase Selectivity System ليناسب تنسيق لوحة 384 بئرًا، مما يسمح بإنتاجية أعلى وفحص أكثر كفاءة للمركبات لكل مجموعة.
يُعدّ منشور مجلة "Cell Chemical Biology" أول دليل عملي على كيفية استخدام تقنية NanoBRET® TE لتحليل انتقائية الكينازات على نطاق واسع في الخلايا الحية. ويُقدّم هذا المنشور أول طريقة في الخلايا الحية لتحليل ارتباط المركبات بمئات الكينازات كميًا.
يُحسّن منشور بروتوكولات STAR العملَ المنشور في مجلة بيولوجيا الكيمياء الخلوية، ويُشكّل الأساس لنظام NanoBRET® TE K192 لانتقائية الكيناز. يُبيّن المؤلفون كيف يُمكن استخدام اختبار NanoBRET® TE Kinase Assay واحد لتحليل تفاعل المركبات مع 192 كينازًا كامل الطول في تجربة واحدة على الخلايا الحية باستخدام آلية عمل بسيطة.