Product Description
لـ 100 تفاعل: مزيج رئيسي جاهز للاستخدام لتضخيم المكتبة ومزيج تحضيري، للاستخدام مع أجهزة Illumina
سمات
- إجراء سريع باستخدام أنبوب واحد يوفر ما يصل إلى 50% من الوقت
- إنتاجية عالية من كميات ضئيلة من المواد الأولية
- تضخيم غير متحيز مع خطوة تضخيم اختيارية عالية الدقة
- إمكانية الإرسال المتعدد، والقدرة على نقل البيانات بكفاءة عالية
أداء
إنتاجية عالية من الحمض النووي للمكتبة مع توزيع تغطية موحد
توفر مجموعات تحضير مكتبات GeneRead سير عمل فعالًا ومُحسَّنًا لإنتاج كميات كبيرة من مكتبات الحمض النووي بشكل متكرر، مع أدنى حد من التحيز التسلسلي ومعدلات خطأ منخفضة، لاستخدامها على منصات التسلسل الجيني من الجيل التالي (NGS) من Illumina أو جهاز Ion Torrent من Life Technologies. تضمن تفاعلات الربط عالية الكفاءة وخطوة التضخيم الاختيارية عالية الدقة إنتاجية فائقة للمكتبات مع توزيع تغطية موحد، حتى من كمية أولية منخفضة تصل إلى 50 نانوغرام (انظر الشكلين: إنتاجية عالية من مكتبة الحمض النووي مع توزيع تغطية موحد وإنتاجية فائقة من مكتبة الحمض النووي).
معدلات خطأ منخفضة مع أدنى حد من تحيز التسلسل
لضمان الحصول على أقصى إنتاجية من أقل كمية من المادة الأولية، تتضمن مجموعات تحضير مكتبات GeneRead مزيجًا رئيسيًا مبتكرًا عالي الدقة يحتوي على بوليميراز GeneRead HiFi لخطوة تضخيم اختيارية. بوليميراز GeneRead HiFi هو إنزيم فريد من نوعه، عالي التخصص، وفعال، يوفر تضخيمًا دقيقًا لحمض DNA الخاص بالمكتبة مع معدلات خطأ منخفضة وتحيز ضئيل (انظر الشكل: معدلات خطأ منخفضة مع تحيز تسلسلي ضئيل بفضل التضخيم عالي الدقة).
تقليل التحيز التسلسلي عند تضخيم المناطق الغنية بـ GC و AT
في إجراءات تضخيم الحمض النووي القياسية بتقنية تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR)، قد لا تُضخّم مناطق الحمض النووي ذات المحتوى العالي من الأدينين والثايمين (AT) أو الجوانين والسيتوزين (GC) بشكل كافٍ، مما يؤدي إلى بيانات تسلسل مضللة ونتائج تسلسل الجيل التالي (NGS). يضمن بوليميراز GeneRead HiFi، مع تركيبته الفريدة من نوعها، تضخيمًا موحدًا للمناطق الجينومية التي تحتوي على محتوى GC شديد التباين، مما يضمن تغطية متساوية في تفاعلات التسلسل اللاحقة (انظر الشكل: تغطية تسلسل أفضل).
مبدأ
تستخدم مجموعات تحضير مكتبات GeneRead آلية عمل مُحسّنة في أنبوب واحد لإنتاج كميات كبيرة من مكتبات الحمض النووي (DNA) بشكل متكرر، لاستخدامها على منصات التسلسل الجيني من الجيل التالي (NGS) من Illumina أو جهاز Ion Torrent من Life Technologies. تتميز هذه الطريقة السريعة في أنبوب واحد بخطوات تنظيف أقل مقارنةً بآليات تحضير المكتبات من موردين آخرين، وتتضمن خطوة تضخيم اختيارية عالية الدقة للمكتبة. توفر مجموعات تحضير مكتبات GeneRead الوقت والجهد، مع تقليل التباين الناتج عن التعامل المباشر، بالإضافة إلى تقليل خطر التلوث (انظر الشكلين: آلية العمل المُحسّنة لمكتبات الحمض النووي المتوافقة مع Illumina، وآلية العمل المُحسّنة لمكتبات الحمض النووي المتوافقة مع Ion Torrent).
إجراء
إجراءات إنشاء مكتبات الحمض النووي المتوافقة مع Illumina
تُقطّع عينات الحمض النووي الطويلة أولاً إلى مكتبة عشوائية من القطع، بمتوسط طول 300 زوج قاعدي (عند استخدام جهاز Illumina MiSeq، الإصدار 1)، أو 500 زوج قاعدي (عند استخدام جهاز Illumina MiSeq، الإصدار 2). بعد التقطيع، تُصلح أطراف قطع الحمض النووي، ويُضاف طرف A بارز عند النهاية 3' لكل خيط. ثم تُربط المحولات، الضرورية للتضخيم والتسلسل، بنهايتي قطع الحمض النووي. تتوفر محولات الباركود، التي تحتوي على تسلسل تعريف فريد، مع مجموعة GeneRead Library Prep (I) Kit، مما يُتيح إجراء تفاعلات التسلسل المتعدد. بعد ذلك، تُختار القطع حسب الحجم وتُنقّى. يُمكن إجراء التنظيف واختيار الحجم باستخدام مجموعة GeneRead Size Selection Kit (رقم المنتج 180514)، التي تُتيح اختيارًا دقيقًا لحجم الحمض النووي باستخدام الأعمدة (انظر الشكل: اختيار الحجم الدقيق). ولضمان الحصول على أقصى قدر من العوائد من أقل كميات من المواد الأولية، يمكن أيضًا إجراء خطوة تضخيم عالية الدقة اختيارية.
إجراء لإنشاء مكتبات الحمض النووي المتوافقة مع Ion Torrent
تُقطّع عينات الحمض النووي الطويلة أولاً إلى مكتبة عشوائية من الشظايا، بمتوسط طول 400 زوج قاعدي (باستخدام جهاز Ion Torrent PGM) أو 200 زوج قاعدي (باستخدام جهاز Ion Proton). بعد التقطيع، تُصلح أطراف شظايا الحمض النووي. ثم تُربط المحولات، الضرورية للتضخيم والتسلسل، بنهايتي شظايا الحمض النووي. تتوفر محولات الباركود، التي تحتوي على تسلسل تعريف فريد، مع مجموعة GeneRead Library Prep (L) Kit، مما يُتيح إجراء تفاعلات التسلسل المتعدد. بعد ذلك، تُختار الشظايا حسب الحجم وتُنقّى. ولضمان الحصول على أعلى إنتاجية من أقل كمية من المادة الأولية، يُمكن إجراء خطوة تضخيم عالية الدقة اختيارية.
Order Guidelines
1. Price & Stock Available on Request. Click to send email to: service@iright.com
2. Please DO NOT make payment before confirmation.
3. Minimum order value of $1,000 USD required.
Collaboration
Tony Tang
Email: Tony.Tang@iright.com
Mobile/WhatsApp/Wechat: +86-17717886924