شركة كياجين، 180615، مجموعة QIAseq Universal Normalizer (96)

يحتوي على 96 تفاعلًا من الكواشف لتطبيع مكتبات NGS التي تحتوي على تسلسلات P5/P7 سليمة.

سمات

- ينتج مكتبات مُعَدَّلة وجاهزة للتسلسل بتركيز 4 نانومول/لتر
- بروتوكول مبسط لمدة 30 دقيقة على سطح العمل
- التكامل السلس مع العديد من عمليات سير العمل الخاصة بتقنية التسلسل الجيني من الجيل التالي (NGS)، بما في ذلك QIAseq، بالإضافة إلى جميع عمليات سير العمل الخاصة بإعداد المكتبات التابعة لجهات خارجية تقريبًا لتقنية Illumina.
- ينتج الحمض النووي المزدوج السلسلة لتخزين المكتبة بشكل مستقر وعلى المدى الطويل
- لا حاجة إلى شفاط أبخرة

تفاصيل المنتج

توفر مجموعات QIAseq Normalizer طريقة عمل سريعة وسهلة لضبط تركيز أنواع مختلفة من المكتبات إلى تركيز ثابت (4 نانومول/لتر). بعد الضبط، يمكن تجميع المكتبات بأحجام متساوية للحصول على تمثيل متجانس للقراءات دون الحاجة إلى تحديد كمية المكتبة قبل التسلسل. تُمكّن مجموعات QIAseq Normalizer من تبسيط عمليات التسلسل من الجيل التالي (NGS) بكفاءة عالية من حيث التكلفة ووقت المعالجة مقارنةً بالطرق التقليدية التي تستخدم تقنيات تحديد كمية المكتبة وتجميعها.

تتوافق إجراءات عمل QIAseq Normalizer مع جميع المكتبات تقريبًا التي يمكن تسلسلها على أجهزة تسلسل Illumina. ويشمل ذلك إجراءات عمل QIAGEN بالإضافة إلى إجراءات عمل تحضير المكتبات الخاصة بأطراف ثالثة لأجهزة تسلسل Illumina.

هل ترغب بتجربة مجموعة أدوات QIAseq Library Normalizer لأول مرة؟ اطلب عرض سعر لمجموعة تجريبية.

هل ترغب بتجربة مجموعة QIAseq Universal Normalizer Kit لأول مرة؟ اطلب عرض سعر لمجموعة تجريبية.

أداء

- معايرة موثوقة عبر نطاق واسع من تركيزات المكتبة من 15 نانومول/لتر إلى أكثر من 300 نانومول/لتر
- متطلبات تركيز منخفضة للمكتبة: 15 نانومول/لتر أو أكثر في حجم 15 ميكرولتر
- توافق كامل مع أنواع مختلفة من المكتبات: الجينوم الكامل، والترانسكريبتوم الكامل، والمكتبات المُخصبة بالهدف
- مكتبات الحمض النووي المزدوج السلاسل القابلة للتكرار والمُعايَرة عند تركيز 4 نانومول/لتر

- خفض التكاليف وزيادة استخدام القراءة إلى أقصى حد من خلال تمثيل المكتبة المتجانس
- تبسيط عملية تحويل المكتبة إلى تسلسل من خلال استبدال طرق تحديد كمية المكتبة التي تستغرق وقتًا طويلاً بسير عمل QIAseq Normalizer
- إزالة طرق تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) المملة من سير عملهم
- تحقيق دقة تطبيع المكتبة على مستوى تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي في أقل وقت ممكن
- تخزين مكتبات الحمض النووي المزدوج السلاسل المُعَيَّرة لفترة أطول

تتيح مجموعات QIAseq Normalizer للمستخدم ما يلي:

مبدأ

تستخدم مجموعات QIAseq Normalizer بادئات تضخيم مكتبة مُعدّلة وتقنية كيميائية تعتمد على الخرز المغناطيسي لربط وإطلاق كمية محددة من جزيئات المكتبة بكفاءة عالية وبطريقة مُحكمة. وبتركيز مستهدف يبلغ حوالي 4 نانومول/لتر، يتم ضبط المكتبات المُعايرة بدقة لتحقيق تجميع متوازن للمكتبة وتجميع مثالي على خلايا التدفق Illumina. يتم فصل جزيئات مكتبة الحمض النووي المزدوج السلسلة (dsDNA) عن الخرز في ظروف غير مُسببة للتشوه، ويمكن تخزينها بأمان عند درجة حرارة -20 درجة مئوية للتخزين طويل الأمد.

يتطلب التسلسل المتعدد الفعال من حيث التكلفة تجميعًا دقيقًا للمكتبات لتحقيق أعماق تسلسل متقاربة لجميع المكتبات. سيؤدي عدم دمج المكتبات بنسب متساوية إلى نقص أو زيادة في تمثيلها من حيث إنتاجية التسلسل. ينتج عن المكتبات ذات التمثيل الناقص عدد قليل جدًا من قراءات التسلسل، بينما تؤدي المكتبات ذات التمثيل الزائد إلى هدر سعة التسلسل. المعيار الذهبي الحالي لتمكين تجميع المكتبات بدقة مقبولة هو تحديد كمية كل مكتبة قبل التجميع.

تشمل الطرق الشائعة لتحديد كمية المكتبات تفاعل البوليميراز المتسلسل (qPCR/dPCR)، والرحلان الكهربائي الهلامي الشعيري، واختبارات الحمض النووي اللونية. ورغم أن تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي (qPCR) أثبت كفاءته في تحديد كمية المكتبات بدقة عالية، إلا أنه يتطلب جهدًا كبيرًا ووقتًا طويلًا وتكلفة عالية. إضافةً إلى ذلك، فإن التخفيف المسبق للمكتبات قبل تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي، والتخفيف اليدوي للمكتبات بناءً على التركيز المُختبَر، يزيد من احتمالية الخطأ.

إجراء

تتبع آلية عمل برنامج QIAseq Normalizer خطوات بسيطة: الربط، والغسل، والفصل، وهي آلية متطابقة لجميع أنواع المكتبات المتوافقة. تتكون المكتبات المُعَيَّرة من الحمض النووي المزدوج (dsDNA) ولها تركيز مشترك يبلغ حوالي 4 نانومول/لتر، مما يسمح باستخدامها مباشرةً في التجميع والتسلسل.

قبل عملية التطبيع، يجب تعديل المكتبات باستخدام مزيج البادئات المُطَبِّعة. خلال دورة تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) المكونة من دورتين، وبوجود مزيج البادئات المُطَبِّعة، يمكن إضافة تعديلات إلى أي نوع من مكتبات Illumina تقريبًا ذات نهايات P5/P7 سليمة. توجد نهايات P5/P7 في أي مكتبة نهائية قابلة للتسلسل على أجهزة Illumina.

تتيح إجراءات تحضير المكتبات التي تتضمن ربط محولات مفهرسة كاملة الطول تعديل المكتبة أثناء العملية، ولا تتطلب خطوة تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) إضافية. تحتوي المحولات كاملة الطول، مثل محولات QIAseq CDI/UDI Y، على تسلسلات P5/P7 كاملة الطول. لذلك، يمكن تعديل المكتبات باستخدام مزيج البادئات Normalizer أثناء خطوة تضخيم المكتبة. لا يتوافق إجراء QIAseq Normalizer مع تحضير المكتبات بدون تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR).

التطبيقات

تكون المكتبات التي تمت معايرتها باستخدام مجموعات QIAseq Normalizer جاهزة مباشرة للتسلسل على جهاز Illumina.

تتوافق مجموعات QIAseq Normalizer مع جميع مجموعات تحضير مكتبة QIAseq وجميع مجموعات تحضير المكتبة التابعة لجهات خارجية تقريبًا، طالما أنها غير مخصصة لالتقاط التهجين اللاحق.