Product Description
لـ 96 تفاعلًا: محاليل منظمة وكواشف لتحليل الخلايا، وتضخيم الجينوم الكامل، وإعداد المكتبات، بما في ذلك تجزئة الحمض النووي، وإصلاح الأطراف، وربط المحولات؛ تتضمن خرزات QIAseq ولوحة تحتوي على 96 محولًا مشفرًا برمز UDI (المجموعة C) للاستخدام مع أجهزة Illumina
عرض المزيد
سمات
- مكتبات الجينوم الكامل من الخلايا المفردة، في أقل من 4 ساعات
- تحليل تسلسل واختلافات عدد النسخ في أي مكان في الجينوم
- يوفر مكتبات تسلسل الجيل التالي الخالية من تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) والحمض النووي الجينومي المضخم لإجراء اختبارات المتابعة
- يوفر بوليميراز الحمض النووي REPLI-g MDA تضخيمًا عالي الدقة ويقلل من النتائج الإيجابية الكاذبة
- يتضمن فهرسين مزدوجين فريدين (UDI) لتقليل تشوهات التسلسل الناتجة عن "قفز الفهرس" على أجهزة Illumina NGS
تفاصيل المنتج
توفر مجموعة QIAseq Single Cell DNA Library Kit UDI حلاً متكاملاً لتسلسل الجينوم الكامل من خلايا مفردة معزولة أو كميات قليلة من الحمض النووي الجينومي. تتضمن المجموعة جميع الكواشف اللازمة لتحليل الخلايا، وتضخيم الجينوم الكامل باستخدام بوليميراز الحمض النووي REPLI-g، وتجزئة الحمض النووي الأنزيمية، وإعداد مكتبة NGS خالية من تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) ومتوافقة مع جهاز Illumina NovaSeq وأجهزة NGS الأخرى. توفر هذه المجموعة تغطية جينومية شاملة ودقة تسلسل استثنائية، مما يقلل من النتائج الإيجابية الكاذبة ويقلل من فقدان البيانات. بفضل سير العمل الخالي من تفاعل البوليميراز المتسلسل، تُعد هذه المجموعة مناسبة للغاية لتحليل اختلال الصيغة الصبغية، وعدد النسخ، وتغير التسلسل في الخلايا المفردة من العينات النادرة. تحتوي المجموعة على جميع الكواشف اللازمة لبناء مكتبة الحمض النووي، بما في ذلك محولات QIAseq Unique Dual-Index Y-Adapters وخرز QIAseq لتنظيف التفاعل. تدعم مجموعة QIAseq Single Cell DNA Library Kit UDI ما يصل إلى 384 عينة في مسار خلية تدفق واحد، مما يزيد من إنتاجية العينات ويقلل من تكاليف التسلسل.
تتضمن مجموعة QIAseq Single Cell DNA Library Kit UDI بروتوكولات لتضخيم الجينوم الكامل غير المتحيز ولإثراء الجينومات الصغيرة المستهدفة، مثل الحمض النووي الفيروسي أو جينومات الميتوكوندريا.
أداء
توفر هذه المجموعة تغطية جينومية استثنائية من الخلايا المفردة، ومجموعات الخلايا، وكميات قليلة من الحمض النووي الجينومي، بما في ذلك المناطق ذات المحتوى العالي من الجوانين والسيتوزين. وبالمقارنة مع طرق تضخيم الجينوم الكامل القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR)، فإن تقنية التضخيم المتعدد الإزاحة (MDA) المضمنة في مجموعة QIAseq Single Cell DNA Library Kit UDI تقضي على النسخ المكررة الناتجة عن تفاعل البوليميراز المتسلسل وتقلل من تحيز الجوانين والسيتوزين، مما يضمن تنوعًا عاليًا للمكتبة وتغطية جينومية قصوى. بالإضافة إلى ذلك، يُدخل بوليميراز الحمض النووي REPLI-g عالي الدقة أخطاء تسلسل أقل من إنزيمات تفاعل البوليميراز المتسلسل عالية الدقة، مما يقلل من النتائج الإيجابية الكاذبة ويتيح اكتشافًا أكثر حساسية للطفرات. إن انخفاض مستوى الخلفية والتغطية الشاملة يجعلان هذه المجموعة مناسبة للغاية لتحليل اختلال الصيغة الصبغية، وتغيرات عدد النسخ، والطفرات من الخلايا المفردة والعينات ذات المدخلات المنخفضة.
مبدأ
تعتمد هذه المجموعة على ثلاث تقنيات رئيسية لإنتاج مكتبات جينومية كاملة عالية التنوع من خلايا مفردة. بعد تحلل الخلايا، يُستخدم تفاعل تضخيم متعدد الإزاحة عالي الدقة (MDA) لتضخيم كميات ضئيلة من الحمض النووي الجينومي (gDNA) باستخدام بوليميراز الحمض النووي REPLI-g عالي الدقة. ثم يُجزأ الحمض النووي الجينومي المُضخّم إلى أجزاء قصيرة باستخدام تفاعل تجزئة الحمض النووي FX الإنزيمي العشوائي للغاية من QIAGEN. بعد ذلك، يُصلح الحمض النووي المُجزأ ويُضاف إليه قاعدة "A" إلى الطرف 3' لتحضير الجزء المُدرج للربط. وأخيرًا، يُضيف تفاعل الربط فهرسًا مزدوجًا فريدًا إلى طرفي الجزء المُدرج. تتم هذه العملية برمتها، بدءًا من خلية مفردة معزولة، دون الحاجة إلى تفاعل البلمرة المتسلسل (PCR) وتستغرق 3.5 ساعات فقط.
إجراء
مجموعة QIAseq Single Cell DNA Library Kit UDI هي حل متكامل لتحويل الخلايا إلى مكتبات جينومية، إذ تتضمن جميع الكواشف اللازمة لإنشاء مكتبات جينومية كاملة عالية التنوع من خلايا مفردة أو كميات محدودة من الحمض النووي الجينومي السليم. تحتوي المجموعة على كواشف لتحليل الخلايا المفردة المعزولة أو مجموعات صغيرة من الخلايا بكفاءة، كما هو الحال في منصات التشريح المجهري بالليزر. بعد التحليل، يُضخّم الحمض النووي الجينومي باستخدام بوليميراز الحمض النووي REPLI-g عالي الدقة والمزود بخاصية التدقيق. يُخضع هذا الحمض النووي الجينومي المُضخّم لطريقة تجزئة إنزيمية عشوائية وفعالة، تقطع الحمض النووي إلى أجزاء أقصر متوافقة مع أي جهاز Illumina NGS. تُصقل هذه الأجزاء بعد ذلك وتخضع لتفاعل ربط عالي الكفاءة مع محولات QIAseq Unique Dual-Index Y-Adapters المرفقة. يؤدي ذلك إلى التقاط الحمض النووي المُجزأ بكفاءة في مكتبة، يمكن تنقيتها باستخدام خرز QIAseq المرفقة. إن تضخيم مكتبة PCR إضافي غير ضروري، مما يضمن أن الإجراء بأكمله خالٍ من PCR، وبالتالي القضاء على إمكانية إدخال أخطاء PCR أو نسخ مكررة، وضمان أقصى قدر من تنوع المكتبة.
التطبيقات
- إثراء الجينومات الصغيرة للحمض النووي بشكل خاص بالهدف
- تحليل عدم تجانس الجينوم بين الخلايا
- الكشف عن الطفرات
- تحليل تباين عدد النسخ
- تحليل اختلال الصيغة الصبغية
Order Guidelines
1. Price & Stock Available on Request. Click to send email to: service@iright.com
2. Please DO NOT make payment before confirmation.
3. Minimum order value of $1,000 USD required.
Collaboration
Tony Tang
Email: Tony.Tang@iright.com
Mobile/WhatsApp/Wechat: +86-17717886924