شركة كياجين، 204256، مجموعة كوانتي فاست بروبس بي آر (2000)

ملاحظة هامة: كما أُعلن سابقاً، فقد توقف إنتاج مجموعات QuantiFast منذ منتصف عام 2021. وبالتالي، ستكون هذه المنتجات متاحة فقط حتى نفاد الكمية.

لإجراء 2000 تفاعل بحجم 25 ميكرولتر: 25 مل من مزيج QuantiFast Probe PCR Master Mix بتركيز 2x (يحتوي على صبغة ROX)، و20 مل من الماء الخالي من RNase

سمات

- كشف حساس حتى للأهداف ذات النسخ المنخفضة
- الكشف الدقيق عن نطاق واسع من كميات القوالب
- نتائج أسرع مع توفير في الوقت يصل إلى 60%
- مزيج رئيسي مُحسَّن وجاهز للاستخدام للحصول على نتائج موثوقة دون الحاجة إلى تحسين
- بروتوكول واحد لركوب الدراجات لجميع راكبي الدراجات العاديين والسريعين

تفاصيل المنتج

توفر مجموعات QuantiFast Probe PCR قياسًا كميًا سريعًا وحساسًا لأهداف الحمض النووي الجينومي (gDNA) والحمض النووي المكمل (cDNA) باستخدام تفاعل البوليميراز المتسلسل في الوقت الحقيقي (PCR) وتفاعل البوليميراز المتسلسل العكسي ثنائي الخطوات (RT-PCR) باستخدام مجسات محددة التسلسل. تتيح تقنية Q-bond ومزيج رئيسي مُحسَّن تقليل وقت تشغيل تفاعل البوليميراز المتسلسل في الوقت الحقيقي، ليس فقط على أجهزة التدوير السريع ذات أوقات التسخين القصيرة، ولكن أيضًا على أجهزة التدوير القياسية. يضمن الجمع بين خاصية البدء الساخن ونظام محلول منظم فريد لتفاعل البوليميراز المتسلسل في المزيج الرئيسي الجاهز للاستخدام حساسية عالية لتفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي (qPCR) على أي جهاز تدوير في الوقت الحقيقي دون الحاجة إلى تحسين. يتوفر نوعان من المجموعات: مجموعة QuantiFast Probe PCR لأجهزة التدوير التي تتطلب صبغة ROX لتطبيع الفلورة، ومجموعة QuantiFast Probe PCR +ROX Vial لجميع أجهزة التدوير الأخرى. لسهولة التخزين، يمكن تخزين المزيج الرئيسي في درجة حرارة تتراوح بين 2 و8 درجات مئوية.

ملاحظة هامة: كما أُعلن سابقاً، توقف إنتاج مجموعات QuantiFast منذ منتصف عام ٢٠٢١. لذا، ستكون هذه المنتجات متوفرة حتى نفاد الكمية. تفضل بزيارة صفحة المنتج الخاص بالمجموعة البديلة للاطلاع على الميزات المحسّنة أو لطلب مجموعة تجريبية.

للمزيد من المعلومات والأسئلة الشائعة حول هذا الانتقال، تفضل بزيارة: www.qiagen.com/PCRresource.

أداء

متوسط ​​قيمة التصوير المقطعي المحوسب
الحمض النووي التكميلي لخلايا الدم البيضاء البشرية (نانوغرام): مجموعة كوانتي فاست بروبس بي سي آر + آر أو إكس فيال
100: 29.13
10: 32.50
1: 36.15
لا يوجد تحكم في القالب: 40.00

متوسط ​​قيمة التصوير المقطعي المحوسب
مجموعة أدوات تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي (QuantiFast Probe PCR + ROX) للكشف عن الحمض النووي التكميلي لخلايا الدم البيضاء البشرية: مجموعة أدوات تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي (QuantiFast Probe PCR + ROX Vial Kit)
100 نانوغرام: 11.99
10 نانوغرام: 15.54
1 نانوغرام: 19.22
100 صفحة: 22.63
10 صفحات: 26.43
صفحة واحدة: 30.02
100 fg: 33.42
لا يوجد عنصر تحكم في القالب: 40
كفاءة تفاعل البوليميراز المتسلسل: 90%

توفر مجموعات QuantiFast Probe PCR نتائج فائقة الحساسية، متفوقةً على مجموعات تفاعل البوليميراز المتسلسل الأخرى في الوقت الحقيقي (انظر الجدول "تفاعل البوليميراز المتسلسل العكسي الحساس ثنائي الخطوات على جهاز iCycler iQ" والشكل "تفاعل البوليميراز المتسلسل العكسي الحساس ثنائي الخطوات"). يتم تقليل أوقات تشغيل تفاعل البوليميراز المتسلسل بنسبة تصل إلى 60% (انظر الشكل "تقليل أوقات تفاعل البوليميراز المتسلسل بشكل ملحوظ")، مما يسمح لك بالحصول على نتائج سريعة دون المساس بأداء التفاعل (انظر الشكل "نتائج أسرع دون المساس بالحساسية"). كما يمكنك زيادة إنتاجية العينات بشكل كبير أو مشاركة جهاز التدوير بكفاءة مع مستخدمين آخرين.

تتيح مجموعات QuantiFast Probe PCR إجراء قياس كمي دقيق ضمن نطاق ديناميكي واسع (انظر الشكل "نطاق ديناميكي واسع وحساسية عالية"). ويمكن الكشف عن تخفيفات القالب حتى 7 لوغاريتمات بشكل موثوق (انظر الجدول "الكشف عن أكثر من 7 لوغاريتمات من القالب في تفاعل RT-PCR ثنائي الخطوات على جهاز LightCycler 2.0" والشكل "الكشف عن أكثر من 7 لوغاريتمات من القالب").

مبدأ

المكون: الميزات والفوائد
بوليميراز الحمض النووي HotStarTaq Plus: تنشيط لمدة 3 دقائق عند 95 درجة مئوية
محلول QuantiFast Probe PCR: مزيج متوازن من أيونات NH4+ و K+
مادة Q-Bond المضافة الفريدة: أوقات تشغيل أسرع لتفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR)، مما يتيح الحصول على نتائج أسرع وإجراء المزيد من التفاعلات يوميًا.
صبغة ROX †: تعمل على معايرة الإشارات الفلورية على أجهزة Applied Biosystems، ويمكن استخدامها أيضًا على أجهزة Agilent.

توفر مجموعات QuantiFast Probe PCR نتائج سريعة وحساسة للغاية ضمن نطاق ديناميكي واسع على كلٍ من أجهزة التدوير القياسية والسريعة. صُممت هذه المجموعات للاستخدام مع جميع أنواع المجسات المتخصصة بالتسلسل، بما في ذلك مجسات الكشف عن التحلل المائي (مثل TaqMan وغيرها من المجسات ثنائية التسمية) ومجسات FRET. يحتوي محلول PCR سريع مُطور خصيصًا على المادة المضافة الجديدة Q-Bond، التي تُقلل بشكل ملحوظ من أوقات التمسخ والتهجين والاستطالة (انظر الشكل "تهجين البادئات السريع"). كما يحتوي المحلول على مزيج متوازن من أيونات البوتاسيوم (K+) والأمونيوم (NH4+)، مما يُعزز تهجين البادئات النوعية، ويُمكّن من الحصول على خصوصية وحساسية عاليتين لتفاعل PCR (انظر الشكل "تهجين البادئات النوعية"). بالإضافة إلى ذلك، يوفر إنزيم HotStarTaq Plus DNA Polymerase بداية ساخنة صارمة، مما يمنع تكوين منتجات غير نوعية.

إجراء

صبغة روكس: طقم
مُرفق في مزيج رئيسي: مجموعة كوانتي فاست بروبس لتفاعل البوليميراز المتسلسل
مُرفق في أنبوب منفصل: مجموعة كوانتي فاست بروبس بي سي آر + آر أو إكس

تحتوي مجموعات QuantiFast Probe PCR على مزيج رئيسي جاهز للاستخدام، مما يُغني عن الحاجة إلى تحسين ظروف التفاعل والتدوير. ما عليك سوى إضافة الحمض النووي القالب، والبادئات، والمسبار إلى المزيج الرئيسي، واتباع البروتوكول الوارد في الدليل للحصول على نتائج سريعة وموثوقة على أي جهاز تدوير في الوقت الحقيقي. تتوفر المجموعات مع أو بدون صبغة ROX المرجعية السلبية في المزيج الرئيسي، مما يتيح استخدامها على أي جهاز تدوير في الوقت الحقيقي تقريبًا (انظر الجدول). بفضل تركيزات ROX المُحسّنة، يُمكن الكشف حتى عن أعداد النسخ المنخفضة من خلال التحليل التلقائي للبيانات.

للحصول على أفضل النتائج في تفاعل البوليميراز المتسلسل العكسي ثنائي الخطوات في الوقت الحقيقي، نوصي بتخليق الحمض النووي التكميلي (cDNA) باستخدام مجموعة QuantiTect Reverse Transcription Kit. توفر هذه المجموعة تخليقًا سريعًا للحمض النووي التكميلي في غضون 20 دقيقة فقط مع إزالة متكاملة لتلوث الحمض النووي الجينومي.

تُعدّ فحوصات QuantiFast Probe Assays فحوصات جينومية مُصممة مسبقًا، تعتمد على الكشف القائم على التحلل المائي والمجسات. وهي مُرفقة مع مجموعة QuantiFast Probe PCR Kit لضمان نتائج مضمونة في تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي العكسي أحادي النسخة ثنائي الخطوات.

التطبيقات

يمكن استخدام مجموعات QuantiFast Probe PCR لتحليل التعبير الجيني القائم على المجسات لأهداف الحمض النووي المكمل (cDNA) والتحليل الكمي للحمض النووي الجينومي (gDNA) على أي جهاز تدوير حراري في الوقت الحقيقي. يشمل ذلك أجهزة من Applied Biosystems وBio-Rad وCepheid وEppendorf وRoche وAgilent. بالنسبة لجهاز Rotor-Gene Q وأجهزة التدوير الحراري الأخرى من Rotor-Gene، نوصي باستخدام مجموعة Rotor-Gene Probe PCR، المصممة خصيصًا للتدوير السريع على هذه الأجهزة.