شركة كياجين، 204654، مجموعة كوانتي فاست متعددة التفاعلات الكيميائية (400)

ملاحظة هامة: كما أُعلن سابقاً، فقد توقف إنتاج مجموعات QuantiFast منذ منتصف عام 2021. وبالتالي، ستكون هذه المنتجات متاحة فقط حتى نفاد الكمية.

لإجراء تفاعلات بحجم 400 × 25 ميكرولتر: 3 × 1.7 مل من مزيج QuantiFast Multiplex PCR Master Mix (مع صبغة ROX)، 2 × 2 مل من الماء الخالي من RNase

سمات

- كشف حساس لما يصل إلى 4 أهداف في أنبوب واحد
- نتائج أسرع مع توفير في الوقت يصل إلى 50%
- نجاح تفاعل البوليميراز المتسلسل المتعدد دون الحاجة إلى تحسين
- تحديد كمي موثوق للأهداف ذات الوفرة المنخفضة والعالية

تفاصيل المنتج

تُمكّن مجموعات QuantiFast Multiplex PCR من تحديد كمية ما يصل إلى 4 أهداف من الحمض النووي التكميلي (cDNA) أو الحمض النووي الجينومي (gDNA) بسرعة وموثوقية في أنبوب واحد، وذلك باستخدام تفاعل البوليميراز المتسلسل المتعدد في الوقت الحقيقي (PCR) أو تفاعل البوليميراز المتسلسل العكسي ثنائي الخطوات (RT-PCR). تعمل تقنية Q-bond ومزيج رئيسي مُحسَّن على تعزيز سرعة تفاعل البوليميراز المتسلسل المتعدد في الوقت الحقيقي، ليس فقط على أجهزة التدوير السريع ذات أوقات التسخين القصيرة، بل أيضًا على أجهزة التدوير القياسية. يضمن الجمع بين خاصية البدء الساخن ونظام محلول منظم فريد لتفاعل البوليميراز المتسلسل في المزيج الرئيسي الجاهز للاستخدام حساسية عالية لتفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي (qPCR) على أي جهاز تدوير في الوقت الحقيقي دون الحاجة إلى تحسين. يتوفر نوعان من المجموعات: مجموعة QuantiFast Multiplex PCR لأجهزة التدوير التي تتطلب صبغة ROX لمعايرة الفلورة، ومجموعة QuantiFast Multiplex PCR +R لجميع أجهزة التدوير الأخرى. ولتسهيل الاستخدام، يمكن تخزين المزيج الرئيسي في درجة حرارة تتراوح بين 2 و8 درجات مئوية.

ملاحظة هامة: كما أُعلن سابقاً، توقف إنتاج مجموعات QuantiFast منذ منتصف عام ٢٠٢١. لذا، ستكون هذه المنتجات متوفرة حتى نفاد الكمية. تفضل بزيارة صفحة المنتج الخاص بالمجموعة البديلة للاطلاع على الميزات المحسّنة أو لطلب مجموعة تجريبية.

للمزيد من المعلومات والأسئلة الشائعة حول هذا الانتقال، تفضل بزيارة: www.qiagen.com/PCRresource.

أداء

يُتيح المزيج الرئيسي الخاص المُرفق مع مجموعات QuantiFast Multiplex PCR إعدادًا سريعًا لتفاعلات متعددة، ويُحقق نتائج ناجحة من المحاولة الأولى، مُوفرًا بيانات تفاعل البوليميراز المتسلسل المتعدد قابلة للمقارنة مع بيانات تفاعل البوليميراز المتسلسل الأحادي (انظر الشكل "نتائج قابلة للمقارنة في تفاعل البوليميراز المتسلسل الثلاثي والأحادي"). تستطيع هذه المجموعات التمييز بوضوح بين الاختلافات الطفيفة في كمية القالب. حتى مع اختلاف كمية القالب بمقدار الضعف، تُوفر مجموعات QuantiFast Multiplex PCR قياسًا كميًا دقيقًا للأهداف ذات الوفرة المتباينة بشكل كبير (انظر الشكل "قيم العتبة الخطية عند انخفاض كمية القالب بمقدار الضعف").

تُقلل مجموعات QuantiFast Multiplex PCR أوقات تشغيل تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) بنسبة تصل إلى 50%، مما يُتيح لك الحصول على النتائج بشكل أسرع بكثير (انظر الشكل "أوقات PCR مُخفّضة بشكل ملحوظ"). يُمكن الكشف عن 10 نسخ فقط من الهدف في 60 دقيقة فقط (انظر الشكل "تفاعل PCR مزدوج عالي الحساسية ونطاق ديناميكي واسع"). كما يُمكنك زيادة إنتاجية العينات بشكل كبير أو مشاركة جهاز التدوير بكفاءة مع مستخدمين آخرين. يتم تحقيق نتائج سريعة في تفاعل PCR متعدد الأهداف في الوقت الحقيقي لما يصل إلى 4 أهداف دون المساس بالأداء (انظر الشكل "حساسية عالية").

مبدأ

المكون: الميزات
بوليميراز الحمض النووي HotStarTaq Plus: تنشيط لمدة 5 دقائق عند 95 درجة مئوية
محلول QuantiFast Multiplex PCR: مزيج متوازن من أيونات NH4+ و K+
عامل التركيب MP: تحليل متعدد موثوق به لما يصل إلى 4 جينات في نفس الأنبوب
مادة Q-Bond المضافة الفريدة: أوقات تشغيل أسرع لتفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR)، مما يتيح الحصول على نتائج أسرع وإجراء المزيد من التفاعلات يوميًا.
صبغة ROX †: تعمل على معايرة الإشارات الفلورية على أجهزة Applied Biosystems، ويمكن استخدامها أيضًا على أجهزة Agilent.

توفر مجموعات QuantiFast Multiplex PCR نتائج عالية الحساسية وسريعة ضمن نطاق ديناميكي واسع على كل من أجهزة التدوير القياسية والسريعة دون الحاجة إلى تحسين (انظر مخطط التدفق "مجموعات QIAGEN المتعددة"). يحتوي محلول التفاعل السريع PCR المُطور خصيصًا على المادة المضافة الجديدة Q-Bond، التي تُقلل بشكل كبير من أوقات التمسخ والتهجين والاستطالة (انظر الشكل "تهجين البادئات السريع").

يُحسّن تضخيم الجينات المرجعية والمستهدفة في تفاعل واحد، بدلاً من تفاعلات منفصلة، ​​من دقة قياس كمية الجينات بتقليل أخطاء المعالجة. يحتوي محلول QuantiFast Multiplex PCR Buffer على مزيج متوازن من أيونات البوتاسيوم (K+) والأمونيوم (NH4+)، بالإضافة إلى العامل الاصطناعي الفريد MP، الذي يُعزز معًا ارتباطًا مستقرًا وفعالًا للبادئات والمجسات بقالب الحمض النووي، مما يُتيح كفاءة عالية في تفاعل البلمرة المتسلسل (انظر الشكل "محلول PCR الفريد"). علاوة على ذلك، يُوفر إنزيم HotStarTaq Plus DNA Polymerase بداية ساخنة صارمة، مانعًا تكوين نواتج غير نوعية.

إجراء

صبغة روكس: طقم
مُرفق في مزيج رئيسي: مجموعة كوانتي فاست متعددة التفاعلات الكيميائية المتسلسلة
مُرفق في أنبوب منفصل: مجموعة QuantiFast Multiplex PCR +R

تحتوي مجموعات QuantiFast Multiplex PCR على مزيج رئيسي جاهز للاستخدام، مما يُغني عن الحاجة إلى تحسين ظروف التفاعل والتدوير. ما عليك سوى إضافة الحمض النووي القالب ومجموعات البادئات والمجسات إلى المزيج الرئيسي، واتباع البروتوكول الوارد في الدليل للحصول على نتائج سريعة وموثوقة على أي جهاز تدوير في الوقت الحقيقي. تتوفر المجموعات مع أو بدون صبغة ROX المرجعية السلبية في المزيج الرئيسي، مما يتيح استخدامها على أي جهاز تدوير في الوقت الحقيقي تقريبًا (انظر الجدول). بفضل تركيزات ROX المُحسّنة، يُمكن الكشف حتى عن أعداد النسخ المنخفضة من خلال التحليل التلقائي للبيانات.

للحصول على أفضل النتائج في تفاعل البوليميراز المتسلسل العكسي ذي الخطوتين في الوقت الحقيقي، نوصي بتخليق الحمض النووي التكميلي باستخدام مجموعة QuantiTect Reverse Transcription Kit، والتي توفر تخليقًا سريعًا للحمض النووي التكميلي في غضون 20 دقيقة فقط مع إزالة متكاملة لتلوث الحمض النووي الجينومي.

تُعدّ فحوصات QuantiFast Probe Assays فحوصات جينومية مُصممة مسبقًا، تعتمد على الكشف القائم على التحلل المائي والمجسات. وهي مُرفقة مع مجموعة QuantiFast Multiplex PCR Kit لضمان نتائج مضمونة في تفاعل البوليميراز المتسلسل العكسي الكمي ثنائي الخطوات.

التطبيقات

يمكن استخدام مجموعات QuantiFast Multiplex PCR لتحليل التعبير الجيني المتعدد لأهداف cDNA أو gDNA على أي جهاز تدوير حراري في الوقت الحقيقي. يشمل ذلك أجهزة من شركات Agilent وApplied Biosystems وBio-Rad وCepheid وEppendorf وRoche. بالنسبة لجهاز Rotor-Gene Q وأجهزة التدوير الحراري الأخرى من Rotor-Gene، نوصي باستخدام مجموعة Rotor-Gene Multiplex PCR، المصممة خصيصًا للتدوير السريع على هذه الأجهزة.