Qiagen، 205211، مجموعة Sensiscript RT (50)

لإجراء 50 تفاعل نسخ عكسي: إنزيم النسخ العكسي Sensiscript، 150 ميكرولتر من محلول منظم RT بتركيز 10x، 100 ميكرولتر من مزيج dNTP (يحتوي على 5 ملي مولار من كل dNTP)، 1.1 مل من الماء الخالي من RNase

سمات

- كشف حساس لعدد قليل يصل إلى 10 نسخ من القالب
- إنتاجية عالية من الحمض النووي التكميلي (cDNA) بفضل الإنزيم ذي الألفة العالية
- لا حاجة إلى خطوة هضم إضافية باستخدام إنزيم RNase H
- إجراء سريع وسهل بدون خطوات سحب مملة

أداء

يُوفر إنزيم النسخ العكسي Sensiscript كفاءةً فائقةً ضمن نطاق ديناميكي واسع وحساسيةً عاليةً لكميات ضئيلة جدًا من الحمض النووي الريبي (انظر الشكل "RT-PCR باستخدام الحمض النووي الريبي المُطابق لخلية واحدة"). قد تتسبب مناطق الحمض النووي الريبي ذات المحتوى العالي من الجوانين والسيتوزين في توقف إنزيمات النسخ العكسي الأخرى، أو انفصالها عن قالب الحمض النووي الريبي، أو تخطيها للمناطق الحلقية من الحمض النووي الريبي (انظر الشكل "منتجات RT-PCR كاملة الطول - ب"). مع ذلك، لا تُمثل هذه القوالب الصعبة أي مشكلة لإنزيمات النسخ العكسي من QIAGEN (انظر الشكل "منتجات RT-PCR كاملة الطول - أ"). وبفضل عدم الحاجة إلى أي تحسين، تُسهّل مجموعة Sensiscript RT عملية النسخ العكسي بشكلٍ كبير.

تضمن شركة QIAGEN ثبات نتائج مجموعات Sensiscript RT من دفعة إلى أخرى بفضل نظام مراقبة الجودة الصارم. ويُضمن خلوّ كل من محلول Buffer RT المُحسّن، وdNTPs، والماء المُستخدم في جميع مجموعات Sensiscript RT من إنزيم RNase، كما تخضع كل دفعة من Sensiscript RT لاختبارات دقيقة لضمان ثبات نتائج تفاعل البوليميراز المتسلسل العكسي (RT-PCR).

مبدأ

إنزيم النسخ العكسي Sensiscript RT هو أول إنزيم متوفر تجاريًا مصمم خصيصًا للتطبيقات عالية الحساسية التي تتطلب كميات ضئيلة جدًا من الحمض النووي الريبي (<50 نانوغرام)، مثل تفاعل البوليميراز المتسلسل العكسي للخلايا المفردة أو تحليل الخزعات الصغيرة. يأتي الإنزيم جاهزًا للاستخدام مع النيوكليوتيدات ثلاثية الفوسفات (dNTPs) وفي محلول تفاعل مُحسَّن، مما يُتيح، جنبًا إلى جنب مع الألفة العالية لإنزيم Sensiscript RT تجاه الحمض النووي الريبي، الحصول على تفاعل بوليميراز متسلسل عكسي عالي التخصص والحساسية، حتى مع النسخ ذات النسخ المنخفضة، والقدرة على قراءة حتى البنى الثانوية المعقدة للحمض النووي الريبي دون الحاجة إلى تعديل درجة الحرارة أو ظروف التفاعل. يُرجى ملاحظة أن مزيج البادئات غير مُرفق.

بالنسبة للحمض النووي الريبي الفيروسي، فإن إنزيم Omniscript RT هو عادةً الإنزيم المفضل نظرًا لوجود الحمض النووي الريبي الحامل في معظم مستحضرات الحمض النووي الريبي الفيروسي.

التطبيقات

- اختبار النسخ العكسي القياسي واختبار تفاعل البوليميراز المتسلسل العكسي
- تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي في الوقت الحقيقي
- عرض تفاضلي بتقنية RT-PCR
- امتداد البادئ وتحليل RACE
- تخليق الحمض النووي التكميلي ثنائي السلسلة لأغراض الاستنساخ

يُعد إنزيم النسخ العكسي Sensiscript مناسبًا للاستخدام في التطبيقات التالية: