شركة كياجين، 206246، مجموعة أدوات تفاعل البوليميراز المتسلسل للميكروساتلايت Type-it (2000)

لتفاعلات بحجم 2000 × 25 ميكرولتر: 2x مزيج رئيسي متعدد لتفاعل البوليميراز المتسلسل (1 × 25 مل)، 5x محلول Q (1 × 10 مل)، ماء خالٍ من RNase (1 × 20 مل).

سمات

- تحليل موثوق للميكروساتلايت بواسطة تفاعل البوليميراز المتعدد
- تطوير اختبار الميكروساتلايت بدون تحسين
- تضخيم مشترك ناجح ومحدد لجميع الأجزاء
- بروتوكول مُحسَّن للحصول على نتائج سريعة وموثوقة
- تعليمات سهلة للاستخدام مع منصات تحليل البيانات المختلفة

مبدأ

توفر مجموعة Type-it Microsatellite PCR Kit تحليلًا سريعًا وموثوقًا للنمط الجيني للإنسان والحيوان والنبات والبكتيريا باستخدام علامات الميكروساتلايت أو STR أو VNTR، دون الحاجة إلى إجراءات تحسين مطولة. تعتمد هذه المجموعة على تقنية QIAGEN متعددة التحليل، وتتضمن بوليميراز الحمض النووي HotStarTaq Plus عالي التخصص، وهو إنزيم بدء ساخن مُعدَّل كيميائيًا، ونظام محلول منظم متعدد التحليل مُطوَّر خصيصًا يتضمن العامل MP. تضمن هذه المكونات مجتمعةً إنتاجية عالية وتُمكّن من تضخيم متعدد موثوق لجميع مواقع الميكروساتلايت ذات الأهمية. تتضمن المجموعة بروتوكولات مُخصصة لتضخيم الميكروساتلايت أو STR، بالإضافة إلى إرشادات خطوة بخطوة حول كميات القالب، وعدد الدورات، وظروف تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR)، وتفاصيل الأجهزة لمنصات التحليل المختلفة، مثل هلام الأغاروز، وأجهزة التسلسل الشعرية، وجهاز Agilent Bioanalyzer، ونظام QIAxcel Advanced.

محلول منظم تفاعل البوليميراز المتسلسل للميكروساتلايت من نوع Type-it

يُسهّل مُنظّم تفاعل البوليميراز المتسلسل الفريد من نوعه Type-it Microsatellite PCR تضخيم العديد من نواتج تفاعل البوليميراز المتسلسل. على عكس كواشف تفاعل البوليميراز المتسلسل التقليدية، يحتوي مُنظّم تفاعل البوليميراز المتسلسل Type-it Microsatellite PCR على مزيج مُتوازن ومُطوّر خصيصًا من الأملاح والمواد المُضافة لضمان كفاءة مُتقاربة في عملية التلدين والتمديد لجميع البادئات في التفاعل. بفضل مزيجه المُتوازن الفريد من كلوريد البوتاسيوم (KCl) وكبريتات الأمونيوم (NH₄)₂SO₄، يُوفّر مُنظّم تفاعل البوليميراز المتسلسل ظروف تلدين صارمة للبادئات ضمن نطاق أوسع من درجات الحرارة وتركيزات أيونات المغنيسيوم (Mg²⁺) مُقارنةً بمُنظّمات تفاعل البوليميراز المتسلسل التقليدية. تقلّ الحاجة إلى تحسين تفاعل البوليميراز المتسلسل عن طريق تغيير درجة حرارة التلدين أو تركيز أيونات المغنيسيوم بشكل كبير، أو غالبًا ما تُصبح غير ضرورية. كما يتم الاستغناء فعليًا عن إجراءات التحسين المُستخدمة عادةً في تفاعل البوليميراز المتسلسل المُتعدد. يحتوي المُنظّم أيضًا على العامل الاصطناعي MP (انظر الشكل "تلدين مُستقر وفعّال")، والذي يسمح بتلدين وتمديد البادئات بكفاءة، بغض النظر عن تسلسل البادئات. يزيد العامل MP من التركيز الموضعي للبادئات عند قالب الحمض النووي ويعمل على تثبيت البادئات المرتبطة بشكل خاص.

كيو-سوليوشن

تتضمن مجموعة Type-it Microsatellite PCR Kit محلول Q-Solution. يُسهّل هذا المُضاف المُبتكر لتفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) تضخيم القوالب الصعبة عن طريق تعديل سلوك انصهار الحمض النووي. غالبًا ما يُتيح استخدام هذا الكاشف الفريد أو يُحسّن تفاعل البوليميراز المتسلسل غير الأمثل. على عكس ثنائي ميثيل سلفوكسيد (DMSO) ومُضافات تفاعل البوليميراز المتسلسل الأخرى، يُستخدم محلول Q-Solution بتركيز عمل مُحدد مع أي نظام بادئ-قالب، وهو غير سام.

إجراء

تتضمن مجموعة Type-it Microsatellite PCR Kit بروتوكولات مخصصة لتطبيقات محددة، مُحسّنة لتحليل الميكروساتلايت باستخدام أجهزة التسلسل الشعيرية عالية الدقة، لضمان نتائج موثوقة للتحليلات الروتينية، بالإضافة إلى تطوير فحوصات جديدة. يمكن إجراء التفاعلات في درجة حرارة الغرفة، مما يضمن سهولة الاستخدام وراحة أكبر.

طريقة سريعة وبسيطة للحصول على نتائج موثوقة في تحديد النمط الجيني

تتيح مجموعة Type-it Microsatellite PCR Kit تطويرًا سريعًا وسهلًا لتحليل متعدد الأهداف، مما يضمن نتائج دقيقة وقابلة للتكرار في تحديد النمط الجيني. أيًا كان التطبيق - تحليل الميكروساتلايت، أو STR، أو SSR، أو VNTR - ما عليك سوى إضافة القالب والبادئات، وبدء برنامج جهاز التدوير الحراري وفقًا للبروتوكول الأمثل. يحتوي مزيج التفاعل على جميع الكواشف اللازمة لتفاعل البوليميراز المتسلسل المتعدد الخاص بالميكروساتلايت، مما يتيح الحصول على نتائج دقيقة دون الحاجة إلى إجراءات تحسين مطولة مقارنةً بالطرق الحالية (انظر الشكل "تحليل ناجح لتحديد النمط الجيني باستخدام تفاعل البوليميراز المتسلسل المتعدد").

مُحسَّن للاستخدام مع أجهزة التسلسل الشعري

غالبًا ما يرتبط تحليل التكرارات الميكروية باستخدام أنظمة الكشف عالية الدقة، مثل أجهزة التسلسل الشعيرية، بمشكلة تفاوت إنتاجية المنتج واختلافات شدة الإشارات الفلورية بشكل كبير. تتغلب مجموعة Type-it Microsatellite PCR Kit على هذا القيد، وتضمن إنتاجية عالية لجميع المضخمات في تجربة متعددة. تتضمن المجموعة بروتوكولات مُحسَّنة للاستخدام مع البادئات الفلورية، وتتفوق على محاليل الإنزيمات من موردين آخرين (انظر الشكل "تحليل STR موثوق به لـ 13 تكرارًا دون الحاجة إلى تحسين").

التطبيقات

- تحديد الأنواع أو الأفراد
- تحليل العلاقة
- عدم استقرار الميكروساتلايت
- علم الوراثة السكانية

تُستخدم مجموعة Type-it Microsatellite PCR لتحليل الميكروساتلايت، وSTRs (التكرارات الترادفية القصيرة)، وSSRs (تكرارات التسلسل البسيط)، وVNTRs (التكرارات الترادفية ذات العدد المتغير)، ويمكن استخدامها في مجالات بحثية متنوعة مثل: