شركة كياجين، 206442، مجموعة ألترا رن لونغ رينج بي آر (100) icon_0368_ls_gen_eco_friendly-s

لتحضير 100 تفاعل PCR بحجم 20 ميكرولتر: 1 × 500 ميكرولتر من مزيج UltraRun LongRange PCR Master Mix (4x)، 1 × 200 ميكرولتر من مُتتبع القالب (25x)، 1 × 50 ميكرولتر من مُتتبع المزيج الرئيسي (125x)، 1 × 2 مل من محلول Q-Solution (5x)، 1 × 1.9 مل من الماء الخالي من RNase

سمات

- تقنية تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) فائقة السرعة وطويلة المدى تعمل على تبسيط سير العمل بشكل كبير.
- مزيج من البوليميراز والمصحح يتميز بدقة أعلى بعشر مرات من إنزيم Taq، مما يضمن نتائج تسلسل واضحة
- يسهل التجميع المعتدل لما يصل إلى 6 أهداف التحليل المتزامن لمختلف المناطق
- دقة وحساسية فائقتان – بدء تشغيل سريع للبوليميراز والإكسونوكلياز بوساطة الأجسام المضادة
- مراقبة عملية السحب باستخدام الماصة بصريًا وتتبع الجل باستخدام الأصباغ لضمان نجاح العملية
- إعداد تفاعل مستقر وجاهز للتشغيل الآلي في درجة حرارة الغرفة

تفاصيل المنتج

توفر مجموعة UltraRun LongRange PCR Kit طريقةً ملائمةً لإجراء تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) عالي الحساسية والدقة لمسافات طويلة تصل إلى 30 كيلوبايت باستخدام أي قالب DNA أو cDNA. يحتوي المزيج الرئيسي الجاهز للاستخدام على مزيج من بوليميراز Taq المُتحكم فيه بالبدء الساخن، ومصحح أخطاء، ومواد مضافة أخرى، مما يوفر سرعةً استثنائيةً مقارنةً بمجموعات PCR الحالية للمسافات الطويلة، بالإضافة إلى قدرة متوسطة على تعدد الإرسال. ولذلك، تُعد هذه المجموعة خيارًا مثاليًا لتسلسل الأمبليكونات الطويلة في مجالات علم المناعة، والسرطان، وعلم الأحياء الدقيقة. تشمل الميزات الإضافية التحكم البصري في عملية المعايرة، والثبات في درجة حرارة الغرفة أثناء وبعد تحضير التفاعل، ومزيج رئيسي مُركز 4 مرات لأحجام عينات أكبر. علاوةً على ذلك، يسمح محلول Q-Solution الاختياري بتضخيم الأهداف الغنية بالـ GC وغيرها من الأهداف الصعبة.

هل ترغب بتجربة هذا الحل لأول مرة؟ اطلب عرض سعر لمجموعة تجريبية.

أداء

يُوفر مزيجٌ متطور من المحلول المنظم والإنزيمات تضخيمًا واسع النطاق يصل إلى 30 كيلوبايت بسرعة استثنائية، وذلك باستخدام خطوة تلدين-استطالة مُدمجة مدتها 30 ثانية لكل كيلوبايت. يُمكن الحصول على غلة عالية من كمية ضئيلة جدًا من القالب، تصل إلى بضعة بيكوغرامات. يُحسّن هذا بشكل كبير من سير عمل الفحص، مما يُسهّل إجراء تفاعل البوليميراز المتسلسل واسع النطاق مع التحليل اللاحق في غضون يوم واحد. تسمح التركيبة القوية بإعداد التفاعل تلقائيًا في درجة حرارة الغرفة، حيث يتم التحكم في نشاط كل من البوليميراز والمصحح بواسطة بدء التشغيل الساخن بوساطة الأجسام المضادة، مما يمنع أي تلف للقالب أو البادئات أو المنتجات الناتج عن النشاط الإنزيمي المُبكر. يُظهر المصحح المُعتمد على اليوراسيل ألفة عالية للقالب، مما يُوفر قراءات طويلة ودقة أعلى بعشر مرات من إنزيم Taq. يُتيح الاستخدام الاختياري لمحلول Q-Solution تضخيم الأهداف الصعبة أو الغنية بالـ GC، وهو أمر مفيد بشكل خاص في تفاعل البوليميراز المتسلسل واسع النطاق. علاوة على ذلك، تسمح تركيبة المزيج الرئيسي بتعدد إرسال معتدل لما يصل إلى 6 أهداف في نطاق يتراوح تقريبًا بين 1 و9 كيلوبايت. يعمل تركيز المزيج الرئيسي 4x بالإضافة إلى المعايرة البصرية المتكاملة وأصباغ تحميل الجل على تحسين الكفاءة في عمليات تحديد النمط الجيني واختبارات الجينات.

مبدأ

توفر مجموعة UltraRun LongRange PCR تركيبة مزيج رئيسي مريحة 4x، ومتتبع مزيج UCP الرئيسي البرتقالي، ومتتبع قالب UCP الأزرق، ومحلول Q (للاستخدام الاختياري) في قوارير منفصلة.

يتكون المزيج الرئيسي الجاهز للاستخدام من مزيج من الإنزيمات - بوليميراز الحمض النووي Taq وبوليميراز مزود بخاصية التدقيق - مما يُحسّن وقت العمل اليدوي وكفاءة العملية، بالإضافة إلى محلول منظم متطور لتفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) مُحسَّن لتفاعلات PCR الطويلة ومزيج dNTP. عند درجات الحرارة المنخفضة، تُبقي الأجسام المضادة نشاط كل من البوليميراز والمدقق في حالة غير نشطة. يوفر هذا بدءً ساخنًا دقيقًا ويمنع أي نشاط إنزيمي حتى التنشيط الحراري عند 93 درجة مئوية، وبالتالي تجنب تلف البادئات أو الحمض النووي الناتج عن نشاط المدقق في غير وقته. بفضل هذه الخاصية، تكون التفاعلات الكاملة، بما في ذلك البادئات والقالب، مستقرة في درجة حرارة الغرفة لفترات أطول لتسهيل التعامل مع العملية. علاوة على ذلك، يسمح تركيز المزيج الرئيسي 4x بمرونة أكبر في أحجام إدخال القالب مقارنةً بالمزيجات الرئيسية الشائعة 2x، كما تُمكّن الأصباغ الموجودة في تركيبة المزيج الرئيسي من تحميل تفاعلات PCR مباشرةً على هلامات الأغاروز للتحليل.

تتضمن مجموعة UltraRun LongRange PCR Kit محلول Q-Solution، وهو مُضاف مبتكر لتفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) يُسهّل تضخيم القوالب الصعبة عن طريق تعديل سلوك انصهار الحمض النووي. على عكس مُضافات تفاعل البوليميراز المتسلسل الأخرى الشائعة الاستخدام مثل DMSO، يُستخدم محلول Q-Solution بتركيز واحد فقط، وهو غير سام، ويضمن نقاء تفاعل البوليميراز المتسلسل.

تتيح الصبغات الزرقاء والبرتقالية في مُتتبّع قالب UCP ومُتتبّع مزيج UCP الرئيسي، على التوالي، التتبع البصري للعينات المسحوبة بالماصة أثناء إعداد تفاعل البلمرة المتسلسل (PCR)، وذلك لتجنب الأخطاء. عند إضافة القالب الأزرق إلى مزيج PCR الرئيسي البرتقالي، يتغير اللون إلى الأخضر، مما يؤكد إضافة العينة (انظر الشكل: التحكم البصري في السحب بالماصة). استخدام هذه المُتتبّعات اختياري. يمكن تحميل التفاعلات مباشرةً على هلامات الأغاروز بعد دورات التفاعل. تتيح كل صبغة من صبغات التتبع مراقبة عملية التحميل والتتبع الفعال لعملية الفصل الكهربائي اللاحقة.

إجراء

يمكن استخدام حجم إدخال قالب عالي مع مجموعة UltraRun LongRange PCR Kit نظرًا لتركيبة المزيج الرئيسي المركزة 4 مرات، مما يعزز الحساسية بشكل أكبر.

يُضاف مُتتبّع المزيج الرئيسي البرتقالي اختياريًا إلى المزيج الرئيسي أو محلول تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR). عند إضافة قالب مُلوّن بمُتتبّع القالب الأزرق إلى المزيج الرئيسي، يتغير لون المحلول من البرتقالي إلى الأخضر، مما يُشير بصريًا إلى صحة عملية المعايرة وإعداد التفاعل (انظر الشكل: إجراء تفاعل البوليميراز المتسلسل). تُسهّل أصباغ التتبّع التحميل المباشر على هلام الأغاروز بعد تفاعل البوليميراز المتسلسل وتتبّع عملية الفصل الكهربائي بكفاءة. ينفصل اللونان عند حوالي 50 زوجًا قاعديًا (برتقالي) و4000 زوجًا قاعديًا (أزرق) على هلام أغاروز بنسبة 1% (انظر الشكل: سهولة الرؤية).

يُتيح نظام المحلول المنظم متعدد الاستخدامات إجراء تفاعل البوليميراز المتسلسل فائق السرعة باستخدام خطوة تلدين-استطالة مُدمجة مدتها 30 ثانية/كيلوبايت. كما يُغني عن الحاجة إلى تحسين أو تغيير مكونات المحلول المنظم. يُمكن استخدام محلول Q-Solution اختياريًا لتعديل سلوك الذوبان وتمكين تضخيم القوالب الصعبة. يُمكن إعداد التفاعل بالكامل في درجة حرارة الغرفة دون الحاجة إلى ثلج وباستخدام ماصة آلية، وذلك بفضل آلية البدء الساخن.

لتبسيط إجراءات تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) بشكل أكبر، نوصي باستخدام جهاز QIAgility لإعداد التفاعلات آليًا. ولتحليل الميكروبيوم، تقدم QIAGEN مجموعة من المنتجات المتخصصة، بما في ذلك مجموعة DNeasy Power Soil Pro لاستخلاص العينات، ولوحات QIAseq 16S/ITS Region للتسلسل الجيني من الجيل التالي، وبرنامج QIAGEN CLC Genomics Pro Suite لتحليل المعلوماتية الحيوية.

التطبيقات

تُعدّ مجموعة UltraRun LongRange PCR مثاليةً للإجراءات التي تتضمن تضخيمًا طويلًا للأهداف، بما في ذلك تسلسل الأمبليكونات الطويلة في مجالات علم المناعة والسرطان والميكروبات. ويمكن تبسيط تحليل الجينات الورمية، أو مستضدات الكريات البيضاء البشرية (HLA)، أو التسلسلات البكتيرية والفطرية الشاملة مثل 16S و23S وITS بشكلٍ كبير باستخدام الإنتاجية العالية التي يوفرها تفاعل البوليميراز المتسلسل طويل المدى فائق السرعة والقابل للأتمتة.