شركة كياجين، 208454، مجموعة كوانتينوفا متعددة التفاعلات البوليميرازية (500) icon_0368_ls_gen_eco_friendly-s

لتحضير 500 تفاعل بحجم 20 ميكرولتر: 2 × 1.3 مل من مزيج QuantiNova Multiplex PCR Mastermix، 500 ميكرولتر من محلول تخفيف القالب الأصفر، 1 مل من صبغة ROX المرجعية، 3 × 1.9 ميكرولتر من الماء الخالي من RNase

سمات

- إعداد دقيق للاستجابة مع مؤشر مرئي مدمج
- كشف دقيق وقوي للأهداف حتى نسخة واحدة
- دقة لا مثيل لها بفضل آلية التشغيل السريع الجديدة
- كشف حساس لما يصل إلى 5 أهداف في أنبوب واحد
- استقرار التفاعل لمدة تصل إلى 100 ساعة عند درجة حرارة 30 درجة مئوية لسير عمل مرن

تفاصيل المنتج

بفضل خصائصه المحسّنة من حيث الدقة والحساسية والسرعة وأمان العملية، يرسي طقم QuantiNova SYBR Green PCR (طقم SYBR qPCR) معايير جديدة في تقنية qPCR القائمة على SYBR Green. تعمل آلية البدء الساخن المبتكرة على زيادة دقة تفاعل البوليميراز المتسلسل في الوقت الحقيقي بشكل ملحوظ، بينما تُنتج التركيبة الكيميائية المُحسّنة نتائج كمية دقيقة من الحمض النووي التكميلي (cDNA) أو الحمض النووي الجينومي (gDNA) على أي جهاز تدوير لتفاعل البوليميراز المتسلسل في الوقت الحقيقي، مع إمكانية الكشف حتى عن نسخة واحدة من الهدف. وأخيرًا، يضمن مؤشر مرئي مدمج دقة عملية المعايرة.

تجنب الآثار الضارة للتحضير الخاطئ عند درجات الحرارة المنخفضة باستخدام مجموعة QuantiNova Probe PCR (مجموعة qPCR القائمة على المجسات). تعتمد هذه المجموعة على آلية بدء ساخنة مبتكرة بوساطة الأجسام المضادة، مما يعزز دقة وكفاءة تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي في الوقت الحقيقي (qPCR) القائم على المجسات، لتوفير تحليل دقيق، أحادي أو مزدوج، للحمض النووي التكميلي (cDNA) أو الحمض النووي الجينومي (gDNA) على مختلف أجهزة qPCR. كما أن ثباتها الفائق لمدة تصل إلى 100 ساعة في درجة حرارة الغرفة، دون الحاجة إلى أي عامل تبريد، يجعلها مثالية للتعامل مع العينات ذات الإنتاجية العالية وسير العمل الآلي. يمنحك نظام التتبع المدمج للتعرف البصري على عملية السحب الصحيحة راحة بال تامة، بينما يضمن الكشف فائق الحساسية حتى عن الكميات المنخفضة من الهدف نتائج qPCR موثوقة في كل مرة.

تُمكّن مجموعات QuantiNova Multiplex PCR (مجموعات qPCR المتعددة) من تحديد كمية ما يصل إلى 5 أهداف من الحمض النووي المكمل (cDNA) أو الحمض النووي الجينومي (gDNA) بسرعة وموثوقية في أنبوب واحد، وذلك باستخدام تفاعل البوليميراز المتسلسل المتعدد في الوقت الحقيقي (PCR) أو تفاعل البوليميراز المتسلسل العكسي ثنائي الخطوات (RT-PCR). تعمل تقنية Q-bond ومزيج رئيسي مُحسَّن على تسريع تفاعل البوليميراز المتسلسل المتعدد في الوقت الحقيقي خلال ساعة واحدة. يضمن الجمع بين نظام بدء التشغيل الساخن الفريد ونظام محلول PCR في المزيج الرئيسي الجاهز للاستخدام بتركيز 4x حساسية عالية لتفاعل qPCR على أي جهاز تدوير في الوقت الحقيقي دون الحاجة إلى تحسين، كما يوفر خيارات إعداد تفاعل آلية في درجة حرارة الغرفة. يساعد نظام التتبع المدمج للتعرف البصري على عملية السحب الصحيحة على منع الأخطاء البشرية، ويتيح الجمع مع مجموعة QuantiNova للنسخ العكسي لتخليق الحمض النووي المكمل (cDNA) إمكانية تضمين الحمض النووي الريبوزي الداخلي للتحكم من QuantiNova لمراقبة نجاح النسخ العكسي وتفاعل qPCR.

أداء

متوسط ​​قيم التصوير المقطعي المحوسب
مجموعة كوانتينوفا لتحليل تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR): مجموعة تحليل تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) من المورد L
الكمية بالنانوغرام: 0 ساعة
10: 24.37
1: 27.78
0.1: 31.16
لا يوجد عنصر تحكم في القالب: لم يتم الكشف عنه

هل ترغب بتجربة مجموعة كوانتينوفا SYBR Green PCR لأول مرة؟ اطلب عرض سعر لمجموعة تجريبية.

هل ترغب بتجربة مجموعة QuantiNova Probe PCR Kit لأول مرة؟ اطلب عرض سعر لمجموعة تجريبية.

هل ترغب بتجربة مجموعات QuantiNova Multiplex PCR لأول مرة؟ اطلب عرض سعر لمجموعة تجريبية

مؤشر مرئي مدمج لإعداد رد الفعل بدقة

يحتوي المزيج الرئيسي المرفق مع مجموعات QuantiNova PCR على صبغة زرقاء خاملة لا تتداخل مع تفاعل البوليميراز المتسلسل في الوقت الحقيقي، بل تزيد من وضوحها في الأنبوب أو البئر. يحتوي محلول تخفيف قالب QuantiNova الأصفر على صبغة صفراء خاملة. عند تخفيف الحمض النووي القالب في محلول تخفيف قالب QuantiNova الأصفر وإضافته إلى المزيج الرئيسي، يتغير لون المحلول من الأزرق إلى الأخضر (انظر الشكل "إعداد تفاعل دقيق يُشار إليه بواسطة نظام التحكم المدمج في الماصة")، مما يوفر مؤشرًا مرئيًا على أن كل تفاعل قد تم إعداده بشكل صحيح.

مجموعة كوانتينوفا SYBR Green PCR

تتيح الحساسية العالية لمجموعة QuantiNova SYBR Green PCR Kit الكشف الدقيق والفعال حتى عن نسخة واحدة من الهدف (انظر الشكل "الكشف الفعال والحساس عن الأهداف أحادية النسخة"). وتتحقق هذه الحساسية الفائقة حتى في ظل ظروف دورات التفاعل فائقة السرعة.

يمكن استخدام مجموعة QuantiNova SYBR Green PCR مع نطاق واسع من كميات القالب. وقد تم اختبار أداء هذه المجموعة لتفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي SYBR في الوقت الحقيقي ضمن نطاق ديناميكي يمتد على ثمانية مراتب (من 100 نانوغرام إلى 10 فيمتوغرام من الحمض النووي المكمل)، وبغض النظر عن الجهاز المستخدم، كانت عملية التحديد الكمي دقيقة وموثوقة (انظر الشكل "تحديد كمي دقيق ضمن نطاق ديناميكي واسع").

تُنتج تقنية QuantiNova، بفضل دقتها العالية وحساسيتها الاستثنائية، نتائج مثالية على جهاز QIAGEN Rotor-Gene Q، ولكن يمكن استخدامها على أي جهاز تفاعل البوليميراز المتسلسل في الوقت الحقيقي (PCR)، بغض النظر عن نوعه أو سرعة دوراته أو الحاجة إلى صبغة مرجعية سلبية. يُضاف ROX المرفق مع مجموعة QuantiNova SYBR Green PCR Kit ببساطة إلى المزيج الرئيسي عند الحاجة. تتميز نتائج التضخيم والقياس الكمي باستخدام أجهزة Rotor-Gene Q وAgilent Technologies Mx3005P وApplied Biosystems 7900 HT Fast وViiA 7 وStepOnePlus و7500 Fast وRoche LightCycler 480 وBio-Rad CFX96 بالدقة والحساسية العالية. تُقدم مجموعة QuantiNova SYBR Green PCR Kit نتائج فائقة مقارنةً بمجموعات SYBR Green PCR الأخرى. وبغض النظر عن ظروف دورات التفاعل أو الجهاز المستخدم، تُنتج تقنية QuantiNova قيم CT أقل، وقابلية تكرار أعلى، وكفاءة تفاعل أعلى.

يُوفر مُخفف قالب QuantiNova الأصفر راحة البال أثناء تحضير التفاعل، ولكنه ليس ضروريًا للحصول على نتائج فائقة مع مجموعة QuantiNova SYBR Green PCR. صُممت تقنية QuantiNova لتكون مرنة، بحيث يُمكن دمجها في أي سير عمل مُعتمد. وبالتالي، يكون الأداء مثاليًا مع هدف التضخيم الذي ترغب فيه، وجهازك، ومُخففك المُختار.

مجموعة كوانتينوفا بروبس لتفاعل البوليميراز المتسلسل

يمكن تخزين مزيج تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي (PCR) الخاص بهذه المجموعة عند درجة حرارة 30 درجة مئوية لمدة تصل إلى 100 ساعة دون التأثير على أداء التفاعلات اللاحقة. بفضل ثباته المتميز، حتى بعد التخزين لفترات طويلة في درجة حرارة الغرفة دون استخدام أي عامل تبريد، تُعد مجموعة QuantiNova Probe PCR مثالية لإعداد تفاعلات عالية الإنتاجية ومعالجة الصفائح (انظر الجدول "تأثير التخزين على ثبات التفاعل").

مقارنة قيم العتبة (CT) قبل وبعد التخزين لمدة 100 ساعة عند 30 درجة مئوية. تم تحضين تفاعلات البلمرة المتسلسلة الكمي (PCR) في الوقت الحقيقي، والتي تشمل المزيج الرئيسي، وقالب الحمض النووي المكمل (cDNA)، والبادئات، والمجسات الخاصة بعامل نخر الورم (TNF)، عند 30 درجة مئوية لمدة 100 ساعة، ثم تم تشغيلها في تفاعل البلمرة المتسلسلة الكمي مع تفاعلات مُحضّرة حديثًا. تم اختبار ثلاث نسخ متطابقة من التفاعلات بثلاث كميات مختلفة من القالب. على عكس مجموعة تفاعل البلمرة المتسلسلة للمجسات من المورد L، لم تتغير قيم العتبة (CT) التي توفرها مجموعة تفاعل البلمرة المتسلسلة للمجسات من QuantiNova بعد التخزين المطول للعينات عند 30 درجة مئوية.

تُتيح الحساسية العالية لمجموعة QuantiNova Probe PCR Kit الكشف الدقيق والفعّال حتى عن نسخة واحدة من الهدف (انظر الشكل "الكشف الحساس والفعّال عن نسخة واحدة من الهدف"). يُمكّن المزيج الرئيسي الخاص المُرفق مع هذه المجموعات من تحديد كمية هدفين بدقة، مع اختلاف كبير في وفرتهما، في أنبوب واحد. هذا يوفر الوقت والمال، ويقلل من كمية العينة المطلوبة. علاوة على ذلك، فإن بيانات تفاعل البوليميراز المتسلسل المزدوج (Duplex PCR) المُتحصل عليها تُضاهي تلك المُتحصل عليها من تفاعل البوليميراز المتسلسل الأحادي (Singleplex PCR). يضمن المزيج الفريد من تقنية المحلول المنظم الخاصة بشركة QIAGEN والمُثبتة فعاليتها، إلى جانب بوليميراز الحمض النووي QuantiNova DNA الجديد، وجسم QuantiNova المضاد، وQuantiNova Guard، نجاح تفاعل البوليميراز المتسلسل في الوقت الحقيقي من المحاولة الأولى، دون الحاجة إلى تحسينات مُكلفة ومُستهلكة للوقت، حتى مع فحوصات تفاعل البوليميراز المتسلسل في الوقت الحقيقي الصعبة (انظر الشكل "نتائج فائقة مع الفحوصات الصعبة").

يمكن استخدام مجموعة QuantiNova Probe PCR Kit مع أي جهاز تدوير حراري في الوقت الحقيقي. يُقدّم ROX في أنبوب منفصل، ويمكن إضافته عند استخدام جهاز تدوير حراري يستخدم ROX كصبغة مرجعية سلبية. تُقدّم المجموعة نتائج متسقة للغاية بين مختلف أجهزة التدوير الحراري من حيث الحساسية، وقابلية التكرار، والكفاءة. ويظل اتساق النتائج محفوظًا، على الرغم من اختلاف قدرات التدوير السريع لأجهزة التدوير الحراري المختلفة، مما يؤدي إلى بروتوكولات تدوير حراري مختلفة.

مجموعات كوانتينوفا متعددة التفاعلات البوليميرازية

تتيح الخلطة الرئيسية الخاصة المرفقة مع مجموعات QuantiNova Multiplex PCR إعدادًا سريعًا لتفاعلات متعددة، وتحقق نتائج ناجحة من المحاولة الأولى، مما يوفر بيانات تفاعل البوليميراز المتسلسل المتعدد قابلة للمقارنة مع بيانات تفاعل البوليميراز المتسلسل الأحادي. تستوعب الخلطة الرئيسية عالية التركيز (4x) ما يصل إلى 800 نانوغرام من القالب، مما يضمن حساسية فائقة، حتى في تفاعلات تصل إلى 5 نسخ. تستطيع المجموعة التمييز بوضوح بين الاختلافات الطفيفة في كمية القالب، وتوفر قياسًا دقيقًا للأهداف ذات الوفرة المتباينة على نطاق واسع.

تضمن آلية بدء التفاعل الساخن المبتكرة، المعتمدة على الأجسام المضادة، دقةً فائقةً وتتيح تحضير التفاعل في درجة حرارة الغرفة، مما يجعلها مثاليةً للإجراءات الآلية. يحتوي محلول التفاعل السريع PCR المُصمم خصيصًا على المادة المضافة Q-Bond، التي تُقلل بشكلٍ ملحوظٍ من أوقات التلدين والتمديد، مما يسمح بإجراء تفاعل qPCR متعدد الأهداف في أقل من ساعة. يُساعد التحكم البصري في عملية المعايرة على منع الأخطاء البشرية وزيادة سلامة العملية، خاصةً عند استخدامه مع الحمض النووي الريبوزي الداخلي المُستخدم في مجموعة QuantiNova Reverse Transcription Kit لإجراء تفاعل RT-PCR الكمي ثنائي الخطوات.

تعمل مجموعة QuantiNova Multiplex PCR على زيادة كفاءة سير العمل من خلال توليد المزيد من المعلومات من مواد العينة المحدودة باستخدام تقنية qPCR متعددة فائقة السرعة ومتحكم بها أثناء العملية.

مبدأ

توفر مجموعات QuantiNova PCR تحليلًا دقيقًا للحمض النووي التكميلي (cDNA) أو الحمض النووي الجينومي (gDNA) بفضل آلية بدء ساخنة مبتكرة تعتمد على الأجسام المضادة (انظر الشكل "مبدأ آلية البدء الساخن المبتكرة من QuantiNova"). عند درجات الحرارة المنخفضة، يبقى إنزيم QuantiNova DNA Polymerase في حالة غير نشطة بفضل الأجسام المضادة QuantiNova والمادة المضافة QuantiNova Guard، التي تعمل على تثبيت المركب. يُحسّن هذا من دقة البدء الساخن ويمنع استطالة البادئات غير المرتبطة بشكل نوعي وثنائيات البادئات. في غضون دقيقتين من رفع درجة الحرارة إلى 95 درجة مئوية، يتم فصل الأجسام المضادة QuantiNova وQuantiNova Guard، ويتم تنشيط إنزيم QuantiNova DNA Polymerase، مما يُتيح التضخيم.

بالإضافة إلى ذلك، تتضمن تقنية QuantiNova ميزات تُبسط سير عملك دون المساس بحساسية وكفاءة تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR). تعمل الأصباغ الخاملة في المزيج الرئيسي وفي محلول التخفيف الأصفر QuantiNova كمؤشر مرئي على إعداد كل تفاعل بشكل صحيح. يزيد اللون الأزرق للمزيج الرئيسي من وضوح محتويات وعاء التفاعل، ويتحول إلى اللون الأخضر عند إضافة الأحماض النووية القالبية المخففة في محلول التخفيف الأصفر QuantiNova (انظر الشكل "إعداد تفاعل دقيق مُشار إليه بواسطة أداة التحكم المدمجة في الماصة"). تعمل التركيبة الفريدة لمحلول PCR المُضمن في مجموعات QuantiNova SYBR PCR على تعزيز دقة آلية البدء الساخن وتقصير خطوات التدوير، مما يُسرّع عملية تفاعل PCR ويزيد من إنتاجيتك.

توفر مجموعات QuantiNova Multiplex PCR نتائج عالية الحساسية وسريعة ضمن نطاق ديناميكي واسع على كل من أجهزة التدوير القياسية والسريعة دون الحاجة إلى تحسين. يحتوي محلول PCR السريع المُطور خصيصًا على المادة المضافة Q-Bond، التي تُقلل بشكل كبير من أوقات التلدين والاستطالة (انظر الشكل "تلدين البادئات السريع").

يُحسّن تضخيم الجينات المرجعية والمستهدفة في تفاعل واحد، بدلاً من تفاعلات منفصلة، ​​من دقة قياس كمية الجينات بتقليل أخطاء المعالجة. إضافةً إلى ذلك، يمكن استخدام الحمض النووي الريبوزي (RNA) للتحكم الداخلي، المُرفق مع مجموعة QuantiNova للنسخ العكسي، والمُخصصة لتفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي ثنائي الخطوات (RT-PCR)، لمراقبة نجاح عملية النسخ العكسي وتفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي (qPCR).

يحتوي محلول QuantiNova Multiplex PCR Buffer على مزيج متوازن من أيونات البوتاسيوم (K+) والأمونيوم (NH4+)، بالإضافة إلى العامل الاصطناعي الفريد MP، الذي يُعزز معًا ارتباطًا مستقرًا وفعالًا للبادئات والمجسات بقالب الحمض النووي، مما يُتيح كفاءة عالية في تفاعل البلمرة المتسلسل (انظر الشكل "محلول PCR متعدد فريد يُعزز ارتباطًا مستقرًا وفعالًا"). يُمكن تخزين المزيج الرئيسي لمجموعة QuantiNova Multiplex PCR Kit بسهولة في درجة حرارة تتراوح بين 2 و8 درجات مئوية لمدة تصل إلى 12 شهرًا، كما أن إعداد التفاعل مستقر للغاية في درجة حرارة الغرفة، مما يسمح بإجراء عمليات آلية لزيادة الكفاءة والدقة.

إجراء

تحتوي مجموعات QuantiNova PCR على مزيج رئيسي جاهز للاستخدام، مما يُغني عن الحاجة إلى تحسين ظروف التفاعل والدورات. ما عليك سوى إضافة قالب الحمض النووي الجينومي (gDNA) أو الحمض النووي المكمل (cDNA) مع البادئات (للكشف باستخدام صبغة SYBR Green)، أو قالب الحمض النووي الجينومي (gDNA) أو الحمض النووي المكمل (cDNA) مع البادئات والمجسات (للكشف باستخدام المجسات) إلى المزيج الرئيسي، ثم اتباع البروتوكول الموضح في دليل المستخدم للحصول على نتائج سريعة وموثوقة على أي جهاز تضخيم متسلسل في الوقت الحقيقي. يُقدم صبغ ROX المرجعي السلبي في أنبوب منفصل، ويمكن تعديل تركيزه حسب نوع جهاز التضخيم المستخدم. بالتالي، يمكن استخدام مجموعات QuantiNova PCR على أي جهاز تضخيم متسلسل في الوقت الحقيقي تقريبًا، بغض النظر عن نوعه أو ظروف دوراته. وبفضل تركيزات ROX المُحسّنة، يُمكن الكشف حتى عن أعداد النسخ المنخفضة من خلال التحليل التلقائي للبيانات.

تحتوي مجموعات QuantiNova Multiplex PCR على مزيج رئيسي جاهز للاستخدام بتركيز 4x، مما يُغني عن الحاجة إلى ضبط ظروف التفاعل والدوران. ما عليك سوى إضافة ما يصل إلى 800 نانوغرام من الحمض النووي القالب ومجموعات البادئات والمجسات إلى المزيج الرئيسي، واتباع البروتوكول الوارد في دليل المستخدم للحصول على نتائج سريعة وموثوقة على أي جهاز تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي. توفر المجموعات صبغة ROX المرجعية السلبية في أنبوب منفصل، لضبط تركيز ROX المناسب، إذا لزم الأمر لجهازك.

للحصول على أفضل النتائج في تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي ثنائي الخطوات في الوقت الحقيقي، نوصي بتخليق الحمض النووي التكميلي (cDNA) باستخدام مجموعة QuantiNova للنسخ العكسي، التي توفر تخليقًا سريعًا للحمض النووي التكميلي في غضون 20 دقيقة فقط مع إزالة متكاملة لتلوث الحمض النووي الجينومي. كما توفر المجموعة أيضًا الحمض النووي الريبوزي (RNA) للتحكم الداخلي من QuantiNova، مما يتيح مراقبة عملية النسخ العكسي وتفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي أثناء التنفيذ.

لتبسيط سير العمل، نوصي بدمج مجموعات QuantiNova مع فحوصات أو لوحات QuantiNova المصممة مسبقًا بتقنية تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي في الوقت الحقيقي. توفر هذه المجموعات قياسًا دقيقًا لنسخ mRNA أو نسخ RNA الطويلة غير المشفرة، بغض النظر عن وفرتها. اختر من بين مجموعة واسعة من مجموعات البادئات المصممة مسبقًا للإنسان والفأر والجرذ، أو صمم فحوصاتك ولوحاتك الخاصة باستخدام أدوات التصميم المتقدمة لدينا.

تستخدم فحوصات QuantiNova LNA PCR و QuantiNova LNA Probe PCR تقنية LNA لزيادة الحساسية، مما يتيح الحصول على ملفات تعريف غير متحيزة للتعبير الجيني ورؤى علمية أسرع.

التطبيقات

يمكن استخدام مجموعة QuantiNova SYBR Green PCR لتحليل التعبير الجيني لأهداف cDNA باستخدام تقنية SYBR Green، ولتحليل الحمض النووي الجينومي الكمي (gDNA) على أي جهاز تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي في الوقت الحقيقي. يشمل ذلك أجهزة من شركات Applied Biosystems وBio-Rad وCepheid وEppendorf وLIFE Technologies وRoche وAgilent، بالإضافة إلى جهاز Rotor-Gene Q.

يمكن استخدام مجموعات QuantiNova Probe PCR لتحليل التعبير الجيني القائم على المجسات لأهداف الحمض النووي التكميلي (cDNA) والتحليل الكمي للحمض النووي الجينومي (gDNA) على أي جهاز تضخيم متسلسل في الوقت الحقيقي. ويشمل ذلك أجهزة من شركات Applied Biosystems وBio-Rad وCepheid وEppendorf وRoche وAgilent.

يمكن استخدام مجموعات QuantiNova Multiplex PCR لتحليل التعبير الجيني المتعدد لأهداف cDNA أو gDNA على أي جهاز تضخيم متسلسل في الوقت الحقيقي. وللاستفادة القصوى من مزايا التحليل المتعدد، نوصي باستخدام أجهزة تدعم ما يصل إلى 5 تحليلات، مثل جهاز Rotor-Gene Q.