كياجين، 223213، مجموعة QIAprep و Plasmodium

مجموعة QIAprep& Plasmodium Kit هي مزيج رئيسي لتفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي (qPCR) للكشف المباشر عن طفيل البلازموديوم في عينات الدم السائلة أو في عينات بقع الدم المجففة بحساسية 1 طفيل/ميكرولتر؛ لـ 100 تفاعل

سمات

- يكشف عن الحمض النووي للبلازموديوم مباشرة من بقع الدم المجففة أو الدم الكامل، مما يوفر الوقت وتكاليف الكواشف
- تتيح فحوصات تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي المتعدد التمييز بين الأنواع (P. falciparum، P. vivax، P. malariae، P. ovale و P. knowlesi)
- حساسية عالية، حيث يمكنها الكشف عن عدد منخفض يصل إلى طفيلي واحد/ميكرولتر
- متوافق مع معظم أجهزة تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي في الوقت الحقيقي

تفاصيل المنتج

تُسهّل مجموعة QIAprep& Plasmodium عملية الكشف عن طفيل البلازموديوم باستخدام تقنية تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي المباشر (qPCR). يستطيع الباحثون تحليل عينات الدم المجففة أو الدم الكامل مباشرةً، مما يقلل من وقت العمل اليدوي وتكاليف الكواشف. تُمكّن هذه المجموعة من الكشف عن البلازموديوم بحساسية عالية تصل إلى طفيل واحد لكل ميكرولتر، وهو أمر بالغ الأهمية لمراقبة الملاريا والبحوث الوبائية.

إلى جانب فحوصات QIAprep و Plasmodium، يتم التمييز بين أنواع Plasmodium (P. falciparum مقابل غير falciparum للكشف عن P. vivax و P. malariae و P. ovale و P. knowlesi) في تفاعل واحد بتنسيق متعدد.

هل ترغب بمعرفة المزيد عن المنتج من أحد خبرائنا؟ تواصل معنا، وسنتصل بك قريباً.

أداء

معدل نجاح QIAprep: معدل نجاح استخلاص الحمض النووي التقليدي متبوعًا بتقنية تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR)
بطاقة بقعة الدم: بطاقة كلاسيكية
العينات: التخفيف
ثقافة المتصورة المنجلية​: 1:100​
1:1000: 7.9
1:10,000: 0.8
1:100,000: 0.08
العينة أ: 1:100
1:1000: 16.3
1:10,000: 1.6
1:100,000: 0.16
العينة ب: 1:100
1:1000: 16.0
1:10000: 1.6
1:100,000: 0.16

تتيح مجموعة QIAprep& Plasmodium إجراء تحليل qPCR سريع، مع ظهور النتائج في غضون ساعة إلى ساعة ونصف. توفر هذه المجموعة حساسية مماثلة أو أفضل من طرق استخلاص الحمض النووي التقليدية، حيث تكشف عن وجود طفيل واحد لكل ميكرولتر. يتميز سير العمل بالمتانة مع مختلف أنواع العينات، ويتوافق مع أنظمة qPCR الشائعة في الوقت الحقيقي.

تم تخفيف مزرعة طفيل الملاريا المتصورة المنجلية وعينتين بشريتين (العينتان أ و ب) بدم خالٍ من المتصورة. استُخلص الحمض النووي باستخدام مجموعة QIAamp® DNA Blood Mini Kit، وقُيِّمَت نسبة التطفل باستخدام تفاعل البوليميراز المتسلسل الرقمي (PCR) مع مجموعة QIAcuity® Probe PCR Kit على منصة QIAcuity Four. بالنسبة لخطوات العمل الخاصة ببقع الدم المجففة (DBS)، وُضِعَ 75 ميكرولتر من العينات المخففة على بطاقة QIAcard Bloodstain أو البطاقة الكلاسيكية، وجُفِّفَت لمدة 24 ساعة. اتبعت أربع خطوات عمل (الدم الكامل، التخدير، DBS المباشر، وDBS المُستخلص) بروتوكولات الدليل باستخدام فحص الكشف عن المتصورة المنجلية/غير المتصورة المنجلية. سُجِّلَت معدلات النجاح (DBS المباشر N=6؛ خطوات عمل الحمض النووي الكلاسيكية N=4؛ جميع الخطوات الأخرى N=8)، مع تشغيل جميع العينات على أجهزة Bio-Rad® CFX96™ أو CFX384. (WF = خطوة العمل)

مبدأ

تدمج هذه المجموعة معالجة العينات المباشرة مع تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي (qPCR) للكشف عن أنواع المتصورة. بالنسبة للدم الكامل، تُحرر معالجة حرارية قصيرة الأحماض النووية. يمكن استخدام بقع الدم المجففة مباشرةً في التفاعل أو إخضاعها لمعالجة بسيطة لاستخلاص المادة المذابة لاستخدامها في عدة تفاعلات qPCR بحساسية أعلى. هذه المجموعة مناسبة للفحوصات التي تكشف عن الحمض النووي للمتصورة بدقة عالية وتميز بين المتصورة المنجلية والأنواع الأخرى. يتيح فحص ثانٍ مزيدًا من التمييز بين الأنواع (المتصورة النشيطة، والمتصورة الملاريا، والمتصورة البيضاوية، والمتصورة النولسية). يتوفر الفحصان بشكل منفصل ويمكن استخدامهما منفردين أو معًا.

إجراء

مثال: نتائج أسرع بخطوات أقل
بقع الدم المجففة (DBS): سير العمل المباشر لبقع الدم المجففة
الدم الكامل: سير عمل الدم الكامل

- دم كامل طازج
- دم كامل مجمد
- بقع دم جافة من الدم الكامل
- بقع دم جافة من وخز الإصبع

- بطاقة QIAcard Bloodstain (رقم الصنف WB100014) أو بطاقة QIAcard FTA Classic (رقم الصنف WB 120205 أو WB120305) أو بطاقات فلتر Whatman
- مثقب، مثل مثقب UniCore Punch 1.2 مم لتقنية DBS المباشرة (رقم المنتج WB100074)، أو مثقب 3 مم لتقنية DBS Elution (رقم المنتج WB100078) أو مثاقب مماثلة
- حصيرة تقطيع (رقم الصنف WB100088)

تُعدّ مجموعة QIAprep& Plasmodium مناسبة لعينات الدم الكامل وبقع الدم المجففة (DBS) كمادة أولية. يتوفر مساران للعمل لكل نوع من أنواع العينات: فائق السرعة وفائق الحساسية.

الجدول 1. اختيار سير العمل المناسب وفقًا لنوع العينة ومتطلبات العملية

تحضير العينة

صُممت مجموعة QIAprep& Plasmodium الجديدة للاستخدام مع عينات الدم الكامل (مثل عينات EDTA، والسترات، والهيبارين) وبقع الدم المجففة. تشمل أنواع العينات المناسبة ما يلي:

تتيح تقنية QIAprep& Plasmodium Kit استخدام 20% من الدم في تفاعل PCR.

يُقدّم مساران للعمل لكل نوع من أنواع العينات (الدم الكامل أو عينات الدم الجافة). يوفر أحد المسارين نتائج فائقة السرعة بخطوات قليلة. بينما يوفر المسار البديل حساسية فائقة بخطوات معالجة أقل (انظر الجدول 1).

إعداد تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي (qPCR)

امزج مزيج QIAprep& الرئيسي مع العينة ومزيج التحليل. ضع التفاعل على صفيحة أو أنبوب تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) ثم ضعه في جهاز التدوير الحراري. لمزيد من المعلومات، راجع بروتوكول البدء السريع أو دليل المنتج.

ركوب الدراجات والكشف

قم بتشغيل تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي في الوقت الحقيقي. بمجرد اكتمال التشغيل، قم بتحليل النتائج باستخدام برنامج جهاز التدوير الحراري المناسب.

للحصول على بقع دم جافة، نوصي بما يلي:

التطبيقات

- مراقبة الملاريا والدراسات الوبائية
- الكشف عن طفيل البلازموديوم في مختبرات الأبحاث
- تحديد أنواع البلازموديوم في مختبرات الأبحاث
- دراسات ميدانية تتطلب تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي السريع والحساس والخالي من الاستخلاص