Qiagen، 249915، QuantiNova LNA Probe PCR Custom Assay (200)

مزيج بادئات ومجسات مخصصة لـ mRNA/lncRNA في أنبوب واحد؛ يكفي لـ 200 تفاعل باستخدام qRT-PCR ثنائي الخطوات أو 100 تفاعل باستخدام qRT-PCR أحادي الخطوة

سمات

- فحوصات عالية الأداء تم إنشاؤها باستخدام أداة تصميم ملائمة ونفس الخوارزمية المستخدمة في فحوصاتنا المصممة مسبقًا
- فحوصات مخصصة لتناسب هدفك واحتياجاتك بدقة، بما في ذلك الكشف عن نسخ جديدة أو شكل متغاير أو متغير تضفير محدد
- القدرة على تقديم ما يصل إلى 10 تسلسلات وتصميم فحوصات للتمييز بين جميع التسلسلات أو الكشف عنها.
- بادئات ومسبارات قصيرة معززة بتقنية LNA تتميز بخصوصية عالية ومرونة أكبر في تحديد موضع الفحص
- نتائج قوية وقابلة للتكرار في أقل من ساعتين باستخدام مجموعة QuantiNova Probe PCR

تفاصيل المنتج

توفر فحوصات QuantiNova LNA Probe PCR المخصصة تحليلًا دقيقًا وحساسًا للتعبير الجيني لأي هدف من الحمض النووي الريبوزي (RNA) باستخدام الكشف القائم على مسبار التحلل المائي والمعزز بتقنية LNA. تدعم خوارزمية التصميم القوية لدينا قاعدة بيانات Ensembl بالكامل لأهداف الإنسان والفأر والجرذ، مما يُبسط عملية إنشاء الفحوصات. تُعد الفحوصات المخصصة مناسبة تمامًا للأهداف التي لا تتوفر لها فحوصات مُصممة مسبقًا، وللتمييز بين المتغيرات الناتجة عن التضفير، وللتحقق من الحمض النووي الريبوزي الرسول (mRNA) أو الحمض النووي الريبوزي غير المشفر الطويل (lncRNA) الجديد. بفضل تقنية QuantiNova المُحسّنة، يُمكن إكمال سير عمل QuantiNova LNA Probe PCR البسيط في أقل من ساعتين، وهو قوي بما يكفي لدعم الإعداد في درجة حرارة الغرفة، والتشغيل الآلي، والتشغيل المؤجل للفحوصات. تتوفر أيضًا فحوصات مُصممة مسبقًا، ولوحات مُركزة على المسارات، ولوحات مخصصة، ويمكن استخدامها معًا في نفس الإعداد التجريبي.

هل تحتاج إلى عرض سعر لمشروعك البحثي أو ترغب في مناقشة مشروعك مع فريقنا المتخصص؟ تواصل معنا الآن!

أداء

تفاعل البوليميراز المتسلسل المحسن بتقنية LNA عالي الحساسية والنوعية

تم تصميم فحوصات QuantiNova LNA Probe PCR المخصصة باستخدام معايير تصميم صارمة وخوارزميات تم التحقق من صحتها في المختبر لتقديم أعلى مستوى من الخصوصية والكفاءة في تفاعل البوليميراز المتسلسل في الوقت الحقيقي، بالإضافة إلى نتائج تحليل التعبير الجيني الأكثر موثوقية ودقة.

تزيد قوة ارتباط قواعد LNA العالية من مرونة وضع البادئات والمجسات على النسخة، مما يسمح لنا باستخدام التموضع الذكي لتصميم فحوصات لأهداف يصعب تحليلها. وهذا يوفر تمييزًا أفضل للأهداف وقياسًا كميًا دقيقًا وموثوقًا، حتى بالنسبة للأهداف الغنية بـ AU، والنسخ منخفضة الوفرة، والأهداف ذات البنية الثانوية العالية، والعينات شديدة التعقيد.

تضمن الحساسية العالية لهذه المقايسات كفاءة تضخيم ممتازة حتى مع جزيء RNA واحد، مما يُسهّل عليك اكتشاف الأهداف منخفضة الوفرة، مثل lncRNAs، من كمية أقل من المادة الأولية (انظر الشكل). توفر مقايسات QuantiNova LNA Probe PCR قياسًا كميًا دقيقًا وحساسًا وخطيًا للأهداف عبر نطاق ديناميكي واسع، وتُمكّن من الكشف عن mRNA عالي التعبير ومنخفض التعبير. كما تُوفر الخصوصية المُحسّنة الناتجة عن التموضع الذكي لـ LNA نسبة إشارة إلى ضوضاء عالية، مما يسمح بالتمييز بين التسلسلات التي تختلف بنوكليوتيد واحد فقط، ويُزيل التضخيم غير النوعي وتكوين ثنائيات البادئات.

تم إنشاؤه باستخدام خوارزمية تصميم مضخم منخفض الضوضاء متطورة

بفضل خبرتنا الممتدة لعشرين عامًا في تصميم مضخمات الحمض النووي (LNA)، تمكّنا من تطوير وتحسين خوارزمية تصميم مضخمات الحمض النووي المتطورة لدينا، والتي تتضمن أكثر من 50 معيارًا مختلفًا - تم التحقق من صحتها جميعًا في المختبر وفقًا لمعايير أداء صارمة للغاية - لضمان الحصول على أفضل اختبار للكشف الناجح عن الهدف. وقد استُخدمت هذه الخوارزمية الخاصة لتصميم أكثر من 1.3 مليون اختبار، وهي متاحة لتلبية طلباتكم الخاصة من خلال أداة إنشاء الاختبارات المخصصة سهلة الاستخدام في GeneGlobe.

مبدأ

عملية التصميم حسب الطلب

تتيح لك أداة تصميم فحوصات تفاعل البوليميراز المتسلسل المخصصة بتقنية LNA Probe من QuantiNova تصميم فحوصات تفاعل البوليميراز المتسلسل عالية الحساسية والنوعية والمعززة بتقنية LNA بسهولة لأي mRNA أو lncRNA غير متوفر كفحص مصمم مسبقًا. باستخدام خوارزمية تصميم فحوصات تفاعل البوليميراز المتسلسل المتقدمة من QuantiNova، يتم تقييم العديد من تركيبات الفحوصات بناءً على أكثر من 50 معيارًا مختلفًا للعثور على الفحص الأمثل لهدفك في غضون دقائق معدودة. صُممت الأداة لأهداف mRNA وlncRNA البشرية والفأرية والجرذية التي لا يقل طولها عن 55 نيوكليوتيدًا، وتُجري بحثًا برمجيًا (BLAST) في قواعد البيانات ذات الصلة بالأنواع، بما في ذلك Ensembl وRefSeq. بالنسبة للأهداف الجينية المعروفة، تُصمم الفحوصات افتراضيًا بحيث تغطي الإنترونات، على غرار الفحوصات المصممة مسبقًا، لمنع خطر تضخيم الحمض النووي الجينومي.

خيارات تصميم فحص متطورة وفريدة من نوعها

تتضمن أداة تصميم المقايسات المخصصة خيارات لإنشاء تصميمات خاصة بالنسخ الجينية للتمييز بين المتغيرات الناتجة عن التضفير، أو تعدد أشكال النوكليوتيدات المفردة، أو الأشكال المتغايرة. كما يمكن إنشاء تصميمات لمقايسات مشتركة بين جميع متغيرات النسخ الجينية. يمكنك إدخال ما يصل إلى 10 تسلسلات مستهدفة مختلفة في وقت واحد، وتصميم إما 10 مقايسات مختلفة، أو تصميم مقايسة مشتركة لجميع النسخ الجينية ذات الصلة.

ملاحظة: يمكن الوصول إلى الإصدار التجريبي لأداة التصميم المخصصة في GeneGlobe، ولكن قد لا تتوفر بعض الوظائف. سيتم إصدار النسخة الكاملة قريبًا. إذا كنت بحاجة إلى مساعدة فورية بخصوص طلب التصميم المتقدم، يُرجى التواصل مع فريقنا المتخصص.

الكشف القوي وعالي الأداء القائم على مسبار التحلل المائي

تستخدم فحوصات QuantiNova LNA Probe PCR تقنية الكشف القائمة على مجسات التحلل المائي الموسومة بـ FAM، وهي تقنية عالية الحساسية والدقة، لأنها تكشف فقط عن ناتج تفاعل البوليميراز المتسلسل المطلوب. مع ذلك، لا يزال الكشف القائم على المجسات يتطلب دقة عالية في تفاعل البوليميراز المتسلسل لمنع حدوث تشوهات في التضخيم، مثل نواتج تفاعل البوليميراز المتسلسل غير النوعية وثنائيات البادئات التي قد تتنافس على مكونات التفاعل وتؤثر سلبًا على الأداء. ولكننا قمنا بتحسين نظام QuantiNova LNA Probe PCR خصيصًا لكم للتخلص من التضخيم غير النوعي، ولضمان دقة وحساسية الكشف في كل مرة.

يمكن دمج فحوصات الجينات المرجعية بسهولة مع الفحوصات المخصصة.

تتوفر مجموعة واسعة من فحوصات الجينات المرجعية للإنسان والفأر والجرذ لتمكين توحيد البيانات بجودة عالية وضمان نتائج موثوقة. تستهدف هذه الفحوصات جزيئات الحمض النووي الريبوزي المشفر الداخلي، والحمض النووي الريبوزي الطويل غير المشفر، وجزيئات الحمض النووي الريبوزي النووي الصغير، والتي تُعبر عنها عادةً بشكل دائم في مجموعة متنوعة من الأنسجة. فحوصات الجينات المرجعية موسومة بـ FAM، وقد تم التحقق من صحتها وظيفيًا كجينات مرجعية لنظام QuantiNova LNA PCR، وتعمل بكفاءة مثالية مع كواشف QuantiNova RT وPCR.

تطبيع نتائج تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي للـ mRNA/lncRNA

تُزيل عملية التوحيد التباين التقني والبيولوجي بين العينات غير المرتبط بالتغيرات البيولوجية قيد الدراسة. ويُعدّ التوحيد الصحيح أمراً بالغ الأهمية لتحليل وتفسير نتائج تجارب تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي (PCR) في الوقت الحقيقي بشكل سليم. وفي أغلب الأحيان، تُستخدم جينات مرجعية مستقرة التعبير لأغراض التوحيد.

يُنصح عمومًا باختبار عدة جينات مرجعية داخلية مُرشحة قبل البدء بتحليل التعبير الجيني الفعلي للـ mRNA/lncRNA. يجب اختيار هذه الجينات من بين الجينات المتوقع أن يكون تعبيرها ثابتًا في جميع العينات قيد الدراسة. يمكن أن تكون هذه الجينات عبارة عن mRNAs أو lncRNAs ذات تعبير ثابت، يتم اختيارها بناءً على الدراسات المنشورة أو البيانات الموجودة مسبقًا (مثل فحص لوحات NGS أو qPCR). يوفر نظام QuantiNova LNA PCR فحوصات جينية مرجعية مُعتمدة للـ RNAs التي تميل إلى أن يكون تعبيرها ثابتًا، وبالتالي فهي مرشحة جيدة كجينات مرجعية.

ينبغي التحقق تجريبياً من جميع الجينات المرجعية المرشحة لكل دراسة. أحد الخيارات المتاحة لتطبيع لوحة تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) عند تحليل عدد كبير من الحمض النووي الريبوزي الرسول (mRNA) والحمض النووي الريبوزي غير المشفر الطويل (lncRNA) هو التطبيع مقابل المتوسط ​​العام - أي متوسط ​​جميع الحمض النووي الريبوزي الرسول (mRNA) والحمض النووي الريبوزي غير المشفر الطويل (lncRNA) المُعبر عنه. يُعد هذا خياراً جيداً في العينات ذات معدل الاستدعاء العالي (الجينات المُعبر عنها)، ولكن يجب استخدامه بحذر في العينات ذات معدلات الاستدعاء المنخفضة. كما أنه ليس خياراً جيداً في العينات التي يتغير فيها مستوى التعبير الجيني العام. يمكن الاطلاع على المزيد من الإرشادات حول التطبيع في مركز تحليل بيانات GeneGlobe.

تحليل البيانات سهل الاستخدام

تتضمن أداة تحليل البيانات المجانية القائمة على الويب في مركز تحليل البيانات GeneGlobe معالجًا سهل الاستخدام لإرشادك خطوة بخطوة خلال عملية توحيد وتحليل بياناتك وإنشاء أشكال نتائج جاهزة للنشر.

إجراء

- فحوصات تفاعل البوليميراز المتسلسل باستخدام مسبار LNA من QuantiNova
- فحوصات QuantiNova LNA Probe PCR المرجعية
- فحوصات QuantiNova LNA Probe PCR المخصصة
- لوحات التركيز على تفاعل البوليميراز المتسلسل باستخدام مجسات LNA من QuantiNova
- لوحات QuantiNova LNA Probe PCR lncRNA Focus Panels
- لوحات QuantiNova LNA Probe PCR المخصصة
- لوحات QuantiNova LNA Probe PCR المرنة

كيمياء كوانتينوفا الموثوقة

صُممت فحوصات QuantiNova LNA Probe PCR المخصصة باستخدام تقنية QuantiNova عالية الأداء والمُجرَّبة، والتي تتيح لك الاختيار بين تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي في الوقت الحقيقي (qRT-PCR) بخطوة واحدة أو خطوتين. وتُحقق أفضل النتائج عند إجراء النسخ العكسي باستخدام مجموعة QuantiNova للنسخ العكسي. ثم يُقاس الحمض النووي التكميلي الناتج (cDNA) بواسطة تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي (qPCR) باستخدام الخلطات الرئيسية لمجموعة QuantiNova Probe PCR مع فحص QuantiNova LNA Probe PCR المخصص الذي صممته.

لإجراء تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي في خطوة واحدة (qRT-PCR)، نوصي باستخدام مجموعة QuantiNova Probe RT-PCR Kit، التي توفر إعدادًا سريعًا للتفاعل دون الحاجة إلى تحسين ظروف التفاعل. ما عليك سوى إضافة البادئات والمسبار وقالب الحمض النووي الريبي إلى مزيج التفاعل الرئيسي الجاهز للاستخدام، ثم ابدأ التفاعل.

سير عمل سريع وسهل

يمكن إتمام سير العمل السريع والسهل في أقل من ساعتين بأقل قدر من التدخل اليدوي، كما يمكن أتمتته لتوفير المزيد من الوقت والجهد. تم اختبار البروتوكول البسيط للتأكد من توافقه مع جميع أجهزة التدوير الحراري qPCR من العلامات التجارية الرئيسية (انظر الشكل: توفر فحوصات QuantiNova LNA Probe PCR أداءً متسقًا على جميع أجهزة التدوير الحراري). علاوة على ذلك، يمكن استخدام الحمض النووي التكميلي (cDNA) الناتج في خطوة النسخ العكسي (RT) في جميع أنحاء نظام QuantiNova LNA Probe PCR، مما يسمح بالانتقال السلس من الفحوصات إلى اللوحات حسب احتياجات بحثك، موفرًا لك الوقت والعينات.

ما تحتاجه للبدء باستخدام نظام QuantiNova LNA Probe PCR

النسخ العكسي: مجموعة كوانتينوفا للنسخ العكسي

مزيج تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي (qPCR): مجموعة كوانتينوفا لتفاعل البوليميراز المتسلسل (QuantiNova Pro

تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي في الوقت الحقيقي بخطوة واحدة (اختياري): مجموعة كوانتينوفا بروبس لتفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي في الوقت الحقيقي

الاختبارات أو اللوحات:

التطبيقات

- تحليل وتحديد وقياس التعبير الجيني للـ mRNA و lncRNA
- التحقق من صحة بيانات التعبير الجيني بتقنية تسلسل الحمض النووي الريبوزي (RNA-seq).
- تحليل التعبير الجيني
- تحليل الإشارات والمسارات
- تأكيد تثبيط التعبير الجيني بواسطة LNA GapmeRs أو siRNAs
- تطوير المؤشرات الحيوية، بما في ذلك فحص وتحديد والتحقق من صحة المؤشرات الحيوية المرتبطة بالأمراض
- رصد التغيرات الظاهرية المرتبطة بالتعبير الجيني

تُعدّ فحوصات QuantiNova LNA Probe PCR المخصصة مناسبة للغاية للتطبيقات التي تشمل ما يلي:

يمكن أيضًا استخدام العديد من الاختبارات لفحص مجموعة محددة من الجينات.