Qiagen، 249921، QuantiNova LNA PCR Reference Assay (750)

مزيج بادئات فحص الجينات المرجعية المصمم مسبقًا في أنبوب واحد؛ لـ 750 تفاعل qPCR أو 1500 تفاعل dPCR

سمات

- يوفر أكثر من 1.3 مليون اختبار تغطية واسعة النطاق وأفضلها لنسخ mRNA وlncRNA البشرية والفأرية والجرذية في Ensembl
- حساسية ونوعية استثنائية باستخدام بادئات قصيرة معززة بتقنية LNA
- كشف دقيق ضمن نطاق ديناميكي واسع يبدأ من نسخة واحدة من الحمض النووي الريبي
- مُحسَّن للقضاء على التضخيم غير المحدد
- نتائج قوية وقابلة للتكرار في غضون ساعتين باستخدام كواشف QuantiNova SYBR® Green PCR

تفاصيل المنتج

تُرسّخ فحوصات QuantiNova LNA PCR معايير جديدة في تحليل التعبير الجيني بتقنية qPCR القائمة على SYBR® Green. اختر من بين مجموعة واسعة من الفحوصات المصممة مسبقًا للكشف الدقيق والحساس عن أي mRNA أو lncRNA بشري أو فأري أو جرذي - بدءًا من الكشف العام عن النسخ الجينية وصولًا إلى التمييز بين أشكال النسخ الجينية المحددة. يُمكّننا تحسين LNA من تصميم بادئات أقصر، ما يُتيح مرونة أكبر في تحديد موقعها على الهدف. ونتيجةً لذلك، يُمكننا تحسين تصميماتنا للكشف عن نسخ جينية محددة أو التمييز بين الأهداف. بالإضافة إلى ذلك، يضمن التحقق الشامل من التصميم الأداء الأمثل والكشف القوي، وتخضع الفحوصات لجميع أنواع mRNA وlncRNA الشائعة للتحقق في المختبر. بفضل تحسينها باستخدام كواشف QuantiNova RT وSYBR® Green، يُمكن إكمال سير عمل QuantiNova LNA PCR البسيط في غضون ساعتين فقط، وهو قوي بما يكفي لدعم الإعداد في درجة حرارة الغرفة، والتشغيل الآلي، وتأخير تشغيل الفحوصات.

هل تخطط لاستخدام فحوصات QuantiNova LNA PCR لتحليل تفاعل البوليميراز الرقمي (dPCR)؟ يمكنك العثور على تفاصيل المنتج والأداء الخاصة بـ dPCR على صفحة كتالوج dPCR المخصصة.

هل تحتاج إلى عرض سعر لمشروعك البحثي أو ترغب في مناقشة مشروعك مع فريقنا المتخصص؟ تواصل معنا الآن!

أداء

يعزز LNA أداء qPCR

طُوِّرت فحوصات QuantiNova LNA PCR باستخدام معايير تصميم صارمة وخوارزميات مُعتمَدة مخبريًا. تضمن عملية اختيار الفحص الدقيقة أن تُقدِّم كل مجموعة من البادئات أعلى درجات الخصوصية والكفاءة للحصول على نتائج موثوقة ودقيقة. يُعطي توحيد درجة حرارة الانصهار (Tm) وتعزيز LNA البادئات ألفة ارتباط أعلى من بادئات الحمض النووي القياسية، مما يزيد بشكل كبير من حساسية الفحص وخصوصيته.

تضمن هذه الحساسية المتزايدة كفاءة تضخيم ممتازة حتى مع جزيء RNA واحد، مما يُسهّل عليك اكتشاف الأهداف منخفضة الوفرة، مثل lncRNAs، من كمية أقل من المادة الأولية (انظر الشكل). توفر فحوصات QuantiNova LNA PCR قياسًا كميًا دقيقًا وحساسًا وخطيًا للأهداف عبر نطاق ديناميكي واسع، وتُمكّن فحوصات QuantiNova LNA PCR من الكشف عن mRNA عالي التعبير ومنخفض التعبير. تمنحك الخصوصية المتزايدة الناتجة عن التموضع الذكي لـ LNA نسبة إشارة إلى ضوضاء عالية، مما يسمح بالتمييز بين التسلسلات التي تختلف بنوكليوتيد واحد فقط، ويقضي على التضخيم غير المحدد وتكوين ثنائيات البادئات.

تزيد قوة ارتباط قواعد LNA العالية من مرونة وضع البادئات على النسخة، مما يُمكّننا من استخدام التموضع الذكي لتصميم فحوصات لأهداف يصعب تحليلها. وهذا يُتيح تمييزًا أفضل للأهداف وقياسًا كميًا موثوقًا، حتى بالنسبة للأهداف الغنية بـ AU، والنسخ منخفضة الوفرة، والأهداف ذات البنية الثانوية العالية، والعينات شديدة التعقيد.

مُحسَّن باستخدام كواشف QuantiNova SYBR® Green PCR

طُوِّرت فحوصات QuantiNova LNA PCR لتحقيق أفضل النتائج وأعلى مستوى من التكرارية عند استخدامها مع كواشف QuantiNova SYBR® Green PCR (انظر الشكل: التكرارية المُثبتة بين الدفعات). بالنسبة لفحص qRT-PCR أحادي الخطوة، يتضمن ذلك مجموعة QuantiNova SYBR® Green RT-PCR. أما بالنسبة لفحص qRT-PCR ثنائي الخطوة، فيتضمن ذلك مجموعات QuantiNova للنسخ العكسي ومجموعات QuantiNova SYBR® Green PCR.

تُمكّن آلية التشغيل السريع من QuantiNova من إجراء تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي (qPCR) بنجاح، حتى مع القوالب الصعبة، مثل تلك ذات المحتوى العالي من GC أو البنية الثانوية المعقدة - وهي مثالية لتحليل الحمض النووي الريبوزي غير المشفر الطويل (lncRNA) (انظر الشكل). تتميز هذه الآلية بكفاءة عالية باستمرار عبر نطاق محتوى GC المتوقع في النسخ الجيني البشري. كما يسمح التشغيل السريع بإعداد التفاعل في درجة حرارة الغرفة، وهو قوي بما يكفي لدعم الإعداد الآلي والتشغيل المؤجل لألواح التحليل. بالإضافة إلى ذلك، يساعد مؤشر اللون المرئي المدمج في الماصة على منع أخطاء المعايرة البشرية.

ثق بخبراء تصميم مضخمات الضوضاء المنخفضة

بفضل خبرتنا الممتدة لعشرين عامًا في تصميم LNA، تمكّنا من تطوير وتحسين خوارزمية تصميم LNA المتطورة لدينا، والتي تتضمن أكثر من 50 مُعاملًا مختلفًا - تم التحقق من صحتها جميعًا في المختبر وفقًا لمعايير أداء صارمة للغاية - لضمان الحصول على أفضل اختبار للكشف الناجح عن الهدف. لقد اخترنا ما يصل إلى ثلاثة تصميمات اختبار مختلفة لكل نسخة، وتحققنا من صحة جميع اختبارات mRNA وlncRNA الشائعة في المختبر. تعمل اختبارات QuantiNova LNA PCR ببساطة، دون الحاجة إلى إنفاق وقتك أو أموالك على التحسين.

سير عمل سريع وسهل

تتميز عملية العمل السريعة والسهلة التي تستغرق ساعتين فقط، مع الحد الأدنى من التدخل اليدوي، بتوفير الوقت والجهد، وهي مناسبة للأتمتة. تم اختبار البروتوكول البسيط للتأكد من توافقه مع جميع أجهزة التدوير الحراري qPCR من العلامات التجارية الرئيسية (انظر الشكل). توفر فحوصات QuantiNova LNA PCR أداءً متسقًا عبر جميع أجهزة التدوير الحراري. علاوة على ذلك، يمكن استخدام الحمض النووي التكميلي (cDNA) الناتج في خطوة النسخ العكسي (RT) في جميع أنحاء نظام QuantiNova LNA PCR، مما يسمح بالانتقال السلس من الفحوصات إلى اللوحات حسب احتياجات بحثك، موفرًا لك الوقت والعينات.

مبدأ

فحوصات تغطية الجينات: فحوصات خاصة بالنسخ الجينية
الاختبار الموصى به من قبل شركة QIAGEN: مصنف على أنه "أفضل تغطية"
وصف تصميم التحليل وتغطيته: يغطي معظم النسخ الجينية ذات الأهمية البيولوجية للجين المحدد.
متى يُنصح بالاختيار: لإجراء فحص عام للنسخ الجينية وتحديد ما إذا كان الجين محل الاهتمام مُعبرًا عنه في العينة؛ وللكشف عن أكبر عدد ممكن من النسخ الجينية والأشكال المتغايرة للجين.

- أفضل تغطية: للكشف العام عن النصوص
- أفضل اختبار للنسخ الجيني: للكشف عن نسخة جينية محددة
- أفضل اختبار خاص بالنسخة الجينية: للتمييز بين أشكال النسخ الجينية المحددة

كشف عالي الأداء يعتمد على صبغة SYBR® Green

تستخدم فحوصات QuantiNova LNA PCR تقنية الكشف القائمة على صبغة SYBR® Green، والتي توفر، عند استخدامها مع نظام PCR عالي التخصص، وبادئات مصممة بدقة، وظروف تفاعل مُحسّنة، العديد من المزايا مقارنةً بالكشف باستخدام مجسات التحلل المائي. أولًا، يُمكن إجراء تحليل منحنى الذوبان مباشرةً بعد تفاعل PCR، مما يُتيح التأكد من التخصص العالي للتفاعل واستبعاد تكوّن ثنائيات البادئات أو نواتج التضخيم غير النوعية. كما تُوفر هذه التقنية مرونة أكبر في تصميم الفحص، إذ لا يتطلب الأمر سوى بادئتين، بدلًا من بادئتين ومجس. علاوةً على ذلك، فبينما تضمن البادئات تخصص الكشف، تُتيح خصائص ارتباط الصبغة تحليل العديد من الأهداف المختلفة دون الحاجة إلى تصنيع مجسات مُوسومة خاصة بكل هدف، مما يُقلل من تكاليف إعداد الفحص وتشغيله.

تغطية شاملة ومحددة للغاية

استُخدمت خوارزميتنا الخاصة لتصميم أكثر من 1.3 مليون اختبار QuantiNova LNA PCR، لتوفير تحليل mRNA وlncRNA بأعلى حساسية ودقة وفعالية. تغطي الاختبارات المصممة مسبقًا معظم النسخ في قاعدة بيانات Ensembl لجينات الإنسان والفأر والجرذ، مما يُمكّن من إجراء دراسات التعبير الجيني القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) بأقصى عمق ممكن. تغطي معظم الاختبارات الإنترونات كلما أمكن، وتكشف عن الحمض النووي الريبوزي (RNA) فقط. أما الاختبارات التي لا تغطي الإنترونات، فتُصنّف على هذا النحو، وفي حال وجود إكسون واحد في الهدف، يُمكن التخلص بسهولة من الإشارات غير المرغوب فيها باستخدام مجموعة QuantiNova للنسخ العكسي مع خطوة إزالة الحمض النووي الجينومي (gDNA) المدمجة.

اختيار الفحص المناسب لهدفك

تتيح لك فحوصات QuantiNova LNA PCR المصممة مسبقًا الكشف بدقة وحساسية عن أي mRNA أو lncRNA بشري أو فأر أو جرذ، بغض النظر عن مستوى التحليل الذي تحتاجه: الكشف العام عن النسخ، أو الكشف عن نسخة معينة، أو التمييز بين أشكال النسخ.

تحتوي معظم جينات الإنسان والفأر والجرذ على نسخة واحدة فقط، ولكن بالنسبة للجينات التي تحتوي على نسخ متعددة، فقد اخترنا ما يصل إلى ثلاثة اختبارات لكل نسخة باستخدام نفس الخوارزمية. يختلف تصميم هذه الاختبارات وموضع البادئات فيها ليتناسب مع متطلبات الاستخدام المختلفة. يساعدك دليل اختيار الاختبارات لدينا على تحديد أفضل اختبار من كل فئة بسرعة. بعد البحث عن اختبارات لهدفك، ما عليك سوى مراجعة النتائج والبحث عن الاختبار الموصى به الذي يتوافق مع استخدامك المقصود.

راجع الجدول أدناه لمزيد من التفاصيل.

تحليل البيانات التكميلي

تتضمن أداة تحليل البيانات المجانية القائمة على الويب في مركز تحليل البيانات GeneGlobe معالجًا سهل الاستخدام لإرشادك خطوة بخطوة خلال عملية توحيد وتحليل بياناتك وإنشاء أشكال نتائج جاهزة للنشر.

فحوصات الجينات المرجعية لأي دراسة

تتوفر مجموعة واسعة من فحوصات الجينات المرجعية للإنسان والفأر والجرذ لتمكين توحيد البيانات بجودة عالية وضمان نتائج موثوقة. تستهدف هذه الفحوصات جزيئات الحمض النووي الريبوزي المشفر الداخلي، والحمض النووي الريبوزي الطويل غير المشفر، وجزيئات الحمض النووي الريبوزي النووي الصغير، والتي تُعبر عنها عادةً بشكل دائم في مجموعة متنوعة من الأنسجة. فحوصات الجينات المرجعية موسومة بـ FAM، وقد تم التحقق من صحتها وظيفيًا كجينات مرجعية لنظام QuantiNova LNA PCR، وتعمل بكفاءة مثالية مع كواشف QuantiNova RT وPCR.

تطبيع نتائج تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي للـ mRNA/lncRNA

تُزيل عملية التوحيد التباين التقني والبيولوجي بين العينات غير المرتبط بالتغيرات البيولوجية قيد الدراسة. ويُعدّ التوحيد الصحيح أمراً بالغ الأهمية لتحليل وتفسير نتائج تجارب تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي (PCR) في الوقت الحقيقي بشكل سليم. وفي أغلب الأحيان، تُستخدم جينات مرجعية مستقرة التعبير لأغراض التوحيد.

يُنصح عمومًا باختبار عدة جينات مرجعية داخلية مُرشحة قبل البدء بتحليل التعبير الجيني الفعلي للـ mRNA/lncRNA. يجب اختيار هذه الجينات من بين الجينات المتوقع أن يكون تعبيرها ثابتًا في جميع العينات قيد الدراسة. يمكن أن تكون هذه الجينات عبارة عن mRNAs أو lncRNAs ذات تعبير ثابت، يتم اختيارها بناءً على الدراسات المنشورة أو البيانات الموجودة مسبقًا (مثل فحص لوحات NGS أو qPCR). يوفر نظام QuantiNova LNA PCR فحوصات جينية مرجعية مُعتمدة للـ RNAs التي تميل إلى أن يكون تعبيرها ثابتًا، وبالتالي فهي مرشحة جيدة كجينات مرجعية.

ينبغي التحقق تجريبياً من جميع الجينات المرجعية المرشحة لكل دراسة. أحد الخيارات المتاحة لتطبيع لوحة تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) عند تحليل عدد كبير من الحمض النووي الريبوزي الرسول (mRNA) والحمض النووي الريبوزي غير المشفر الطويل (lncRNA) هو التطبيع مقابل المتوسط ​​العام - أي متوسط ​​جميع الحمض النووي الريبوزي الرسول (mRNA) والحمض النووي الريبوزي غير المشفر الطويل (lncRNA) المُعبر عنه. يُعد هذا خياراً جيداً في العينات ذات معدل الاستدعاء العالي (الجينات المُعبر عنها)، ولكن يجب استخدامه بحذر في العينات ذات معدلات الاستدعاء المنخفضة. كما أنه ليس خياراً جيداً في العينات التي يتغير فيها مستوى التعبير الجيني العام. يمكن الاطلاع على المزيد من الإرشادات حول التطبيع في مركز تحليل بيانات GeneGlobe.

إجراء

- فحوصات QuantiNova LNA PCR
- فحوصات QuantiNova LNA PCR المرجعية
- فحوصات QuantiNova LNA PCR المخصصة
- لوحات كوانتينوفا LNA PCR المركزة
- لوحات QuantiNova LNA PCR lncRNA Focus Panels
- لوحات QuantiNova LNA PCR المخصصة
- لوحات QuantiNova LNA PCR المرنة

اختر تقنية qRT-PCR أحادية أو ثنائية الخطوة

تم تحسين فحوصات QuantiNova LNA PCR باستخدام تقنية QuantiNova عالية الأداء والمجربة على مر الزمن. تُحقق أفضل النتائج عند إجراء النسخ العكسي باستخدام مجموعة QuantiNova للنسخ العكسي. بعد ذلك، يتم قياس كمية الحمض النووي التكميلي الناتج (cDNA) بواسطة تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي (qPCR) باستخدام مزيج QuantiNova SYBR® Green PCR Kit مع فحص QuantiNova LNA PCR الذي تختاره.

لإجراء تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي في خطوة واحدة (qRT-PCR)، نوصي باستخدام مجموعة QuantiNova SYBR® Green RT-PCR، التي لا تتطلب أي تعديلات إضافية على ظروف التفاعل. ما عليك سوى إضافة البادئات وقالب الحمض النووي الريبي (RNA) ومزيج النسخ العكسي (RT-Mix) إلى مزيج SYBR® Green RT-PCR الرئيسي الجاهز للاستخدام، ثم ابدأ التفاعل.

الشحن والتوصيل

تُشحن فحوصات QuantiNova LNA PCR في درجة حرارة الغرفة. تُسلّم الفحوصات المتوفرة في المخزون خلال 1-5 أيام. خلال فترة الوصول المبكر، يُتوقع أن تكون مدة التسليم أطول.

ما تحتاجه للبدء باستخدام نظام QuantiNova LNA PCR

النسخ العكسي: مجموعة كوانتينوفا للنسخ العكسي

مزيج التفاعل الرئيسي لتفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي: مجموعة كوانتينوفا SYBR® Green PCR

تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي في الوقت الحقيقي بخطوة واحدة (اختياري): مجموعة كوانتينوفا SYBR® Green RT-PCR

الاختبارات أو اللوحات:

التطبيقات

- تحليل وتحديد وقياس التعبير الجيني للـ mRNA و lncRNA
- التحقق من صحة بيانات التعبير الجيني بتقنية تسلسل الحمض النووي الريبوزي (RNA-seq).
- تحليل التعبير الجيني
- تحليل الإشارات والمسارات
- تأكيد تثبيط التعبير الجيني بواسطة LNA GapmeRs أو siRNAs
- تطوير المؤشرات الحيوية، بما في ذلك فحص وتحديد والتحقق من صحة المؤشرات الحيوية المرتبطة بالأمراض
- رصد التغيرات الظاهرية المرتبطة بالتعبير الجيني

تُعد فحوصات QuantiNova LNA PCR مناسبة للغاية للتطبيقات التي تشمل ما يلي: