Qiagen، 249926، QuantiNova LNA Probe PCR Reference Assay (750)

مزيج مُصمم مسبقًا من البادئات والمجسات لجين مرجعي في أنبوب واحد؛ يكفي لـ 750 تفاعلًا باستخدام تقنية qRT-PCR ثنائية الخطوات أو 375 تفاعلًا باستخدام تقنية qRT-PCR أحادية الخطوة

سمات

- يوفر أكثر من 1.3 مليون اختبار تغطية واسعة النطاق وأفضلها لنسخ mRNA وlncRNA البشرية والفأرية والجرذية في Ensemble
- حساسية ونوعية استثنائية باستخدام بادئات قصيرة معززة بتقنية LNA ومجسات تحلل مائي موسومة بـ FAM
- كشف دقيق ضمن نطاق ديناميكي واسع يبدأ من نسخة واحدة من الحمض النووي الريبي
- استقرار في الإعداد عند درجة حرارة الغرفة مما يسمح بالتشغيل الآلي
- نتائج قوية وقابلة للتكرار في أقل من ساعتين باستخدام مجموعة QuantiNova Probe PCR

تفاصيل المنتج

توفر فحوصات QuantiNova LNA Probe PCR تحليلًا قويًا للغاية للتعبير الجيني باستخدام الكشف القائم على مجسات التحلل المائي. اختر من بين مجموعة واسعة من الفحوصات المصممة مسبقًا للكشف الدقيق والحساس عن أي mRNA أو lncRNA بشري أو فأري أو جرذي - بدءًا من الكشف العام عن النسخ الجينية وصولًا إلى التمييز بين أشكال النسخ الجينية المحددة. يتيح لنا تحسين LNA تصميم بادئات ومجسات أقصر، مما يوفر مرونة أكبر في تحديد موقعها على الهدف. ونتيجة لذلك، يمكننا تحسين تصميماتنا للكشف عن نسخ جينية محددة أو التمييز بين الأهداف. بالإضافة إلى ذلك، يضمن التحقق الشامل من التصميم الأداء الأمثل والكشف القوي، وتخضع الفحوصات لجميع أنواع mRNA وlncRNA الشائعة للتحقق في المختبر. بفضل تحسينها باستخدام كيمياء QuantiNova، يمكن إكمال سير عمل QuantiNova LNA Probe PCR البسيط في أقل من ساعتين، وهو قوي بما يكفي لدعم الإعداد في درجة حرارة الغرفة، والتشغيل الآلي، والتشغيل المؤجل للفحوصات.

هل تحتاج إلى عرض سعر لمشروعك البحثي أو ترغب في مناقشة مشروعك مع فريقنا المتخصص؟ تواصل معنا الآن!

أداء

يعزز LNA أداء qPCR

طُوِّرت فحوصات QuantiNova LNA Probe PCR باستخدام معايير تصميم صارمة وخوارزميات مُعتمَدة مخبريًا. تضمن عملية اختيار الفحص الدقيقة أن تُقدِّم كل مجموعة من البادئات والمجسات أعلى درجات الخصوصية والكفاءة للحصول على نتائج موثوقة ودقيقة. يُعطي توحيد درجة حرارة الانصهار (Tm) وتعزيز LNA البادئات والمجسات ألفة ارتباط أعلى، مما يزيد بشكل كبير من حساسية الفحص وخصوصيته.

تضمن حساسية فحوصات QuantiNova LNA Probe PCR المُحسّنة كفاءة تضخيم ممتازة حتى مع جزيء RNA واحد، مما يُسهّل عليك اكتشاف الأهداف منخفضة الوفرة، مثل lncRNAs، من كمية أقل من المادة الأولية (انظر الشكل: توفر فحوصات QuantiNova LNA Probe PCR قياسًا كميًا دقيقًا وحساسًا وخطيًا للأهداف عبر نطاق ديناميكي واسع، ويُمكّن الشكل: تُتيح فحوصات QuantiNova LNA Probe PCR الكشف عن mRNA عالي التعبير ومنخفض التعبير). كما تُوفر الخصوصية المُحسّنة الناتجة عن التموضع الذكي لـ LNA نسبة إشارة إلى ضوضاء عالية، مما يسمح بالتمييز بين التسلسلات التي تختلف بنوكليوتيد واحد فقط، ويُزيل التضخيم غير المُحدد وتكوين ثنائيات البادئات.

تزيد قوة ارتباط قواعد LNA العالية من مرونة وضع البادئات والمجسات على النسخة، مما يُمكّننا من استخدام التموضع الذكي لتصميم فحوصات لأهداف يصعب تحليلها. وهذا يُتيح تمييزًا أفضل للأهداف وقياسًا كميًا دقيقًا وموثوقًا، حتى بالنسبة للأهداف الغنية بـ AU، والنسخ منخفضة الوفرة، والأهداف ذات البنية الثانوية العالية، والعينات شديدة التعقيد.

مُحسَّن بتقنية كوانتينوفا الكيميائية

طُوِّرت فحوصات QuantiNova LNA Probe PCR لتحقيق أفضل النتائج وأعلى مستويات التكرارية عند استخدامها مع كيمياء QuantiNova PCR الموثوقة. بالنسبة لفحص qRT-PCR أحادي الخطوة، يتضمن ذلك مجموعة QuantiNova Probe RT-PCR. أما بالنسبة لفحص qRT-PCR ثنائي الخطوة، فيتضمن ذلك مجموعة QuantiNova Reverse Transcription ومجموعة QuantiNova Probe PCR (انظر الشكل: إثبات التكرارية بين الدفعات).

تُمكّن آلية التشغيل السريع من QuantiNova من إجراء تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي (qPCR) بنجاح، حتى مع القوالب الصعبة، مثل تلك ذات المحتوى العالي من GC أو البنية الثانوية المعقدة - وهي مثالية لتحليل الحمض النووي الريبوزي غير المشفر الطويل (lncRNA) (انظر الشكل). تتميز هذه الآلية بكفاءة عالية باستمرار عبر نطاق محتوى GC المتوقع في النسخ الجيني البشري. كما يسمح التشغيل السريع بإعداد التفاعل في درجة حرارة الغرفة، وهو قوي بما يكفي لدعم الإعداد الآلي والتشغيل المؤجل لألواح التحليل. بالإضافة إلى ذلك، يساعد مؤشر اللون المرئي المدمج في الماصة على منع أخطاء المعايرة البشرية.

ثق بخبراء تصميم مضخمات الضوضاء المنخفضة

بفضل خبرتنا الممتدة لعشرين عامًا في تصميم LNA، تمكّنا من تطوير وتحسين خوارزمية تصميم LNA المتطورة لدينا، والتي تتضمن أكثر من 50 مُعاملًا مختلفًا - تم التحقق من صحتها جميعًا في المختبر وفقًا لمعايير أداء صارمة للغاية - لضمان الحصول على أفضل اختبار للكشف الناجح عن الهدف. لقد اخترنا ما يصل إلى ثلاثة تصميمات اختبار مختلفة لكل نسخة، وتحققنا من صحة جميع اختبارات mRNA وlncRNA الشائعة في المختبر. تعمل اختبارات QuantiNova LNA Probe PCR ببساطة، دون الحاجة إلى إنفاق وقتك أو أموالك على التحسين.

سير عمل سريع وسهل

يمكن إتمام سير العمل السريع والسهل في أقل من ساعتين بأقل قدر من التدخل اليدوي، كما يمكن أتمتته لتوفير المزيد من الوقت والجهد. تم اختبار البروتوكول البسيط للتأكد من توافقه مع جميع أجهزة التدوير الحراري qPCR من العلامات التجارية الرئيسية (انظر الشكل: توفر فحوصات QuantiNova LNA Probe PCR أداءً متسقًا على جميع أجهزة التدوير الحراري). علاوة على ذلك، يمكن استخدام الحمض النووي التكميلي (cDNA) الناتج في خطوة النسخ العكسي (RT) في جميع أنحاء نظام QuantiNova LNA Probe PCR، مما يسمح بالانتقال السلس من الفحوصات إلى اللوحات حسب احتياجات بحثك، موفرًا لك الوقت والعينات.

مبدأ

فحوصات تغطية الجينات: فحوصات خاصة بالنسخ الجينية
الاختبار الموصى به من قبل شركة QIAGEN: مصنف على أنه "أفضل تغطية"
وصف تصميم التحليل وتغطيته: يغطي معظم النسخ الجينية ذات الأهمية البيولوجية للجين المحدد.
متى يُنصح بالاختيار: لإجراء فحص عام للنسخ الجينية وتحديد ما إذا كان الجين محل الاهتمام مُعبرًا عنه في العينة؛ وللكشف عن أكبر عدد ممكن من النسخ الجينية والأشكال المتغايرة للجين.

- أفضل تغطية: للكشف العام عن النصوص
- أفضل اختبار للنسخ الجيني: للكشف عن نسخة جينية محددة
- أفضل اختبار خاص بالنسخة الجينية: للتمييز بين أشكال النسخ الجينية المحددة

الكشف القوي وعالي الأداء القائم على مسبار التحلل المائي

تستخدم فحوصات QuantiNova LNA Probe PCR تقنية الكشف القائمة على مجسات التحلل المائي الموسومة بـ FAM، وهي تقنية عالية الحساسية والدقة، لأنها تكشف فقط عن ناتج تفاعل البوليميراز المتسلسل المطلوب. مع ذلك، لا يزال الكشف القائم على المجسات يتطلب دقة عالية في تفاعل البوليميراز المتسلسل لمنع حدوث تشوهات في التضخيم، مثل نواتج تفاعل البوليميراز المتسلسل غير النوعية وثنائيات البادئات التي قد تتنافس على مكونات التفاعل وتؤثر سلبًا على الأداء. ولكننا قمنا بتحسين نظام QuantiNova LNA Probe PCR خصيصًا لكم للتخلص من التضخيم غير النوعي، ولضمان دقة وحساسية الكشف في كل مرة.

تغطية شاملة ومحددة للغاية

استُخدمت خوارزميتنا الخاصة لتصميم أكثر من 1.3 مليون اختبار تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) باستخدام مسبار QuantiNova LNA، لتوفير تحليل mRNA وlncRNA بأعلى حساسية ودقة وفعالية. تغطي الاختبارات المصممة مسبقًا معظم النسخ في قاعدة بيانات Ensembl لجينات الإنسان والفأر والجرذ، مما يُمكّن من إجراء دراسات التعبير الجيني القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) بأقصى عمق ممكن. تغطي معظم الاختبارات الإنترونات كلما أمكن، وتكشف عن الحمض النووي الريبوزي (RNA) فقط. أما الاختبارات التي لا تغطي الإنترونات، فتُصنّف على هذا النحو، وفي حال وجود إكسون واحد في الهدف، يُمكن التخلص بسهولة من الإشارات غير المرغوب فيها باستخدام مجموعة QuantiNova للنسخ العكسي مع خطوة إزالة الحمض النووي الجينومي (gDNA) المدمجة.

اختيار الفحص المناسب لهدفك

تتيح لك فحوصات QuantiNova LNA Probe PCR المصممة مسبقًا الكشف بدقة وحساسية عن أي mRNA أو lncRNA بشري أو فأر أو جرذ، بغض النظر عن مستوى التحليل الذي تحتاجه: الكشف العام عن النسخ، أو الكشف عن نسخة معينة، أو التمييز بين أشكال النسخ.

تحتوي معظم جينات الإنسان والفأر والجرذ على نسخة واحدة فقط، ولكن بالنسبة للجينات التي تحتوي على نسخ متعددة، فقد اخترنا ما يصل إلى ثلاثة اختبارات لكل نسخة باستخدام نفس الخوارزمية. يختلف تصميم هذه الاختبارات وموضع البادئات فيها ليتناسب مع متطلبات الاستخدام المختلفة. يساعدك دليل اختيار الاختبارات لدينا على تحديد أفضل اختبار من كل فئة بسرعة. بعد البحث عن اختبارات لهدفك، ما عليك سوى مراجعة النتائج والبحث عن الاختبار الموصى به الذي يتوافق مع استخدامك المقصود.

راجع الجدول أدناه لمزيد من التفاصيل.

تحليل البيانات التكميلي

تتضمن أداة تحليل البيانات المجانية القائمة على الويب في مركز تحليل البيانات GeneGlobe معالجًا سهل الاستخدام لإرشادك خطوة بخطوة خلال عملية توحيد وتحليل بياناتك وإنشاء أشكال نتائج جاهزة للنشر.

فحوصات الجينات المرجعية لأي دراسة

تتوفر مجموعة واسعة من فحوصات الجينات المرجعية للإنسان والفأر والجرذ لتمكين توحيد البيانات بجودة عالية وضمان نتائج موثوقة. تستهدف هذه الفحوصات جزيئات الحمض النووي الريبوزي المشفر الداخلي، والحمض النووي الريبوزي الطويل غير المشفر، وجزيئات الحمض النووي الريبوزي النووي الصغير، والتي تُعبر عنها عادةً بشكل دائم في مجموعة متنوعة من الأنسجة. فحوصات الجينات المرجعية موسومة بـ FAM، وقد تم التحقق من صحتها وظيفيًا كجينات مرجعية لنظام QuantiNova LNA PCR، وتعمل بكفاءة مثالية مع كواشف QuantiNova RT وPCR.

تطبيع نتائج تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي للـ mRNA/lncRNA

تُزيل عملية التوحيد التباين التقني والبيولوجي بين العينات غير المرتبط بالتغيرات البيولوجية قيد الدراسة. ويُعدّ التوحيد الصحيح أمراً بالغ الأهمية لتحليل وتفسير نتائج تجارب تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي (PCR) في الوقت الحقيقي بشكل سليم. وفي أغلب الأحيان، تُستخدم جينات مرجعية مستقرة التعبير لأغراض التوحيد.

يُنصح عمومًا باختبار عدة جينات مرجعية داخلية مُرشحة قبل البدء بتحليل التعبير الجيني الفعلي للـ mRNA/lncRNA. يجب اختيار هذه الجينات من بين الجينات المتوقع أن يكون تعبيرها ثابتًا في جميع العينات قيد الدراسة. يمكن أن تكون هذه الجينات عبارة عن mRNAs أو lncRNAs ذات تعبير ثابت، يتم اختيارها بناءً على الدراسات المنشورة أو البيانات الموجودة مسبقًا (مثل فحص لوحات NGS أو qPCR). يوفر نظام QuantiNova LNA PCR فحوصات جينية مرجعية مُعتمدة للـ RNAs التي تميل إلى أن يكون تعبيرها ثابتًا، وبالتالي فهي مرشحة جيدة كجينات مرجعية.

ينبغي التحقق تجريبياً من جميع الجينات المرجعية المرشحة لكل دراسة. أحد الخيارات المتاحة لتطبيع لوحة تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) عند تحليل عدد كبير من الحمض النووي الريبوزي الرسول (mRNA) والحمض النووي الريبوزي غير المشفر الطويل (lncRNA) هو التطبيع مقابل المتوسط ​​العام - أي متوسط ​​جميع الحمض النووي الريبوزي الرسول (mRNA) والحمض النووي الريبوزي غير المشفر الطويل (lncRNA) المُعبر عنه. يُعد هذا خياراً جيداً في العينات ذات معدل الاستدعاء العالي (الجينات المُعبر عنها)، ولكن يجب استخدامه بحذر في العينات ذات معدلات الاستدعاء المنخفضة. كما أنه ليس خياراً جيداً في العينات التي يتغير فيها مستوى التعبير الجيني العام. يمكن الاطلاع على المزيد من الإرشادات حول التطبيع في مركز تحليل بيانات GeneGlobe.

إجراء

- فحوصات تفاعل البوليميراز المتسلسل باستخدام مسبار LNA من QuantiNova
- فحوصات QuantiNova LNA Probe PCR المرجعية
- فحوصات QuantiNova LNA Probe PCR المخصصة
- لوحات التركيز على تفاعل البوليميراز المتسلسل باستخدام مجسات LNA من QuantiNova
- لوحات QuantiNova LNA Probe PCR lncRNA Focus Panels
- لوحات QuantiNova LNA Probe PCR المخصصة
- لوحات QuantiNova LNA Probe PCR المرنة

اختر تقنية qRT-PCR أحادية أو ثنائية الخطوة

تم تحسين فحوصات تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) باستخدام مسبار QuantiNova LNA باستخدام تقنية QuantiNova عالية الأداء والمجربة على مر الزمن. تُحقق أفضل النتائج عند إجراء النسخ العكسي باستخدام مجموعة QuantiNova للنسخ العكسي. بعد ذلك، يتم قياس كمية الحمض النووي التكميلي (cDNA) الناتج بواسطة تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي (qPCR) باستخدام الخلطات الرئيسية لمجموعة QuantiNova Probe PCR مع فحص QuantiNova LNA Probe PCR الذي تختاره.

لإجراء تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي في خطوة واحدة (qRT-PCR)، نوصي باستخدام مجموعة QuantiNova Probe RT-PCR Kit، التي توفر إعدادًا سريعًا للتفاعل دون الحاجة إلى تحسين ظروف التفاعل. ما عليك سوى إضافة البادئات والمسبار وقالب الحمض النووي الريبي إلى مزيج التفاعل الرئيسي الجاهز للاستخدام، ثم ابدأ التفاعل.

الشحن والتوصيل

تُشحن فحوصات QuantiNova LNA Probe PCR على ثلج جاف. تُسلّم الفحوصات المتوفرة في المخزون خلال 1-5 أيام. خلال فترة الوصول المبكر، يُتوقع أن تكون مدة التسليم أطول.

ما تحتاجه للبدء باستخدام نظام QuantiNova LNA Probe PCR

النسخ العكسي: مجموعة كوانتينوفا للنسخ العكسي

مزيج تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي (qPCR): مجموعة كوانتينوفا لتفاعل البوليميراز المتسلسل (QuantiNova Probe PCR Kit)

تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي في الوقت الحقيقي بخطوة واحدة (اختياري): مجموعة كوانتينوفا بروبس لتفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي في الوقت الحقيقي

الاختبارات أو اللوحات:

التطبيقات

- تحليل وتحديد وقياس التعبير الجيني للـ mRNA و lncRNA
- التحقق من صحة بيانات التعبير الجيني بتقنية تسلسل الحمض النووي الريبوزي (RNA-seq).
- تحليل التعبير الجيني
- تحليل الإشارات والمسارات
- تأكيد تثبيط التعبير الجيني بواسطة LNA GapmeRs أو siRNAs
- تطوير المؤشرات الحيوية، بما في ذلك فحص وتحديد والتحقق من صحة المؤشرات الحيوية المرتبطة بالأمراض
- رصد التغيرات الظاهرية المرتبطة بالتعبير الجيني

تُعد فحوصات QuantiNova LNA Probe PCR مناسبة للغاية للتطبيقات التي تشمل ما يلي: