كياجين، 250131، مجموعة أدوات فحص متقدمة QIAcuity OneStep (1 مل)

1 مل من مزيج OneStep Advanced Probe Master Mix (4x)، 45 ميكرولتر من مزيج OneStep RT Mix (100x)، 1 مل من Enhancer GC، 20 ميكرولتر من QN Internal Control RNA، 2 × 1.9 مل من الماء الخالي من RNase؛ لـ 100 تفاعل في Nanoplate 26K و333 تفاعلًا في Nanoplate 8.5K

سمات

- ميزة HotStart RT التي تتيح إعداد Nanoplate بشكل متزامن لجهاز QIAcuity Four و Eight
- إعداد التفاعل في درجة حرارة الغرفة بفضل ميزة HotStart RT
- للتفاعلات أحادية ومتعددة النسخ
- مزيج تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) المركز 4 مرات لتحميل المزيد من العينات
- مقاومة متقدمة ضد المثبطات

تفاصيل المنتج

تُمكّن مجموعة QIAcuity OneStep Advanced Probe PCR Kit من تحديد كمية الحمض النووي الريبوزي (RNA) أو الحمض النووي الريبوزي والحمض النووي (RNA+DNA) بدقة عالية على جهاز QIAcuity الرقمي لتفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) في تفاعل RT-PCR واحد مُدمج. تحتوي المجموعة على مزيج رئيسي مُركّز 4x ومزيج RT مُركّز 100x مُحسّن للاستخدام في تقنية الموائع الدقيقة في صفائح QIAcuity النانوية. تُعزز هذه المجموعة دقة وكفاءة تفاعل البوليميراز المتسلسل الرقمي القائم على المجسات، مما يُتيح تحليلاً دقيقاً، سواءً كان أحادياً أو حتى خماسياً.

تم تجهيز المجموعة الجديدة بإنزيم النسخ العكسي HotStart (RT)، مما يتيح إعداد التفاعل في درجة حرارة الغرفة وإعداد Nanoplate في وقت واحد للتحميل في أجهزة QIAcuity Four أو Eight.

تعمل هذه المجموعة بالتزامن مع نظام QIAcuity Digital PCR وألواح QIAcuity النانوية.

هل ترغب بمعرفة المزيد عن المنتج والتواصل مع أحد متخصصي تقنية dPCR لدينا؟ سجّل دخولك هنا، وسنتواصل معك قريباً.

أداء

نظام التشغيل القياسي: نظام التشغيل السريع
بدون مُحسِّن GC: مع مُحسِّن GC
اختبار ABI TaqMan: ATOX1
TGFBR2: 100%

أداء متقدم في النسخ العكسي

يحتوي مزيج النسخ العكسي المتقدم الجديد QIAcuity على تقنية النسخ العكسي HotStart الجديدة من QIAGEN، والتي هي قيد الحصول على براءة اختراع. إن إنزيم HotStart RT الجديد غير فعال في درجة حرارة الغرفة، ويمنع تكوين الحمض النووي التكميلي (cDNA) غير المستهدف حتى عند تركه للحضانة عند 37 درجة مئوية لعدة ساعات (انظر الشكل: تحليل منحنى الذوبان لإنزيم HotStart RT الجديد). وبذلك، يُتيح إعداد التفاعل في درجة حرارة الغرفة. يسمح إنزيم HotStart RT للمستخدمين بتجميع تفاعلاتهم في درجة حرارة الغرفة. علاوة على ذلك، والأهم من ذلك، يُتيح إنزيم HotStart RT للمستخدمين تجميع وتحميل العديد من الصفائح النانوية بالتوازي دون الحاجة إلى القلق بشأن نشاط النسخ العكسي غير المرغوب فيه والذي قد يكون غير محدد أثناء انتظار الصفائح في درجات حرارة الغرفة. يتم حجب إنزيم HotStart RT أثناء وجود الصفائح النانوية داخل جهاز QIAcuity حتى يتم نقلها إلى جهاز التدوير الحراري، حيث تتم خطوة النسخ العكسي من البروتوكول.

يعزز مُحسِّن GC أداء التحليل المحدد

يعتمد أداء اختبار تفاعل البوليميراز الرقمي (dPCR) على تسلسل وتصميم البادئات والمجسات. يختلف محتوى GC وطول المُضخَّم بين الاختبارات الجاهزة والمصممة خصيصًا. تُحسَّن كيمياء تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) للاستخدام العام وأفضل أداء؛ ومع ذلك، يُوصى أحيانًا بإضافة مُحسِّنات مُحدَّدة. مُحسِّن GC الجديد هو مُكوِّن اختياري (عبوة منفصلة) يُمكن إضافته إلى تفاعل dPCR عندما تكون المُضخَّمات غنية بـ GC أو يزيد طولها عن 150 نيوكليوتيد. كما يُوصى باستخدامه مع اختبارات التعبير الجيني بتقنية TaqMan (Thermo Fisher).

جدول: كفاءة RT مع وبدون مُحسِّن GC

أداء تضخيم فائق

تستخدم مجموعة QIAcuity OneStep Advanced Probe Kit لتقنية dPCR القائمة على مجسات التحلل المائي أحدث إصدار من بوليميراز الحمض النووي عالي الجودة من QIAGEN. ويُوفر المزيج الفريد من تقنية المحلول المنظم الخاصة بشركة QIAGEN والمُثبتة فعاليتها، والمُحسّنة خصيصًا لتقنية Nanoplate الميكروفلويدية، بالإضافة إلى بوليميراز الحمض النووي QuantiNova الجديد، نتائج متسقة للغاية من حيث الحساسية وقابلية التكرار والكفاءة.

الحمض النووي الريبوزي للتحكم الداخلي

تأتي مجموعة QIAcuity OneStep Advanced Probe Kit مزودةً بـ RNA تحكم داخلي من QuantiNova (QN IC RNA)، والذي يمكن استخدامه اختياريًا كعنصر تحكم في النسخ العكسي والتضخيم. يكشف اختبار QuantiNova IC Probe Assay (200) (رقم المنتج 205813)، المتوفر للشراء بشكل منفصل، عن RNA التحكم الداخلي من QuantiNova ضمن منطقة تضخيم بطول 200 زوج قاعدي في القناة الصفراء على جهاز QIAcuity. تم التحقق من صحة تسلسلات البادئات والمجسات المستخدمة للكشف عن RNA التحكم الداخلي من QuantiNova باستخدام المعلوماتية الحيوية للتأكد من عدم وجود تشابه مع مئات الكائنات حقيقية النواة وبدائية النواة. بالإضافة إلى ذلك، تم اختبارها تجريبيًا على العديد من عينات RNA من الإنسان والفأر والجرذ من أنسجة وخطوط خلوية متعددة.

ملاحظة: يجب على المستخدمين عدم شراء QuantiNova IC Probe Assay Red 650 (500) (رقم الكتالوج 205824)، لأنه غير مُحسَّن للعمل مع QIAcuity.

مبدأ

تحتوي مجموعة QIAcuity OneStep Advanced Probe Kit على مزيج رئيسي جاهز للاستخدام بتقنية تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) بتركيز 4x، مما يُغني عن الحاجة إلى تحسين ظروف التفاعل ودورات التضخيم. تتيح تقنية OneStep إجراء النسخ العكسي وتضخيم الحمض النووي الريبي الفيروسي المطلوب في خطوة واحدة. في تفاعل OneStep، يمكن أيضًا الكشف عن أهداف الحمض النووي الريبي والحمض النووي معًا، على سبيل المثال، الحمض النووي الريبي الفيروسي مع الحمض النووي البكتيري.

تم وصف مبدأ تفاعل dPCR في الصفائح النانوية هنا.

إجراء

تحتوي مجموعة QIAcuity OneStep Advanced Probe Kit على مزيج رئيسي جاهز للاستخدام لتفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) بتركيز 4x، مما يُغني عن الحاجة إلى تحسين ظروف التفاعل ودورات التضخيم. ما عليك سوى إضافة مزيج النسخ العكسي (RT) بتركيز 100x، وقالب الحمض النووي الريبوزي (RNA)، ومجموعات البادئات والمجسات إلى المزيج الرئيسي، واتباع الإجراءات الموضحة في بروتوكول البدء السريع للحصول على نتائج سريعة وموثوقة على جهاز QIAcuity. بفضل إنزيم HotStart RT الجديد، أصبح من الممكن إعداد وتحميل العديد من لوحات النانو في وقت واحد في أجهزة QIAcuity Four وQIAcuity Eight (انظر الشكل: إعداد وتحميل لوحات النانو).

التطبيقات

تتيح مجموعة QIAcuity OneStep Advanced Probe Kit، بالاشتراك مع نظام QIAcuity Digital PCR System وألواح QIAcuity Nanoplates، التحليل الكمي لأهداف الحمض النووي الريبي (RNA) لتطبيقات متنوعة، بما في ذلك الكشف عن الحمض النووي الريبي الفيروسي أو الحمض النووي الريبي الرسول (mRNA). كما تُتيح هذه المجموعة إمكانية إجراء تطبيقات تتطلب الكشف المتزامن عن أهداف الحمض النووي الريبي (RNA) والحمض النووي (DNA)، على سبيل المثال، في اختبار مياه الصرف الصحي.