مجموعة وحدات تكوين المستعمرات القياسية من Acholeplasma laidlawii، من شركة Qiagen، رقم 250269.

وحدة قياس الميكوبلازما القياسية من QIAcuity، ووحدة التحكم السلبية للميكوبلازما من QIAcuity

سمات

- فحص قائم على المجسات لتحديد كمية 127 نوعًا مختلفًا من الميكوبلازما والكشف عنها
- سير عمل متوافق مع دستور الأدوية، بما في ذلك 10 معايير مختلفة لوحدات تكوين الميكوبلازما للتحقق من الصحة ولضوابط الحساسية الإيجابية الاختيارية.
- تقرير التحقق من طرف ثالث متاح

تفاصيل المنتج

تكشف مجموعة QIAcuity Mycoplasma Quant Kit بدقة عن وجود الحمض النووي الريبوزي (rRNA) للميكوبلازما في أنواع مختلفة من العينات، وتحدد كميته بدقة عالية. وبفضل طريقة تحضير العينات الموصى بها، نقدم لكم سير عمل تقنية الحمض النووي (NAT) لاختبار الميكوبلازما، والمتوافق مع دستور الأدوية الأوروبي والأمريكي والياباني. تُغني هذه العملية الفعّالة عن زراعة الميكوبلازما التي تستغرق وقتًا طويلاً. ويُعدّ سير العمل هذا مناسبًا بشكل خاص لأنواع العينات ذات درجات النقاء المختلفة (مثل عينات بنوك الخلايا، وعينات مراحل التصنيع، كعينات حصاد الفيروسات والكميات النهائية).

توفر مجموعة QIAcuity Mycoplasma Quant Kit كشفًا دقيقًا وموثوقًا وقابلًا للتكرار بدرجة عالية عن وجود الميكوبلازما. يتيح الكشف عبر الحمض النووي الريبوزي (rRNA) حساسية أعلى من استخدام الحمض النووي (DNA) نظرًا لوجود نسخ متعددة منه في الخلية البكتيرية الواحدة. يظل الاختبار قادرًا على الكشف عن الحمض النووي (DNA) حتى في حال تخطي خطوة النسخ العكسي (RT)، مما يمنحه مرونة عالية.

تتوافق هذه المجموعة مع نظام QIAcuity Digital PCR وألواح QIAcuity Nanoplates.

تعرّف على المزيد حول المنتج من خلال خبرائنا في مجال تقنية تفاعل البوليميراز الرقمي (dPCR). سجّل دخولك هنا وسنتواصل معك قريبًا.

أداء

استخدم مجموعة QIAcuity Mycoplasma Quant Kit للكشف عن تلوث الميكوبلازما في مزارع الخلايا والمنتجات الصيدلانية خلال مراحل التصنيع المختلفة. استفد من سير عمل متوافق تمامًا مع دستور الأدوية الأوروبي والأمريكي والياباني. حمّل تقرير التحقق الكامل لتقييم أداء المجموعة ومعاييرها. يُرجى ملاحظة أنه يجب عليك التحقق من صحة المجموعة لمصفوفة العينة الخاصة بك قبل الاستخدام الأول.

مبدأ

تُشكّل مجموعة QIAcuity Mycoplasma Quant Kit، إلى جانب نظام QIAcuity Digital PCR، حلاً فريداً للكشف عن تلوث الميكوبلازما وتحديد كميته. يوفر سير العمل القائم على تقنية PCR الرقمية مزيجاً مثالياً من الأداء وسهولة الاستخدام والامتثال لدستور الأدوية الأوروبي (EP؛ الفصل 2.6.7)، ودستور الأدوية الأمريكي (UP؛ الفصل <63>)، ودستور الأدوية الياباني (JP؛ الفصل G3-14-170). بالإضافة إلى أنواع الميكوبلازما العشرة المذكورة في دساتير الأدوية، يُمكنك الكشف عن 127 نوعاً آخر من الميكوبلازما باستخدام مجموعة QIAcuity Mycoplasma Quant Kit. لتقييم أداء سير العمل، يُرجى تنزيل تقرير التحقق من جهة مستقلة، وهي شركة Minerva Biolabs GmbH (برلين، ألمانيا).

تتألف آلية العمل المعتمدة من خطوتين فقط. أولاً، استخلاص الأحماض النووية من العينة، ثم تحليلها باستخدام تقنية RT-dPCR. وباستخدام تقنية QIAcuity OneStep Advanced Probe، يُمكن إجراء النسخ العكسي وتفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) في خطوة واحدة. مع أننا نوصي بالكشف عن الميكوبلازما باستخدام بروتوكول RT-dPCR، إلا أنه يُمكن أيضاً الكشف عن الحمض النووي مباشرةً في تفاعل PCR رقمي دون الحاجة إلى خطوة النسخ العكسي.

تم وصف مبدأ تفاعل dPCR في الصفائح النانوية هنا.

إجراء

تتألف آلية العمل المعتمدة من خطوتين، حيث تُستخلص الأحماض النووية من العينة ثم تُحلل باستخدام تقنية RT-dPCR. وباستخدام تقنية QIAcuity OneStep Advanced Probe، تتم عملية النسخ العكسي وتفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) المطلوبة في خطوة واحدة. مع أننا نوصي بالكشف عن الميكوبلازما باستخدام بروتوكول RT-dPCR الموضح أدناه، إلا أن هذا الاختبار يكشف أيضًا عن الحمض النووي (DNA) ويمكن استخدامه في تفاعل dPCR دون الحاجة إلى خطوة النسخ العكسي.

تحضير العينة

للكشف الموثوق عن تلوث الميكوبلازما، يجب أن تخلو العينة من مثبطات تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وتفاعل النسخ العكسي (RT) والشوائب الأخرى. كإجراء تحكم شامل للمثبطات، يمكنك إضافة عنصر التحكم الداخلي للميكوبلازما من QIAcuity إلى محلول التحلل قبل استخلاص العينة. يمكنك استخدام المستخلص مباشرةً للكشف عن الميكوبلازما باستخدام مجموعة QIAcuity Mycoplasma Quant Kit مع تقنية QIAcuity OneStep Advanced Probe المتوافقة.

مجموعة مجسات QIAcuity OneStep المتقدمة

دمج النسخ العكسي و PCR للكشف عن تلوث الميكوبلازما دون الحاجة إلى إجراء تفاعل RT منفصل من خلال الجمع بين إنزيم النسخ العكسي HotStart (RT)، وبوليميراز الحمض النووي HotStart QuantiNova، والمكونات الكيميائية الخاصة، واختبار QIAcuity Mycoplasma.

اختبار الميكوبلازما QIAcuity

يتضمن اختبار QIAcuity للكشف عن الميكوبلازما مزيجًا من البادئات والمجسات مُوسَمًا بـ FAM بتركيز 20x للكشف عن هدف محدد من الحمض النووي الريبوزي (rRNA) للميكوبلازما، ومزيجًا آخر من البادئات والمجسات مُوسَمًا بـ HEX للكشف الاختياري عن عنصر التحكم الداخلي للميكوبلازما في اختبار QIAcuity. لقد اختبرنا هذا التفاعل المزدوج بدقة للتأكد من عدم وجود تداخل بين النتائج. مع هذا الاختبار، يمكنك الاعتماد على عنصر تحكم واحد لاستخلاص الحمض النووي الريبوزي (RNA)، والنسخ العكسي، والتضخيم، والكشف، مما يُغنيك عن الحاجة إلى تفاعلات إضافية.

التطبيقات

تم تصميم مجموعة QIAcuity Mycoplasma Quant Kit والمعايير للكشف عن تلوث الميكوبلازما وتحديد كميته في مزارع الخلايا وعمليات تطوير المستحضرات الصيدلانية الحيوية.