كياجين، 30060، خرطوشة ستريب-تاكتين سوبرفلو بلس (5 مل)

خرطوشة واحدة معبأة مسبقًا بـ 5 مل من محلول Strep-Tactin Superflow Plus (يحتوي على 0.02% أزيد الصوديوم): للتنقية الآلية للبروتينات الموسومة بـ Strep باستخدام أنظمة الكروماتوغرافيا السائلة

سمات

- زيادة ثلاثة أضعاف في قدرة الارتباط (تصل إلى 9 ملغم/مل)
- مثالي للتنقية من الأنظمة بدائية النواة وحقيقية النواة
- يُمكّن من التنقية الآلية على أي نظام كروماتوغرافيا سائلة
- تأثير ضئيل على بنية البروتين ووظيفته وقدرته على إثارة الاستجابة المناعية

تفاصيل المنتج

يمكن استخدام علامة Strep-tag II الصغيرة (WSHPQFEK) لتنقية البروتينات النشطة ذات البنية الأصلية بدرجة نقاء عالية باستخدام راتنجات Strep-Tactin. كما يمكن استخدامها مع علامة His في إجراء تنقية معياري من خطوتين. يتوفر راتنج Strep-Tactin على شكل راتنج كروماتوغرافيا Superflow للتنقية على نطاق أوسع (حتى 9 ملغم/مل من الراتنج). كما يتوفر راتنج Strep-Tactin في خراطيش معبأة مسبقًا للتنقية الآلية باستخدام أنظمة الكروماتوغرافيا السائلة.

أداء

يسمح Strep-Tactin Superflow Plus بتنقية البروتينات بكفاءة عالية (انظر الأشكال: تنقية فعالة لـ Strep-tagged GFP باستخدام Strep-Tactin Superflow Plus والكشف عالي التخصص عن البروتينات الموسومة بـ Strep في أي نظام تعبير).

في الوقت نفسه، يمكن استخدام نواقل pQE TriSystem His·Strep TriSystem للتعبير عن البروتينات الموسومة بعلامتين، إحداهما His والأخرى Strep، والتي يتم تنقيتها في إجراء تقارب ثنائي الخطوات. تتميز خطوات التنقية المتسلسلة باستخدام Ni-NTA وStrep-Tactin بأنها موحدة وسريعة للغاية، وتنتج بروتينات فائقة النقاء.

مبدأ

المصفوفة: قدرة ربط البروتين
ستريب - تاكتين سوبرفلو بلس: حتى 9 ملغ/مل

ترتبط البروتينات الموسومة بـ Strep-tag بألفة عالية وخصوصية فائقة مع Strep-Tactin، وهو شكل مُهندس من الستربتافيدين (انظر جدول قدرات ارتباط البروتينات بمصفوفات Strep-Tactin). بعد الغسل، تُستخلص البروتينات باستخدام تراكيز منخفضة من البيوتين (الرابط الطبيعي للستربتافيدين) أو ديستيو بيوتين (نظير بيوتين مستقر يرتبط بشكل عكسي، انظر الشكل: ارتباط البروتينات الموسومة بـ Strep-tag مع Strep-Tactin والاستخلاص باستخدام ديستيو بيوتين). يُمكّن وسم البروتينات بـ Strep-tag II الصغير من تنقية البروتينات المؤتلفة المُعبر عنها في الأنظمة بدائية النواة وحقيقية النواة بكفاءة عالية وبشكل معياري، ويُنتج بروتينات عالية النقاء. بالإضافة إلى ذلك، يُعد Strep-tag II النظام الأمثل في الحالات التي قد تكون فيها الوسوم الأخرى غير مناسبة، على سبيل المثال، عندما تُؤدي إضافات المحلول المنظم مثل EDTA إلى إزالة البروتينات من أعمدة IMAC.

إجراء

المنظفات غير الأيونية: المنظفات الأيونية والمنظفات ثنائية القطب
2% تريتون X-100: 2% إن-لوريل ساركوزين
2% توين 20: 0.1% SDS
2% N-أوكتيل-β-D-غلوكوبيرانوزيد: 1.3% N-أوكتيل-2-هيدروكسي-إيثيل سلفوكسيد
0.2% N-نونيل-β-D-غلوكوبيرانوزيد: 0.3% CHAPS
2% إيجيبول CA-630 (نونيديت P40): 0.1% N-دوديسيل-N،N-ثنائي ميثيل أمين-N-أكسيد
0.12% C10E5؛ ديسيل بنتا أوكسي إيثيلين: 0.034% DDAO؛ N-ديسيل-N،N-ثنائي ميثيل أمين-N-أكسيد
0.03% C10 E6: 10% إيثانول
0.005% C12 E8
0.023% C12E9؛ دوديسيل نونوكسي إيثيلين (ثيسيت)
0.35% مادة جافة؛ ديسيل-بيتا-دي-مالتوزيد
0.007% LM؛ N-دوديسيل-β-D-مالتوزيد

تُنتَج البروتينات الموسومة بـ Strep باستخدام ناقل pQE TriSystem، وتُستَحصَل عليها بدرجة نقاء عالية جدًا من مُستخلصات الخلايا باستخدام إجراءات تنقية التقارب Strep-Tactin Superflow Plus. يُمكن تنقية البروتينات الموسومة بـ Strep باستخدام طرق الدفعات أو التدفق بالجاذبية، أو يُمكن ملء أعمدة متوافقة مع FPLC بـ Strep-Tactin Superflow Plus للتنقية على أنظمة كروماتوغرافيا السائل. يتوفر Strep-Tactin Superflow Plus في خراطيش سعة 5 مل للتنقية الآلية على أنظمة كروماتوغرافيا السائل مثل أنظمة FPLC وÄkTA وBioLogic، أو للتنقية اليدوية باستخدام محقنة. للاطلاع على الكواشف المتوافقة مع راتنجات Strep-Tactin، يُرجى مراجعة جدول الكواشف المتوافقة مع تفاعل Strep-tag Strep-Tactin.

يضمن موقع العلامة في الطرف الكربوكسيلي تنقية البروتينات كاملة الطول فقط. وتتميز عملية التنقية بقابلية تكرار عالية، مما يضمن الحصول على مستحضرات بروتينية عالية الجودة باستمرار. تُستخدم الأجسام المضادة وحيدة النسيلة لعلامة Strep للكشف عن البروتينات الموسومة بعلامة Strep في إجراءات الكشف المناعي بحساسية ونوعية عاليتين.

التطبيقات

- دراسات وظيفية أو تفاعلية
- فحص التبلور
- التحليل الإنشائي
- توليد الأجسام المضادة

يمكن استخدام Strep-Tactin Superflow Plus لتنقية ما يصل إلى 9 ملغ من البروتين الموسوم بـ Strep لكل مل من الراتنج بكفاءة وقابلية تكرار عالية. ويمكن استخدام البروتينات المنقاة في: