شركة كياجين، 301425، كاشف نقل الجينات إيفيكتين (1 مل)

1 مل من كاشف إيفيكتين، مُحسِّن، ومحلول منظم؛ لـ 40 عملية نقل جيني في أطباق قطرها 60 مم أو 160 عملية نقل جيني في أطباق ذات 12 بئراً

سمات

- كفاءة عالية في وجود المصل
- نقل فعال للجينات بكميات قليلة من الحمض النووي
- سمية خلوية أقل بكثير وأكثر لطفًا من العديد من البدائل
- مناسب للفحص عالي الإنتاجية

أداء

يُحقق كاشف النقل Effectene كفاءة نقل أعلى للحمض النووي البلازميدي مقارنةً بالكواشف الأخرى عند استخدامه وفقًا للإجراءات الموصى بها (انظر الشكل "كفاءة نقل عالية باستخدام كاشف Effectene"). يُعد كاشف النقل Effectene مناسبًا لنقل النيوكليوتيدات قليلة العدد إلى خطوط الخلايا الحساسة (انظر الشكل "نقل النيوكليوتيدات قليلة العدد باستخدام كاشف Effectene")، وهو فعال بشكل خاص للخلايا الأولية (انظر الشكل "كفاءة نقل 40% في الخلايا الأولية"). وقد تم نقل العديد من خطوط الخلايا والخلايا الأولية بنجاح باستخدام كاشف Effectene؛ وتتوفر بروتوكولات نقل خاصة بنوع الخلية. تكون السمية الخلوية ضئيلة لأن عملية النقل باستخدام كاشف Effectene يُمكن إجراؤها في وجود المصل وتتطلب كميات قليلة من الحمض النووي (انظر الشكل "كمية المصل والحمض النووي مقابل كفاءة النقل").

أدى تطبيق تقنية الحمض النووي المؤتلف في مجالات مثل اكتشاف الأدوية وتطويرها إلى زيادة الحاجة إلى تقنية النقل الجيني عالية الإنتاجية. تتطلب عملية النقل الجيني باستخدام كاشف النقل الجيني Effectene كميات قليلة من الحمض النووي ومعالجة بسيطة. إضافةً إلى ذلك، لا يتطلب الأمر إزالة مركبات النقل الجيني، مما يجعل هذا الكاشف مناسبًا للغاية للفحص عالي الإنتاجية.

مبدأ

يُعدّ كاشف النقل الجيني Effectene تركيبة دهنية مبتكرة غير ليبوزومية، تُستخدم مع مُحسِّن خاص لتكثيف الحمض النووي ومحلول منظم مُحسَّن لتحقيق كفاءة عالية في النقل الجيني. يعمل المُحسِّن أولًا على تكثيف جزيئات الحمض النووي، ثم يُغلِّفها كاشف Effectene بالدهون الكاتيونية، مما يوفر طريقة فعّالة للغاية لنقل الحمض النووي إلى الخلايا حقيقية النواة. تضمن هذه الخاصية إمكانية تكرار تكوين مُركَّب النقل الجيني بدقة عالية.

إجراء

تتألف عملية إيفيكتين من خطوتين. في البداية، يُخلط الحمض النووي مع المُحسِّن ومحلول منظم يوفر ظروفًا ملحية مثالية لتكثيف الحمض النووي بكفاءة. تستغرق هذه الخطوة من دقيقتين إلى خمس دقائق فقط. بعد ذلك، يُضاف كاشف إيفيكتين ويُحضن المزيج لمدة تتراوح بين خمس وعشر دقائق لتكوين معقدات إيفيكتين-الحمض النووي. تُخلط هذه المعقدات مع وسط النمو (الذي قد يحتوي على مصل ومضادات حيوية)، وتُضاف مباشرةً إلى الخلايا. ثم تُحضن الخلايا حتى يتم حصادها وتحليلها للتعبير الجيني (انظر مخطط "إجراء نقل إيفيكتين").

التطبيقات

يُعد كاشف النقل الجيني Effectene مناسبًا للنقل الجيني المؤقت والمستقر لمجموعة واسعة من أنواع الخلايا.