Product Description
لإجراء 60 عملية نقل جيني في أطباق ذات 6 آبار أو 80 عملية نقل جيني في أطباق ذات 12 بئراً
سمات
- نقل جيني عالي الكفاءة
- نتائج قابلة للتكرار مضمونة من خلال مراقبة الجودة الصارمة
- نقل الجينات بكفاءة إلى الخلايا العصبية الأولية
أداء
يوفر كاشف TransMessenger إجراءً سريعًا وسهلًا وكفاءة عالية في نقل الجينات (انظر الشكل "كاشف TransMessenger مع خلايا HeLa"). نظرًا لأن كمية الحمض النووي الريبوزي (RNA) عامل حاسم لنجاح عملية النقل، نوصي بتحسين كميات الحمض النووي الريبوزي وكاشف TransMessenger لكل تركيبة من نوع الخلية والحمض النووي الريبوزي (انظر الشكل "كمية الحمض النووي الريبوزي وكاشف TransMessenger مقابل كفاءة النقل"). ولتسهيل ذلك، يُرفق بالكاشف إرشادات للتحسين، بالإضافة إلى نقاط بداية للتحسين في مختلف صيغ زراعة الخلايا. يُعد كاشف TransMessenger مناسبًا جدًا للاستخدام في دراسات خلايا القلب الوظيفية باستخدام خلايا القلب البطينية لجرذان حديثة الولادة. تُظهر خلايا عضلة القلب المُستخلصة من خلايا القلب البطينية لجرذان حديثة الولادة (R-CM-561 [QBMCellScience.com])، والمُجمدة والمُفككة، حيويةً ممتازة، وخصائص دوائية، وشكلاً، وترابطاً خلوياً، فضلاً عن النشاط الانقباضي والكهربائي اللازم لاستخدامها في الفحص الوظيفي (انظر الفيديو: التحكم في عملية النقل الجيني: خلايا عضلة القلب الوظيفية النابضة). ولتقييم مدى ملاءمة استخدام كاشف النقل الجيني TransMessenger في دراسات خلايا القلب الوظيفية، تم نقل جينات الخلايا باستخدام ناقل تعبير GFP بعد 4 ساعات من زراعتها، ثم تم تثبيتها بعد 5 أيام من النقل الجيني. وقد أسفر استخدام كاشف النقل الجيني TransMessenger عن معدل بقاء ممتاز بلغ 60% بعد النقل الجيني، مع كفاءة نقل جيني تتراوح بين 10 و13%. وقد أظهرت جميع خلايا عضلة القلب نبضاً بعد النقل الجيني (انظر الفيديوهات: خلايا عضلة القلب الموجبة لـ GFP النابضة بعد النقل الجيني، وخلايا عضلة القلب الوظيفية النابضة بعد النقل الجيني)، مما يدل على أنها خلايا وظيفية. تم تقييم عدد الخلايا القلبية المُعدَّلة وراثيًا مقارنةً بالخلايا غير القلبية، وأظهرت النتائج أن عددًا كبيرًا من الخلايا القلبية وغير القلبية قد تم تعديلها وراثيًا. كما لوحظت أشكال متماثلة بين الخلايا المُعدَّلة وراثيًا وغير المُعدَّلة وراثيًا (انظر الشكل: دراسات الخلايا القلبية).
إجراء
تُقدَّم جميع مكونات كاشف TransMessenger على شكل محاليل جاهزة للاستخدام. لتحضير مُركَّبات نقل الحمض النووي الريبوزي (RNA) باستخدام TransMessenger، امزج الحمض النووي الريبوزي (RNA) مع مُحسِّن R ومحلول EC-R، ثم حضِّن المزيج لمدة 5 دقائق في درجة حرارة الغرفة. بعد ذلك، أضف كاشف TransMessenger وحضِّن المزيج لمدة 5-10 دقائق أخرى. تُخلط المُركَّبات مع الوسط الغذائي وتُضاف مباشرةً إلى الخلايا. بعد حضانة لمدة 3 ساعات، يُغيَّر الوسط الغذائي وتُحضَّن الخلايا حتى تصبح جاهزة للتحليل. للحصول على أفضل نتائج نقل الحمض النووي الريبوزي، استخدم حمضًا نوويًا ريبوزيًا عالي النقاء وخاليًا من الحمض النووي (DNA) والبروتينات والملوثات الأخرى. يُنصح بشدة باستخدام حمض نووي ريبوزي مُنقَّى باستخدام RNeasy.
التطبيقات
- دراسات على الخلايا التي لم يتم نقل البلازميد إليها بكفاءة
- دراسات مباشرة لوظيفة الحمض النووي الريبي (RNA)
يُتيح نقل الحمض النووي الريبوزي (RNA) إلى الخلايا بدلاً من الحمض النووي الريبوزي منقوص الأكسجين (DNA) إمكانيات جديدة لتجارب النقل الجيني. تُعبَّر تسلسلات الحمض النووي الريبوزي المنقولة في غياب النسخ، وبطريقة مستقلة عن المحفز. إضافةً إلى ذلك، عادةً ما يحدث التعبير البروتيني بشكل أسرع بعد نقل الحمض النووي الريبوزي مقارنةً بنقل الحمض النووي الريبوزي منقوص الأكسجين.
يمكن استخدام عملية نقل الحمض النووي الريبوزي (RNA) باستخدام كاشف النقل TransMessenger من أجل:
Order Guidelines
1. Price & Stock Available on Request. Click to send email to: service@iright.com
2. Please DO NOT make payment before confirmation.
3. Minimum order value of $1,000 USD required.
Collaboration
Tony Tang
Email: Tony.Tang@iright.com
Mobile/WhatsApp/Wechat: +86-17717886924