كياجين، 30761، خراطيش Ni-NTA فائقة التدفق (5 × 5 مل)

5 خراطيش معبأة مسبقًا بـ 5 مل من Ni-NTA Superflow: للتنقية الآلية للبروتينات الموسومة بـ His باستخدام أنظمة الكروماتوغرافيا السائلة

سمات

- عملية تنقية قوية بخطوة واحدة في أوسع نطاق من الظروف
- إنتاجية عالية من البروتين عالي النقاء، تصل إلى 50 ملغم/مل
- معالجة سريعة وسهلة وقابلة للتكرار على أي نظام كروماتوغرافي سائل

تفاصيل المنتج

يتوفر راتنج Ni-NTA Superflow، وهو الراتنج الأكثر استخدامًا لتنقية البروتينات الموسومة بـ His، في خراطيش معبأة مسبقًا سعة 1 مل و 5 مل للتنقية الآلية على أنظمة الكروماتوغرافيا السائلة مثل أنظمة FPLC و ÄkTA و BioLogic، أو للتنقية اليدوية باستخدام محقنة.

أداء

المصفوفة: مجلد المصفوفة
خرز الأغاروز المغناطيسي Ni-NTA (مقياس ميكروي): 100 ميكرولتر
Ni-NTA Superflow (على نطاق صغير): 500 ميكرولتر
Ni-NTA Superflow (متوسط ​​الحجم): 10 مل
Ni-NTA Superflow (واسع النطاق): 100 مل

يُظهر راتنج Ni-NTA أداءً فائقًا في إنتاج كميات كبيرة من البروتينات عالية النقاء، مقارنةً بالراتنجات الأخرى (انظر الشكل: يتفوق Ni-NTA على الراتنجات الأخرى في إنتاج كميات كبيرة من البروتينات عالية النقاء). وقد أظهرت مقارنة مستقلة مع راتنجات النيكل الأخرى المتوفرة تجاريًا أن Ni-NTA Superflow يُظهر أقل مستوى من تسرب النيكل (انظر الشكل: تُظهر دراسة مستقلة أن Ni-NTA يفقد كمية أقل من النيكل مقارنةً بأي راتنج آخر تم اختباره). تكمن أهمية ذلك في أنه في حال تسرب النيكل من الراتنج، فإن الروابط المشحونة المتبقية تعمل كمبادل أيوني وترتبط بالبروتينات غير الموسومة التي ستلوث أجزاء الإذابة. تعني الثباتية العالية لـ Ni-NTA أنه حتى في وجود 10 ملي مولار من DTT، يمكن استخدامه للحصول على بروتينات نشطة تمامًا وعالية النقاء (انظر الشكل: يرتبط موقع التنسيق الإضافي في Ni-NTA بأيون النيكل بقوة أكبر من IDA).

كما هو موضح في الجدول، تتميز نقاوة البروتينات بمستويات عالية باستمرار على جميع مستويات التنقية. تُشكل خراطيش Ni-NTA Superflow جزءًا من الحلول الشاملة والمتكاملة لبروتينات His-tagged التي تقدمها شركة QIAGEN (انظر الشكل: تنقية قابلة للتطوير لكميات تتراوح من النانوغرام إلى الغرام من بروتينات His-tagged).

مبدأ

المواد المسببة لتغير لون المنظفات
6 مولار غوانيدين هيدروكلوريد: 2% تريتون إكس-100
8 مولار يوريا: 2% توين 20
1% CHAPS: 20 ملي مول TCEP 20 ملي مول

تُعدّ مصفوفات Ni-NTA الحل الأمثل لفصل البروتينات الموسومة بالهيستيدين باستخدام تقنية كروماتوغرافيا التقارب (انظر الشكل: تنقية فعّالة للبروتينات الموسومة بالهيستيدين بخطوة واحدة). يضمن استقرارها العالي توافقها مع مجموعة واسعة من مكونات المحاليل المنظمة، بما في ذلك المواد المُفسِّخة القوية، والمنظفات، وحتى عوامل الاختزال (انظر الجدول: الكواشف المتوافقة مع تفاعل الهيستيدين/Ni-NTA). تُمكّن هذه المرونة الباحثين من تطوير مخططات تنقية مثالية مع الاستفادة في الوقت نفسه من خصائص الفصل الممتازة التي توفرها Ni-NTA، مما يُغني في كثير من الأحيان عن خطوة كروماتوغرافية ثانية.

التطبيقات

يمكن استخدام مصفوفات Ni-NTA لتوسيع نطاق تنقية البروتينات الموسومة بـ His للدراسات الهيكلية (على سبيل المثال، باستخدام علم البلورات البروتينية أو الرنين المغناطيسي النووي)، أو لإنتاج كميات بالجرام لإنتاج المستحضرات الصيدلانية الحيوية.