Product Description
25 ميكروغرام لكل منها: pQE-16، pQE-60، pQE-70
سمات
- يضمن وسم 6xHis في الطرف الكربوكسيلي تنقية البروتين كامل الطول فقط
- ناقل pQE-16 للتعبير عن البروتينات ذات التعبير الضعيف كبروتينات اندماجية مع DHFR
- ناقل pQE-16 للتعبير عن الببتيدات القصيرة كبروتينات اندماجية مع DHFR
تفاصيل المنتج
توفر هذه المجموعة ثلاثة متجهات (pQE-16، وpQE-60، وpQE-70) للتعبير عن البروتينات الموسومة بستة هيستيدينات (6xHis) في الطرف الكربوكسيلي، وهي مُوصى بها للأطر المفتوحة للقراءة التي تحتوي على "مواقع توقف مؤقتة"، والتي قد تُسبب إنهاءً مبكرًا. يسمح كل من pQE-60 وpQE-70 باستبدال كودون البدء الأصلي للجزء المُشفّر بكودون ATG في متجه pQE، مما يحافظ على الطرف الأميني الأصلي للبروتين. يتم إنشاء هذين التركيبين بإدخال موقع تقييد Nco I وموقع تقييد Sph I، على التوالي، عند كودون ATG للجزء المُدخل بواسطة تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) أو الطفرات المُوجهة. يسمح pQE-16 بالتعبير عن بروتينات اندماج DHFR الموسومة بستة هيستيدينات (6xHis) في الطرف الكربوكسيلي. يُعزز DHFR (مختزل ثنائي هيدروفولات) مناعية البروتين واستقراره، وهو مُوصى به للبروتينات ضعيفة التعبير أو الببتيدات القصيرة المُعرضة للتحلل البروتيني. بما أن إنزيم DHFR نفسه يُظهر القليل من القدرة على إثارة الاستجابة المناعية في الفئران والجرذان، فإن بروتينات الاندماج DHFR مثالية لفحص المستضدات.
مبدأ
العنصر: الوصف
عنصر المحفز/المشغل المُحسَّن: يتكون من محفز العاثية T5 وتسلسلين لمشغل اللاكتوز، مما يزيد من احتمالية ارتباط مثبط اللاكتوز ويضمن كبتًا فعالًا لمحفز T5 القوي.
موقع ارتباط الريبوسوم الاصطناعي RBSII: من أجل ترجمة فعالة
تسلسل ترميز علامة الهيستيدين السداسية: إما 5' أو 3' لمنطقة استنساخ الرابط المتعدد
كودونات التوقف الترجمية: في جميع أطر القراءة لتسهيل إعداد تركيبات التعبير
يوجد مُنهيان قويان للنسخ: t0 من العاثية لامدا، وT1 من أوبيرون rrnB في الإشريكية القولونية، لمنع النسخ المتجاوز وضمان استقرار بنية التعبير.
منشأ تضاعف ColE1: من pBR322
جين بيتا لاكتاماز (bla): يمنح مقاومة للأمبيسيلين
تجمع نواقل QIA express pQE بين مُحفِّز قوي لفيروس T5 (يتعرف عليه بوليميراز الحمض النووي الريبي في الإشريكية القولونية) ووحدة كبح مزدوجة لمشغل اللاكتوز، مما يوفر تنظيمًا دقيقًا وتعبيرًا عالي المستوى للبروتينات المؤتلفة في الإشريكية القولونية (انظر الشكل "ناقل QIA express pQE"). يتم تثبيط تخليق البروتين بفعالية في وجود مستويات عالية من مثبط اللاكتوز، كما يتم تعزيز استقرار التركيبات السامة للخلايا. تُمكِّن نواقل pQE من وضع علامة 6xHis في الطرف الأميني أو الكربوكسيلي للبروتين المؤتلف.
إجراء
تُستنسخ أجزاء ترميز البروتينات المطلوبة في تركيبات مناسبة (للحصول على معلومات مفصلة، راجع دليل QIAexpressionist) وتُحوّل إلى سلالة مناسبة من بكتيريا الإشريكية القولونية للتعبير الجيني. يُحفّز التعبير بإضافة IPTG. يمكن تحويل تركيبات ناقل pQE-TriSystem إلى بكتيريا الإشريكية القولونية، أو استخدامها كناقل مكوك للتعبير عن البروتينات المؤتلفة في خلايا الحشرات، أو نقلها إلى خلايا الثدييات.
التطبيقات
- تنقية البروتينات الوظيفية والنشطة بنيوياً
- التنقية في ظل ظروف مُفسِخة لإنتاج الأجسام المضادة
- التبلور لتحديد البنية ثلاثية الأبعاد
- فحوصات تتضمن تفاعلات البروتين مع البروتين وتفاعلات البروتين مع الحمض النووي
يوفر نظام التعبير QIA express مستوى عالٍ من التعبير عن البروتينات المناسبة للعديد من التطبيقات، بما في ذلك:
Order Guidelines
1. Price & Stock Available on Request. Click to send email to: service@iright.com
2. Please DO NOT make payment before confirmation.
3. Minimum order value of $1,000 USD required.
Collaboration
Tony Tang
Email: Tony.Tang@iright.com
Mobile/WhatsApp/Wechat: +86-17717886924