Product Description
لإجراء 500 اختبار للكشف عن البروتين المُبلغ، و500 اختبار للتحكم السلبي، و250 اختبار للتحكم الإيجابي؛ 500 ميكرولتر (100 نانوغرام/ميكرولتر) من البروتين المُبلغ (بروتين مُبلغ GFP قابل للتحفيز ويستجيب لعامل النسخ)؛ 500 ميكرولتر (100 نانوغرام/ميكرولتر) من التحكم السلبي (بنية بروتين مُبلغ GFP مع تحكم مُحفز بسيط في التعبير عن GFP)؛ 250 ميكرولتر (100 نانوغرام/ميكرولتر) من التحكم الإيجابي (بنية بروتين GFP ذات التعبير الدائم).
عرض المزيد
سمات
- تحليل سريع لتنظيم مسار نقل الإشارة
- حساسية ونوعية استثنائية
- تركيبات جاهزة للنقل الجيني
- يتضمن عناصر تحكم إيجابية وسلبية
- قياس كمية الخلايا الحية في الوقت الحقيقي (بصيغة GFP)
تفاصيل المنتج
تتيح فحوصات Cignal Reporter المتوفرة في مجموعة أدوات Cignal Reporter Assay Kit تقييمًا سريعًا وحساسًا وكميًا لتنشيط مسار نقل الإشارة عن طريق قياس أنشطة عوامل النسخ اللاحقة. يتوفر نظامان للإبلاغ: نظام ثنائي اللوسيفيراز ونظام GFP.
مبدأ
تتكون فحوصات Cignal Reporter من تكرارات متعددة لموقع ارتباط عامل نسخ محدد وعناصر محفزة أساسية لتوجيه التعبير عن جين مُبلغ (لوسيفيراز اليراعة أو GFP). تُعد هذه المُبلغات أدوات فعالة في علم الجينوم الوظيفي واكتشاف الأدوية لتقييم نشاط المسار. عند تنشيط المسار أو تثبيطه بواسطة دواء مرشح، أو إسكات جيني، أو فرط التعبير، أو ببتيد، يتغير نشاط مُبلغ اللوسيفيراز أو GFP، ويمكن قياسه كميًا وبسرعة (انظر الشكل "مبدأ فحص Cignal Reporter"). تتوفر فحوصات Cignal Reporter كبنى جاهزة للنقل الجيني باستخدام نظامين مُبلغين: مُبلغ اللوسيفيراز المزدوج أو مُبلغ GFP (انظر المخطط الانسيابي "إجراء فحص Cignal Reporter").
يُعدّ اختبار اللوسيفيراز المزدوج اختبارًا نهائيًا يوفر حساسيةً ونوعيةً ونسبة إشارة إلى ضوضاء فائقة. هذا الاختبار متاح لجميع اختبارات Cignal Reporter. يتضمن كل اختبار مُخبِرًا لعامل نسخ مُركّز على مسار مُحدد، وعنصر تحكم سلبي غير قابل للتحفيز، بالإضافة إلى عناصر تحكم إيجابية للوسيفيراز وGFP.
يُعدّ تنسيق البروتين الفلوري الأخضر (GFP) طريقةً ممتازةً لرصد تنظيم مسارات الخلايا الحية، بدقة تصل إلى مستوى الخلية الواحدة. وهو يتضمن مُخبِرًا لعامل النسخ مُركّزًا على المسار، بالإضافة إلى ضوابط إيجابية وسلبية.
إجراء
تتضمن فحوصات Cignal Reporter مُبلغ مسار مُجهز مسبقًا وجاهز للنقل الجيني (ثنائي اللوسيفيراز أو GFP)، بالإضافة إلى عنصر تحكم إيجابي وآخر سلبي. يتم نقل مُبلغ المسار القابل للتحفيز وعنصر التحكم السلبي غير القابل للتحفيز جينيًا وإخضاعهما لمعالجات تجريبية بالتوازي.
لوسيفيراز مزدوج
تُحسب نتائج اختبار اللوسيفيراز المزدوج لكل خلية مُعدَّلة وراثيًا. ويُحدد التغير في نشاط كل مسار إشاري بمقارنة نشاط اللوسيفيراز المُعَيَّر للجين المُبلِّغ في الخلايا المُعدَّلة وراثيًا المُعالَجة مقابل غير المُعالَجة. وتُستخدم الخلايا المُعدَّلة وراثيًا المُعالَجة بنفس الطريقة كعنصر تحكم في الخصوصية. أما عنصر التحكم الإيجابي فيُستخدم للتحكم في كفاءة التعديل الوراثي، وذلك من خلال مراقبة تعبير لوسيفيراز اليراعة ورينيلا.
GFP
يُقاس التعبير عن بروتين GFP باستخدام جهاز قياس التدفق الخلوي، أو المجهر الفلوري، أو مقياس الفلورة. ويُحدد التغير في نشاط كل مسار إشاري بمقارنة نشاط بروتين GFP في الخلايا المحولة المعالجة مقابل الخلايا غير المعالجة. وتُستخدم الخلايا المحولة المعالجة بنفس الطريقة كعنصر تحكم سلبي للتحقق من الخصوصية. أما عنصر التحكم الإيجابي فيُستخدم للتحقق من كفاءة التحويل، وذلك بمراقبة التعبير عن بروتين GFP من خلال مُخبر CMV-GFP المُعبر عنه بشكل دائم.
التطبيقات
تعتبر فحوصات Cignal Reporter أدوات قوية في علم الجينوم الوظيفي وعلم البروتينات واكتشاف الأدوية لتقييم التأثير البيولوجي لتثبيط أو تنشيط المسار باستخدام siRNAs والبروتينات ومركبات الجزيئات الصغيرة.
Order Guidelines
1. Price & Stock Available on Request. Click to send email to: service@iright.com
2. Please DO NOT make payment before confirmation.
3. Minimum order value of $1,000 USD required.
Collaboration
Tony Tang
Email: Tony.Tang@iright.com
Mobile/WhatsApp/Wechat: +86-17717886924