شركة كياجين، 339322، لوحات تفاعل البوليميراز المتسلسل miRCURY LNA miRNA miRNome

لوحات miRCURY LNA miRNA PCR لتحديد خصائص miRNome باستخدام تقنية PCR، متوفرة بتنسيق 384 بئراً؛ للكشف باستخدام SYBR® Green

سمات

- تتيح الحساسية غير المسبوقة تحديد خصائص 752 من الحمض النووي الريبوزي الميكروي باستخدام 40 نانوغرام فقط من الحمض النووي الريبوزي الكلي
- متوفر للـ miRNAs البشرية والفأرية والجرذية
- سريع وسهل الاستخدام ولا يتطلب تضخيمًا مسبقًا
- تمييز موثوق بين جزيئات miRNA المتقاربة وجزيئات miRNA الناضجة والطلائعية

تفاصيل المنتج

تتيح لوحات miRCURY LNA miRNA miRNome PCR تحليلًا دقيقًا وحساسًا للغاية لتعبير miRNA باستخدام تقنية LNA ونظام miRCURY LNA miRNA PCR. تأتي مجموعات بادئات PCR المصممة مسبقًا هذه مُقسّمة مسبقًا في صفائح PCR ذات 384 بئرًا وجاهزة للاستخدام. تتوفر لوحات miRCURY LNA miRNA miRNome PCR لـ miRNAs البشرية والفأرية والجرذية، وتتيح لك تحليل ما يصل إلى 752 miRNA بشرية أو قوارض باستخدام 40 نانوغرام فقط من الحمض النووي الريبي الكلي، دون الحاجة إلى تضخيم مسبق.

هل تحتاج إلى عرض سعر لمشروعك البحثي أو ترغب في مناقشة مشروعك مع فريقنا المتخصص؟ تواصل معنا الآن!

أداء

أداء متميز في التخصص

تُعد منصة miRCURY LNA miRNA PCR المنصة الوحيدة لتحديد كمية miRNA التي تتمتع بخصوصية مطلقة (انظر دراسة miRQC المنشورة في Nature Methods)، وقد تفوقت على منصة أخرى تعتمد على المجسات لتحديد كمية miRNA qPCR في اختبارات الخصوصية (انظر الشكل: اختبار الخصوصية بجانب نظام منافس يعتمد على المجسات لتحديد كمية miRNA qPCR). هذا يمنع النتائج الإيجابية الكاذبة ويضمن إشارات miRNA قوية وموثوقة فقط.

نتائج سريعة وقابلة للتكرار من كميات عينة ضئيلة

تُمكّن لوحات miRCURY LNA miRNA miRNome PCR من تحليل 752 جزيء miRNA من 40 نانوغرام فقط من الحمض النووي الريبوزي الكلي، مما يسمح بإجراء تحليل عالي الجودة لتعبير miRNA في عينات تحتوي على كميات ضئيلة جدًا من الحمض النووي الريبوزي الكلي، مثل مقاطع الأنسجة المثبتة بالفورمالين والمضمنة في البارافين (FFPE) ومصل الدم/البلازما (انظر الشكلين: تحليل تعبير 730 جزيء miRNA باستخدام 40 نانوغرام من الحمض النووي الريبوزي الكلي من مقاطع الأورام والأنسجة الطبيعية المثبتة بالفورمالين والمضمنة في البارافين، وتحليل تعبير 368 جزيء miRNA باستخدام الحمض النووي الريبوزي الكلي من 35 ميكرولتر من مصل الدم). يوفر لك البروتوكول السهل التطبيق، والذي يستغرق 3 ساعات فقط، الوقت والجهد في المختبر. ما عليك سوى تخفيف الحمض النووي التكميلي المُصنّع، ودمجه مع مزيج miRCURY LNA SYBR Green Master Mix، ثم توزيعه في صفيحة تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) ذات 384 بئرًا، لتكون جاهزة للاستخدام في جهاز تفاعل البوليميراز المتسلسل في الوقت الحقيقي. تم تقليل عدد خطوات السحب بالماصة إلى الحد الأدنى، مما يقلل من التباين التقني. ونتيجةً لذلك، يُمكن تحقيق دقة عالية للغاية في التكرار من يوم لآخر، وحتى من موقع لآخر (انظر الشكلين: دقة ممتازة في التكرار من يوم لآخر، وارتباط ممتاز بين المواقع). بل إن دقة التكرار العالية ممكنة حتى عند تحليل عينات صعبة، مثل الحمض النووي الريبي المستخلص من المصل (انظر الشكل: دقة ممتازة في التكرار بين تفاعلات النسخ العكسي على الحمض النووي الريبي الكلي من المصل).

مبدأ

سمات

تُمكّن لوحات miRCURY LNA miRNA miRNome PCR من إجراء تحليل تعبير جيني عالي الحساسية والإنتاجية باستخدام كميات ضئيلة من المادة الأولية. يوفر الجمع بين تفاعل تخليق الحمض النووي التكميلي (cDNA) الشامل ولوحات PCR الجاهزة للاستخدام تحليلًا سريعًا وسهلًا لتعبير miRNA. تأتي اللوحات في صفائح ذات 384 بئرًا تحتوي على بادئات مجففة لتفاعل واحد لكل بئر، ولا تتطلب سوى إضافة cDNA ومزيج miRCURY LNA SYBR Green Master Mix قبل تضخيم PCR في الوقت الحقيقي. توفر بادئات PCR المُحسّنة بتقنية LNA والمخصصة لـ miRNA حساسية استثنائية وخلفية منخفضة للغاية، مما يُمكّن من التحديد الكمي الدقيق لمستويات miRNA المنخفضة جدًا. بالإضافة إلى ذلك، تسمح الخصوصية العالية بالتمييز بين تسلسلات miRNA المتقاربة، مع بروتوكول سريع وسهل يُعطي النتائج في غضون 3 ساعات فقط.

التغطية

تتوفر لوحتان تغطيان 752 من جزيئات miRNA البشرية، ولوحتان تغطيان 752 من جزيئات miRNA الخاصة بالفئران والجرذان. تحتوي اللوحة الأولى (الخاصة بالبشر والفئران/الجرذان) على مجموعات بادئات miRNA ذات الأولوية العالية. تتميز هذه الجزيئات عمومًا بارتفاع مستوى التعبير الجيني، وزيادة احتمالية اختلاف التعبير الجيني في الأمراض، وكثرة الاستشهاد بها في الدراسات العلمية. أما اللوحة الثانية (الخاصة بالفئران/الجرذان) فتحتوي على مجموعات بادئات لأهم جزيئات miRNA غير المتوفرة في اللوحة الأولى. لعرض قائمة مجموعات البادئات في كل لوحة، يُرجى تنزيل ملفات تخطيط اللوحة. تتضمن لوحات تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) الخاصة بـ miRNome أيضًا 6 مجموعات من بادئات الجينات المرجعية المحتملة - ثلاثة جينات مرجعية للحمض النووي الريبوزي الصغير (U6 وSNORD38B وSNORD49A للإنسان، وU6 snRNA وRNU5G وRNU1A للفأر والجرذ) وثلاثة جينات مرجعية للحمض النووي الريبوزي الميكروي (miR-103-3p وmiR-191-5p وhsa-miR-423-5p أو mmu-miR-423-3p) - جميعها موجودة في اللوحة الأولى. تحتوي اللوحة الأولى أيضًا على فحوصات تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي (qPCR) للخمسة أنواع من الحمض النووي الريبوزي الاصطناعي في مجموعة RNA Spike-in Kit (cel-miR-39-3p وUniSp2 وUniSp4 وUniSp5 وUniSp6) والتي يمكن استخدامها لمراقبة تخليق الحمض النووي التكميلي (cDNA) أو تنقية الحمض النووي الريبوزي (RNA). أخيرًا، تحتوي كل لوحة على معاير بين اللوحات بثلاث نسخ وعينة تحكم سلبية فارغة.

تحديث الإصدار

تتضمن لوحات تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) المُحدَّثة لـ miRCURY LNA miRNA miRNome 54 اختبارًا مُحدَّثًا في اللوحة الأولى و33 اختبارًا مُحدَّثًا في اللوحة الثانية. تستهدف هذه الاختبارات نفس جزيئات miRNA التي تستهدفها لوحات الإصدار الثالث. بالإضافة إلى ذلك، تم تحديث مجموعتي البادئات المُضافة UniSp5 وUniSp6 لتحسين الأداء، وستكون قوالب الاستهداف الخاصة بهما هي نفسها.