Qiagen، 339350، miRCURY LNA miRNA Probe PCR Assay (200)

مجموعات اختبار كاملة مُجهزة مسبقًا تحتوي على بادئ أمامي ومسبار مُعزز بتقنية LNA ومُخصصين للهدف. تكفي لـ 200 تفاعل.

سمات

- بادئ تفاعل البوليميراز المتسلسل الأمامي الخاص بالـ miRNA والمعزز بتقنية LNA ومسبار التحلل المائي
- الكشف عن الإشارات الحقيقية في نطاق كشف منخفض للغاية، يصل إلى نسخة واحدة من الحمض النووي الريبوزي الميكروي (miRNA).
- سير عمل سريع وبسيط من خطوتين يستغرق ساعتين
- مستوى عالٍ من المتانة وقابلية التكرار للحصول على نتائج موثوقة

تفاصيل المنتج

تُعدّ فحوصات miRCURY LNA miRNA Probe PCR عبارة عن مجموعات من البادئات والمجسات الخاصة بتفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) لجزيئات miRNA، والتي تُمكّن من تحديد كمية miRNA بدقة وحساسية عاليتين باستخدام نظام miRCURY LNA miRNA Probe PCR. يتميز هذا النظام بقوته وحساسيته العالية، مما يُتيح الكشف الدقيق عن miRNA من عينات ذات محتوى منخفض من الحمض النووي الريبوزي (RNA)، بما في ذلك المصل والبلازما والبول. كل من بادئة التضخيم الأمامية لتفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) والمجس المُوسوم بـ FAM والمُثبِّط المظلم مُخصّصان لجزيئات miRNA ومُحسَّنان بتقنية LNA، مما يُعزز أداء الفحص. تخضع فحوصات جميع جزيئات miRNA المهمة للتحقق من صحتها في المختبر. بالإضافة إلى الفحوصات المُصممة مُسبقًا، والتي تُغطي جميع جزيئات miRNA في قاعدة بيانات miRBase، يُمكن إنشاء فحوصات miRCURY LNA miRNA Custom Probe PCR بسهولة لأي جزيء miRNA مُراد دراسته باستخدام خوارزمية التصميم نفسها.

هل تحتاج إلى عرض سعر لمشروعك البحثي أو ترغب في مناقشة مشروعك مع فريقنا المتخصص؟ تواصل معنا الآن!

أداء

كشف عالي الحساسية للإشارات الحقيقية

تُحقق حساسية فحوصات miRCURY LNA miRNA Probe Assays الاستثنائية من خلال الجمع بين النسخ العكسي الشامل وبادئات ومجسات خاصة بـ miRNA مُحسَّنة بتقنية LNA ومُعايرة بدرجة حرارة الانصهار (Tm). يُمكّن هذا المزيج من تحديد كمية miRNAs الفردية بدقة وموثوقية من كمية ضئيلة تصل إلى 1 بيكوغرام من الحمض النووي الريبي الكلي، أو حتى جزيء واحد دون الحاجة إلى تضخيم مسبق (انظر: تحديد كمية دقيق حتى مع كمية قليلة من المادة الأولية وكفاءة استثنائية عبر نطاق ديناميكي واسع). تجعل الحساسية العالية وسرعة سير العمل النظام مناسبًا بشكل خاص لعينات المصل أو البلازما، وتضمن إنزيمات QuantiNova نتائج قابلة للتكرار بدرجة عالية بين النسخ التقنية والبيولوجية من المحاولة الأولى، مما يوفر كمية العينة والوقت.

بالمقارنة مع أنظمة تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) الأخرى القائمة على مجسات miRNA والتي تعتمد على المجس فقط لتحديد الخصوصية، فإن البادئ والمجس المُحسَّن بتقنية LNA في فحوصات miRCURY LNA miRNA Probe Assays يتميزان بخصوصية عالية تجاه miRNA وقصر طولهما الكافي لمنع التداخل عند الارتباط بالهدف (انظر نظرة عامة على نظام miRCURY LNA miRNA Probe PCR). ونتيجة لذلك، تتفوق فحوصات miRCURY LNA miRNA Probe Assays على الحلول البديلة من حيث الكفاءة (انظر الكفاءة المحسّنة مقارنةً بالحلول البديلة)، والخطية، والحساسية دون الحاجة إلى تضخيم مسبق (انظر الخطية المحسّنة والحساسية العالية دون الحاجة إلى تضخيم مسبق). وبالإضافة إلى نسبة الإشارة إلى الضوضاء الممتازة (انظر الكشف الدقيق حتى مع وجود خلفية عالية من الحمض النووي الريبي)، تسمح هذه الميزة الفريدة بالتمييز بين جزيئات miRNA المتقاربة ذات الاختلافات في التسلسل التي لا تتجاوز نيوكليوتيدًا واحدًا (انظر القدرة التمييزية حتى اختلاف نيوكليوتيد واحد).

تم التحقق من صحته وتحسينه

تعتمد تصميمات المقايسات (البادئات والمجسات) على خوارزمية تصميم طورها خبراء في تقنية LNA والمقايسات. تُقيّم هذه الخوارزمية الشاملة وتُحسّن 60 مُعاملًا، يتم التحقق من صحتها حاسوبيًا وفقًا لمعايير أداء صارمة للغاية لضمان تصميم يوفر أعلى حساسية. والنتيجة هي مقايسات قادرة على الكشف عن نسخة واحدة من miRNA. كما تم التحقق من صحة مقايسات جميع أنواع miRNA المهمة عمليًا بشكل كامل.

التغطية

يتوفر أكثر من 30,000 اختبار تغطي جميع قواعد بيانات miRBase 22. تم التحقق من صحة أكثر من 1,000 اختبار منها في المختبرات العملية لاختبار الحساسية والنوعية والكفاءة والخلفية. أما الاختبارات المتبقية، فقد تم التحقق من صحتها حاسوبيًا باستخدام خوارزمية تصميم شاملة ذات معايير أداء صارمة، مما يضمن اختبارات عالية الجودة ومخصصة لكل نوع، ومعززة بتقنية LNA، مع حساسية ونوعية مثاليتين لكل كائن حي. إذا كنت تعمل مع جزيئات miRNA جديدة، مثل تلك الناتجة عن تجربة NGS، فصمم اختبارك الخاص باستخدام اختبارات miRCURY LNA miRNA Custom Probe PCR.

سريع وسهل

يوفر البروتوكول سهل الاتباع، والذي يستغرق ساعتين فقط، الوقت والجهد. وباستخدام تقنية النسخ الشاملة وبروتوكولات RT-PCR المُحسّنة، تُصبح العملية أبسط بكثير مقارنةً بالحلول الأخرى. علاوة على ذلك، يُمكن استخدام الحمض النووي التكميلي (cDNA) المُنتج في خطوة النسخ العكسي (RT) في نظام miRCURY LNA miRNA Probe PCR، مما يُتيح لك الانتقال بسلاسة من اللوحات إلى المقايسات حسب احتياجات بحثك، مع توفير كمية العينة والوقت. كما يُقلل عدد خطوات السحب بالماصة إلى الحد الأدنى، مما يُقلل أيضًا من التباين التقني. وتتيح متانة المقايسة إمكانية الإعداد في درجة حرارة الغرفة وإجراء عمليات تشغيل مؤجلة لمزيد من المرونة والاستخدام في الأتمتة (انظر: استقرار التفاعل ومتانة الإعداد). إن سير العمل المُبسط هذا، بالإضافة إلى تصنيع المقايسة وفقًا لمعايير ISO (انظر: اتساق عالٍ بين الدفعات)، يُتيح تحقيق قابلية تكرار عالية للغاية يوميًا ومن موقع لآخر.

مبدأ

اسم المنتج: نوع التحكم
اختبار UniSp2 miRCURY LNA miRNA Probe Assay: اختبار التحكم بالإضافة
اختبار UniSp4 miRCURY LNA miRNA Probe Assay: اختبار التحكم بالإضافة
اختبار UniSp5 miRCURY LNA miRNA Probe Assay: اختبار التحكم بالإضافة
اختبار UniSp6 miRCURY LNA miRNA Probe Assay: اختبار التحكم RT
اختبار UniSp9 miRCURY LNA miRNA Probe Assay: IPC – معاير بين الألواح
اختبار cel-miR-39-3p miRCURY LNA miRNA Probe Assay: اختبار التحكم RT

اسم المنتج: الكائن الحي المستهدف
مجموعة بادئات التحكم، SNORD38B (hsa): hsa
مجموعة بادئات التحكم، SNORD44 (hsa): hsa
مجموعة البادئات الضابطة، SNORD48 (hsa): hsa
مجموعة بادئات التحكم، SNORD49A (hsa): hsa
مجموعة البادئات الضابطة، SNORA66 (hsa): hsa
مجموعة بادئات التحكم، 5S rRNA (hsa): hsa، mmu
مجموعة البادئات الضابطة، U6 snRNA (hsa، mmu): hsa، mmu، rno
مجموعة البادئات الضابطة، RNU5G snRNA (mmu، hsa): mmu، hsa، rno
مجموعة بادئات التحكم، RNU1A1 (mmu، hsa): mmu، hsa، rno
مجموعة بادئات التحكم، SNORD65 (mmu): mmu
مجموعة بادئات التحكم، SNORD68 (mmu): mmu
مجموعة بادئات التحكم، SNORD110 (mmu): mmu

يُمكّن نظام miRCURY LNA miRNA Probe PCR من تحديد كمية miRNA وتصنيفها بدقة عالية وحساسية فائقة عبر تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي (qPCR). يعتمد الكشف على مسبار مُوسَم بصبغة FAM ومُثبِّط إضاءة، بالإضافة إلى مسبار تحلل مُوسَم بمُثبِّط إضاءة. يغطي النظام جميع خطوات تحويل miRNA إلى cDNA والكشف اللاحق عن miRNAs باستخدام qPCR. تم التحقق من صحة فحوصات miRCURY LNA miRNA Probe PCR باستخدام مزيج QuantiNova Probe Master Mix؛ لذا فإن استخدام كواشف أخرى لـ qPCR سيؤثر على النتائج.

مجموعة RNA Spike-In Kit للنسخ العكسي

تتيح مجموعة RNA Spike-In Kit مراقبة جودة عزل الحمض النووي الريبوزي (RNA)، وتخليق الحمض النووي التكميلي (cDNA)، وخطوات تضخيم تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) لتجارب miRCURY LNA miRNA Probe PCR، مما يسمح بتحديد أي عينات رديئة الجودة في وقت مبكر من العملية وتوفير الوقت والمواد الكيميائية. تتضمن المجموعة مزيج قوالب RNA Spike-in من UniSp2 وUniSp4 وUniSp5، بالإضافة إلى قالب RNA Spike-in الخاص بـ cel-miR-39-3p.

مجموعة miRCURY LNA RT

مجموعة واحدة شاملة للنسخ العكسي لنظامي كشف. تُستخدم مجموعة miRCURY LNA RT مع كلٍ من نظام miRCURY LNA miRNA PCR الذي يستخدم صبغة SYBR Green للكشف، ونظام miRCURY LNA miRNA Probe PCR القائم على المجسات. تتضمن المجموعة محلولين تفاعليين خاصين بكل نظام، بالإضافة إلى جميع الكواشف اللازمة لإجراء عملية إضافة ذيل عديد الأدينين إلى الحمض النووي الريبوزي الميكروي (miRNA) والنسخ العكسي بسرعة وسهولة في خطوة تفاعل واحدة.

مجموعة أدوات تفاعل البوليميراز المتسلسل miRCURY LNA Probe

صُممت هذه المجموعة خصيصًا لنظام تفاعل البوليميراز المتسلسل miRCURY LNA miRNA Probe PCR، وتحتوي على مزيج QuantiNova Probe Master Mix عالي الأداء وبادئ miRCURY Probe Universal Reverse Primer. وباستخدامها مع اختبار miRCURY LNA miRNA Probe PCR أو لوحة miRCURY LNA miRNA Probe PCR، تُمكّن هذه التقنية من الكشف عن الحمض النووي الريبوزي الميكروي (miRNA) عبر تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي في الوقت الحقيقي (qPCR).

فحوصات تفاعل البوليميراز المتسلسل باستخدام مسبار miRNA LNA miRCURY

تستخدم هذه المقايسات الأولية والمسبارية مجسات التحلل المائي الخاصة بـ miRNA وبادئات أمامية خاصة بـ miRNA مصممة للكشف عن miRNAs الناضجة باستخدام أحدث معلومات التسلسل من miRBase 22. يتم تضمين البادئ العكسي العالمي miRCURY Probe في مجموعة miRCURY Probe PCR.

لوحات تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) لمجسات الحمض النووي الريبوزي الميكروي (miRNA) من نوع miRCURY LNA

لوحات PCR جاهزة للاستخدام ومصممة مسبقًا للاستخدام الفردي لتحديد خصائص miRNAs الناضجة بسرعة مع التركيز على miRNome أو مسارات محددة أو أنواع معينة من العينات مثل المصل/البلازما أو في لوحة مخصصة مصممة من قبل المستخدم.

مركز تحليل البيانات في جين جلوب

تقوم أداة التحليل المجانية هذه، والمتاحة عبر الإنترنت، بإرشادك خطوة بخطوة من خلال معالج سهل الاستخدام خلال عملية توحيد وتحليل بياناتك، كما أنها تُنشئ أشكالًا جاهزة للنشر.

فحوصات الإضافة

اختبارات التحكم

إجراء

الخطوة الأولى، وهي تفاعل النسخ العكسي، سهلة التنفيذ وتُجرى في أنبوب واحد. يُستخدم الحمض النووي الريبوزي الكلي، بما في ذلك الحمض النووي الريبوزي الميكروي (miRNA)، كمادة أولية، ويُستخدم الحمض النووي التكميلي الناتج (cDNA) في تضخيم تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي (qPCR) باستخدام بادئات مُحسَّنة بتقنية LNA ومسبار تحلل مائي للكشف عن الحمض النووي الريبوزي الميكروي الناضج. يُمكّن هذا من تحديد كمية الحمض النووي الريبوزي الميكروي وتصنيفه بسهولة، وهو متاح لأي مختبر مزود بجهاز تضخيم تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي.

التطبيقات

- الكشف عن التعبير الجيني لـ miRNA، وتحديد خصائصه، وقياس كميته
- تطوير المؤشرات الحيوية للـ miRNA - الفحص والتحديد
- تنظيم الحمض النووي الريبوزي الميكروي وتحليل المسارات
- الكشف عن الحمض النووي الريبوزي الميكروي في أنواع العينات المعقدة والعينات ذات مستويات التعبير المنخفضة عن الحمض النووي الريبوزي الميكروي (مثل الإكسوسومات، والمصل، والبلازما، والبول، وشرائح الأنسجة المثبتة بالفورمالين والمضمنة في البارافين).
- الكشف عن الحمض النووي الريبوزي النووي الصغير (snoRNA)
- التحقق من صحة تسلسل الحمض النووي الريبوزي الميكروي

تُستخدم فحوصات تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) باستخدام مسبار miRCURY LNA miRNA كجزء من نظام تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) باستخدام مسبار miRCURY LNA miRNA من أجل: