Qiagen، 37623، مجموعة Qproteome FFPE Tissue Kit (20)

لتحضير 20 عينة بروتينية من عينات الأنسجة المثبتة بالفورمالين والمضمنة في البارافين: محلول الاستخلاص، أنابيب التجميع، مشابك إغلاق أنابيب التجميع.

سمات

- استخلاص كمي موحد من أنسجة مثبتة بالفورمالين ومضمنة في البارافين
- بروتينات كاملة الطول
- متطلبات عينات منخفضة

تفاصيل المنتج

تستخدم مجموعة Qproteome FFPE Tissue Kit كيمياء مبتكرة خاصة لعكس عملية الربط المتقاطع لتثبيت الفورمالين وتقديم بروتينات كاملة الطول جاهزة للتحليل اللاحق.

أداء

توفر مجموعة Qproteome FFPE Tissue Kit استخلاصًا فعالًا للبروتين من أنسجة FFPE باستخدام بروتوكول موحد للحصول على كميات بروتين قابلة للتكرار (انظر الشكل "استخلاص البروتين الموحد والقابل للتكرار"). وباستخدام هذه المجموعة، تكون كميات البروتين المستخلصة مماثلة لتلك المستخلصة من الأنسجة المجمدة، مما يتيح، على سبيل المثال، المقارنة بين الأنسجة المختلفة لتحديد المؤشرات الحيوية الخاصة بالأمراض (انظر الشكل "تحديد المؤشرات الحيوية الخاصة بالأنسجة").

مبدأ

باعتبارها الطريقة القياسية لتحضير الأنسجة النسيجية، تُصنَّف وتُحفظ ملايين العينات المُثبَّتة بالفورمالين والمُضمَّنة في البارافين (FFPE) سنويًا. سابقًا، كان تحليلها يقتصر على التقنيات النسيجية الكيميائية. تتيح مجموعة Qproteome FFPE Tissue Kit إمكانية تحليل البروتينات وتعبيرها في هذا المورد الضخم والقيّم، وذلك من خلال تمكين الاستخلاص الفعال للبروتينات كاملة الطول المناسبة للتلطيخ الغربي، ومصفوفات البروتين، وقياس الطيف الكتلي. ولأول مرة، يُمكن دراسة البروتينات أو المسارات ذات الأهمية في أنسجة FFPE المحفوظة. يُمكِّن فحص اللطخات أو المصفوفات باستخدام أجسام مضادة متعددة من دراسة البروتينات في وقت واحد، مما يوفر صورة تفصيلية لملامح التعبير البروتيني المتعددة، على سبيل المثال، في مسارات نقل الإشارات.

يُؤدي التثبيت بالفورمالين إلى تكوين روابط كيميائية متقاطعة، مما يُثبّت العينات للتحليل النسيجي، ولكنه يجعل أي فصل لاحق للبروتينات (مثلًا، باستخدام SDS-PAGE) مستحيلاً. تستخدم مجموعة Qproteome FFPE Tissue Kit تقنية كيميائية مبتكرة خاصة لعكس عملية الربط المتقاطع وتوفير بروتينات كاملة الطول جاهزة للتحليل بواسطة تقنية Western blotting أو مصفوفة البروتين، مع الكشف المناعي اللاحق (انظر الشكل "مقارنة عينات أنسجة FFPE على مستوى البروتين").

إجراء

تُزال طبقة البارافين من المقاطع النسيجية وتُحضن في محلول استخلاص. بعد الطرد المركزي، تُستخلص البروتينات في الراشح. يمكن مزج البروتينات المستخلصة مباشرةً مع محلول العينة وتحميلها على هلام SDS-PAGE، تمامًا مثل عينات البروتين التقليدية. لا حاجة إلى معدات باهظة الثمن أو معالجة إضافية.

لإجراء فحص مناعي آلي، يمكن تحميل البروتينات المستعادة في جهاز مكتبي، Simple Western™، لإجراء لطخة ويسترن شعرية بدون استخدام الجل أو اللطخة أو اليدين.

التطبيقات

توفر مجموعة Qproteome FFPE Tissue Kit أداةً فريدةً لتحليل العينات التي تم تحديد حالتها المرضية، ولكن تركيبها البروتيني الدقيق ظلّ غير معروف حتى الآن. تُشكّل هذه العينات - على سبيل المثال، تلك المأخوذة خلال فترة العلاج أو من مجموعات مختلفة من المرضى - مصدرًا غنيًا بالمعلومات لدراسات البروتينات المقارنة ودراسات المؤشرات الحيوية.