مجموعة Qiagen، 52962، QIAamp 96 Viral RNA Kit (10)

لـ 960 عينة: ألواح QIAamp 96، محاليل منظمة، حمض نووي ريبوزي حامل، سائل TopElute. ملاحظة: يلزم استخدام صفائح شريط AirPore لمعالجة مجموعة QIAamp 96 لاستخلاص الحمض النووي الريبوزي الفيروسي باستخدام جهاز الطرد المركزي. هذه الصفائح غير متضمنة في المجموعة حاليًا، ويجب طلبها بشكل منفصل. يلزم عبوة واحدة من 50 صفيحة شريط AirPore (رقم المنتج 19571) لمعالجة 960 عينة باستخدام مجموعة QIAamp 96 واحدة لاستخلاص الحمض النووي الريبوزي الفيروسي (10) وجهاز الطرد المركزي.
عرض المزيد

سمات

- عزل سريع لحمض نووي ريبوزي عالي الجودة وجاهز للاستخدام
- لا استخلاص عضوي أو ترسيب كحولي
- إزالة كاملة للملوثات والمثبطات
- عزل الحمض النووي الريبي من الفيروسات، مثل فيروس سارس-كوف-2، حتى تنسيق 96 بئراً
- تنقية آلية من تنسيق الإنتاجية المنخفضة إلى تنسيق الإنتاجية العالية للغاية

تفاصيل المنتج

تُسهّل مجموعات QIAamp Viral RNA عملية تنقية الحمض النووي الريبي الفيروسي من سوائل الجسم الخالية من الخلايا، وذلك من خلال إجراءات سريعة تعتمد على الأعمدة الدوارة، والتفريغ، والطرد المركزي على الألواح. يرتبط الحمض النووي الريبي الفيروسي بشكلٍ خاص بغشاء السيليكا QIAamp، ويتم استخلاص الحمض النووي الريبي الفيروسي النقي إما بالماء أو بمحلول منظم مُرفق مع المجموعة. يُمكن أتمتة عملية التنقية بالكامل على جهاز QIAcube Connect باستخدام مجموعة QIAamp Viral RNA Mini Kit أو مجموعة QIAamp Viral RNA Mini QIAcube Kit المُخصصة. تدعم خيارات الأتمتة المُتعددة لمجموعة QIAamp 96 Viral Kit على أجهزة مثل QIAcube HT، وFluent 780 من Tecan، وepMotion 5075V من Eppendorf، معالجة عالية الإنتاجية إلى فائقة الإنتاجية مع الحد الأدنى من التدخل اليدوي.

يمكن أيضًا تنفيذ بروتوكولات QIAamp Viral RNA Mini وQIAamp 96 Viral RNA القياسية باستخدام نظام TRACKMAN Connected، المقترن بماصات PIPETMAN M Connected، وكلاهما من شركة Gilson. يرشد نظام TRACKMAN Connected الباحثين خلال بروتوكولات QIAamp Viral RNA Mini أو QIAamp 96 Viral RNA مع ضبط إعدادات ماصة PIPETMAN M Connected المزودة بتقنية Bluetooth تلقائيًا. يتم تسجيل كل خطوة من خطوات تنفيذ البروتوكول لتسريع عملية إعداد التقارير من خلال إنشاء تقرير تشغيل شامل. حمّل المزيد من المعلومات.

أداء

يؤدي الحمض النووي الريبي الفيروسي عالي الجودة المعزول باستخدام مجموعة QIAamp Viral RNA Mini Kit ومجموعة QIAamp Viral RNA Mini QIAcube Kit أداءً جيدًا في مجموعة واسعة من التطبيقات اللاحقة، بما في ذلك تحديد النمط الجيني الفيروسي وعلم الأوبئة الفيروسية وأبحاث الأمراض المعدية (انظر الشكل "تضخيم الحمض النووي الريبي من البلازما").

تتضمن مجموعة QIAamp Viral RNA Mini QIAcube Kit محولات دوارة مُحمّلة مسبقًا بأعمدة الطرد المركزي وأنابيب الاستخلاص من QIAamp، مما يوفر راحة أكبر ووقتًا أقل (انظر الشكل "توفير كبير في الوقت"). علاوة على ذلك، تُسهّل المجموعة الاستخدام وتقلل من أخطاء المستخدم. كما تُقلل من الهدر لأن محتويات المجموعة مُصممة خصيصًا للتنقية على جهاز QIAcube Connect، ولا تتضمن الأنابيب الزائدة اللازمة للإجراء اليدوي.

استُخدمت مجموعة QIAamp 96 لاستخلاص الحمض النووي الريبي الفيروسي بنجاح لاستخلاص الحمض النووي الريبي من الفيروسات، بما في ذلك فيروس SARS-CoV-2 (انظر الشكل "مقارنة عزل فيروس SARS-CoV-2"). ويُضاهي أداء مجموعة QIAamp 96 لاستخلاص الحمض النووي الريبي الفيروسي الأداءَ المُحقق باستخدام مجموعة QIAamp المصغرة لاستخلاص الحمض النووي الريبي الفيروسي (انظر الشكل "استخلاص موثوق للحمض النووي الريبي"). وقد ثبتت فعالية عزل الحمض النووي الريبي باستخدام طرق جمع وتثبيت اللعاب الشائعة (انظر الشكل "التوافق مع طرق تثبيت اللعاب")، ولم يُرصد أي تلوث متبادل (انظر الشكل "عدم وجود تلوث متبادل").

مبدأ

تُسهّل مجموعتا QIAamp Viral RNA Mini Kit وQIAamp Viral RNA Mini QIAcube Kit عملية تنقية الحمض النووي الريبي الفيروسي من سوائل الجسم الخالية من الخلايا، وذلك باستخدام إجراءات سريعة تعتمد على عمود الطرد المركزي أو التفريغ أو الإجراءات الآلية. كما تُسهّل مجموعة QIAamp 96 Viral RNA Kit عملية عزل الحمض النووي الريبي الفيروسي من مسحات الأنف والقصبة الهوائية، دون الحاجة إلى استخلاص الفينول-الكلوروفورم. يرتبط الحمض النووي الريبي الفيروسي بشكل انتقائي بغشاء السيليكا QIAamp، بينما تمر الملوثات من خلاله. وتُزال مثبطات تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR)، مثل الكاتيونات ثنائية التكافؤ والبروتينات، تمامًا في خطوتين فعالتين للغسل، ليتبقى الحمض النووي الريبي الفيروسي النقي جاهزًا للاستخلاص إما بالماء أو بالمحلول المنظم المرفق مع المجموعة.

تُنتج تقنية QIAamp RNA الحمض النووي الريبي الفيروسي من سوائل الجسم الخالية من الخلايا، وهو جاهز للاستخدام في تفاعل البوليميراز المتسلسل العكسي (RT-PCR) وإجراءات التلطيخ. تقنية تحضير العينات من QIAamp مرخصة بالكامل.

إجراء

تعمل المحاليل المنظمة والإنزيمات المُحسّنة على تحليل العينات، وتثبيت الأحماض النووية، وتعزيز امتصاص الحمض النووي الريبي (RNA) بشكل انتقائي على غشاء QIAamp. ولضمان سلامة الحمض النووي الريبي، تُحلل العينات في ظروف مُسببة لتشويه بنيتها لتعطيل إنزيمات الريبونوكلياز (RNases). يُضاف الكحول، ثم تُحمّل المستخلصات على عمود QIAamp الدوار أو صفيحة 96 بئراً. تُستخدم محاليل الغسل لإزالة الشوائب، ثم يُستخلص الحمض النووي الريبي النقي والجاهز للاستخدام في الماء أو محلول ملحي منخفض التركيز.

المعالجة بالتفريغ

لزيادة سرعة وسهولة تنقية الحمض النووي الريبوزي (RNA)، يمكن معالجة العينات بالتفريغ بدلاً من الطرد المركزي. تُركّب أعمدة QIAamp Mini الدوارة على مشعب QIAvac 24 باستخدام صمامات وموصلات التفريغ المتوفرة في مجموعة ملحقات QIAamp Vac. يُنصح باستخدام صمامات التفريغ في حال اختلاف معدلات تدفق العينة بشكل ملحوظ لضمان ثبات مستوى التفريغ. تُستخدم موصلات التفريغ أحادية الاستخدام لتجنب أي تلوث متبادل.

المعالجة الآلية على QIAcube Connect

تتيح مجموعة QIAamp Viral RNA QIAcube Kit المخصصة المعالجة الآلية على جهاز QIAcube Connect. بالإضافة إلى ذلك، يمكن أتمتة مجموعة QIAamp Viral RNA Mini Kit على جهاز QIAcube Connect. توفر مجموعة QIAamp Viral RNA Mini Accessory Set المحاليل والكواشف الإضافية اللازمة لإعداد العينات آليًا وبإنتاجية منخفضة باستخدام كلٍ من جهاز QIAcube Connect ومجموعة QIAamp Viral RNA Mini Kit.

المعالجة بتنسيق 96 بئراً

يمكن تشغيل مجموعة QIAamp 96 Viral RNA Kit تلقائيًا على أجهزة مختلفة.

نوصي باستخدام جهاز الطرد المركزي 4-16S أو 4-16KS لمعالجة العينات. يمكن استخدام أجهزة طرد مركزي بديلة مزودة بدوار متأرجح، وسعة لا تقل عن 5788 ضعف قوة الجاذبية الأرضية، وقادرة على استيعاب مجموعات صفائح بارتفاع 75 مم أو أكثر. كما يمكن استخدام أجهزة طرد مركزي ذات قوة جاذبية أرضية أقل (3486 ضعف قوة الجاذبية الأرضية كحد أدنى) مع بروتوكول بديل.

الأدوات البلاستيكية الموصى بها لمعالجة الطرد المركزي: يجب أن تكون المواد البلاستيكية المستخدمة من نوع SBS وقادرة على تحمل قوى الطرد المركزي اللازمة. يجب أن تكون سعة صفائح الآبار العميقة 2 مل، وسعة صفائح الإذابة ≥ 500 ميكرولتر. يلزم أربع صفائح آبار عميقة وصفيحة إذابة واحدة لمعالجة 96 عينة.

التطبيقات

- البلازما والمصل
- السائل النخاعي الشوكي
- البول
- سوائل الجسم الأخرى الخالية من الخلايا
- السوائل الطافية لمزارع الخلايا
- مسحات

تُسهّل مجموعات QIAamp Viral RNA عملية تنقية الحمض النووي الريبي الفيروسي من سوائل الجسم الخالية من الخلايا، حيث توفر إجراءات سريعة باستخدام الأعمدة الدوارة أو التفريغ أو الطرد المركزي على الألواح، أو التشغيل الآلي على جهاز QIAcube. تشمل أنواع العينات ما يلي: