شركة كياجين، 55114، مجموعة QIAamp للأحماض النووية المتداولة (50)

لـ 50 تحضيرًا: أعمدة QIAamp Mini، وموسعات الأنابيب (20 مل)، وبروتينيز K من QIAGEN، وحمض نووي ريبوزي حامل، ومحاليل منظمة، وموصلات VacConnectors، وأنابيب التجميع (1.5 مل و2 مل).

سمات

- تركيز الأحماض النووية، مع مدخلات عالية وأحجام استخلاص منخفضة
- استخلاص فعال للحمض النووي DNA والحمض النووي الريبي RNA المجزأ
- لا استخلاص عضوي أو ترسيب بالإيثانول
- إزالة الملوثات والمثبطات
- يلزم وجود مشعب تفريغ لمعالجة العينات، على سبيل المثال QIAvac 24 plus

تفاصيل المنتج

تعمل مجموعة QIAamp Circulating Nucleic Acid Kit على تبسيط تركيز وتنقية الحمض النووي DNA والحمض النووي RNA الحر المتداول من البلازما أو المصل بشكل كبير.

يمكن أتمتة المجموعة على QIAcube Connect.

أداء

- تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وتفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي في الوقت الحقيقي وتفاعل البوليميراز المتسلسل العكسي (RT-PCR)
- أبحاث المؤشرات الحيوية والتحقق من صحتها للكشف عن السرطان في الدم
- الكشف عن الحمض النووي الفيروسي

يُتيح تحليل شظايا الحمض النووي خارج الخلوي وجزيئات mRNA الخاصة بالأورام في الدم الكشفَ الدقيق عن أنواع الأورام من عينة دم بسيطة. تتواجد هذه الأحماض النووية الدائرة في الدم، عادةً في المصل أو البلازما، على شكل شظايا قصيرة، أقل من 1000 زوج قاعدي (DNA) أو أقل من 1000 نيوكليوتيد (RNA). إضافةً إلى ذلك، تتمتع جزيئات miRNA، التي لا يتجاوز حجمها 21 نيوكليوتيد، بإمكانية توفير مؤشرات حيوية لبعض أنواع السرطان والحالات المرضية.

تتيح مجموعة QIAamp لاستخلاص الأحماض النووية المتداولة تنقية فعّالة لهذه الأحماض النووية المتداولة من بلازما الدم أو مصل الدم البشري وسوائل الجسم الأخرى الخالية من الخلايا. توفر هذه التنقية الفعّالة، مع نتائج قابلة للتكرار، عينةً تمثيليةً للأحماض النووية المتداولة في الدم (انظر الشكل "استخلاص الحمض النووي المتداول بشكل قابل للتكرار"). تُمكّن موسعات الأنابيب والمعالجة بالتفريغ في جهاز QIAvac 24 Plus من استخدام أحجام عينات ابتدائية تصل إلى 5 مل، كما تسمح أحجام الإذابة المرنة التي تتراوح بين 20 و150 ميكرولتر بتركيز أنواع الأحماض النووية الموجودة بتراكيز منخفضة. توفر المجموعة تقنية متقدمة للربط الانتقائي بغشاء قائم على السيليكا لتحسين استخلاص الأحماض النووية المجزأة (انظر الشكل "تحسين استخلاص الحمض النووي المجزأ").

يمكن تنقية الحمض النووي الريبوزي (RNA) المتداول، دون تنقية الحمض النووي (DNA) معه، عن طريق هضم الحمض النووي باستخدام مجموعة DNase الخالية من RNase. يوفر بروتوكول متخصص تنقية عالية الكفاءة للحمض النووي الريبوزي الصغير، مثل الحمض النووي الريبوزي الميكروي (miRNA) (انظر الشكل "التنقية الفعالة للحمض النووي الريبوزي الميكروي المتداول"). يمكن تنقية الحمض النووي الميثيلي بكفاءة باستخدام مجموعة QIAamp للأحماض النووية المتداولة. يحتفظ الحمض النووي المنقى بميثيلته، مما يسمح بتحويله باستخدام البيسلفيت لتحليل حالة الميثلة (انظر الشكل "الاستخلاص الفعال للحمض النووي الميثيلي").

إن الحمض النووي DNA والحمض النووي الريبي RNA المتداولين والمنقيين والمركزين خاليان من البروتينات والنيوكليازات والشوائب الأخرى، وجاهزان للاستخدام في مجموعة واسعة من التطبيقات اللاحقة، بما في ذلك:

مبدأ

تُسهّل مجموعة QIAamp لاستخلاص الأحماض النووية المتداولة عزل الحمض النووي DNA والحمض النووي الريبي RNA من البلازما أو المصل. لا حاجة لاستخلاص الفينول-الكلوروفورم. ترتبط الأحماض النووية بشكلٍ خاص بعمود QIAamp Mini، بينما تمر الملوثات من خلاله. تُزال مثبطات تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR)، مثل الكاتيونات ثنائية التكافؤ والبروتينات، تمامًا في ثلاث خطوات غسل، تاركةً أحماضًا نووية نقية ليتم استخلاصها في محلول منظم مُرفق مع المجموعة. تُنتج تقنية QIAamp لاستخلاص الأحماض النووية المتداولة الحمض النووي DNA والحمض النووي الريبي RNA من بلازما أو مصل أو بول الإنسان.

تجمع مجموعة QIAamp لتحليل الأحماض النووية المتداولة بين خصائص الارتباط الانتقائي للغشاء المصنوع من السيليكا وأحجام الإذابة المرنة التي تتراوح بين 20 و150 ميكرولتر. ويمكن تنقية الحمض النووي الريبي المتداول عن طريق هضم الحمض النووي باستخدام مجموعة DNase الخالية من RNase.

إجراء

تتضمن عملية استخلاص الأحماض النووية المتداولة من QIAamp أربع خطوات (التحليل، والربط، والغسل، والإذابة) تُنفذ باستخدام أعمدة QIAamp Mini على جهاز تفريغ. هذه العملية البسيطة مناسبة جدًا للمعالجة المتزامنة لعينات متعددة، حيث توفر الأحماض النووية في أقل من ساعتين لكل 24 عينة. عند استخدام مجموعة QIAamp لاستخلاص الأحماض النووية المتداولة لعزل الحمض النووي الريبي (RNA) والحمض النووي الريبوزي منقوص الأكسجين (DNA) الفيروسي، لا يمكن ضمان الأداء لجميع أنواع الفيروسات، ويجب على المستخدم التحقق من ذلك.

التطبيقات

- بلازما بشرية
- سيروم
- البول

تُنقي مجموعة QIAamp Circulating Nucleic Acid Kit وتُركّز بكفاءة الحمض النووي DNA، والحمض النووي RNA، والحمض النووي الريبوزي الميكروي miRNA، والأحماض النووية الفيروسية الحرة المتداولة في الدم، وذلك من مواد أولية تحتوي على تركيزات منخفضة من الحمض النووي DNA والحمض النووي الريبوزي RNA المُجزّأ في الغالب (عادةً ما تتراوح بين 1 و100 نانوغرام/مل من الحمض النووي DNA المتداول في بلازما الدم البشري). ويمكن أن يصل حجم العينة الأولية إلى 5 مل.

تقوم مجموعة QIAamp Circulating Nucleic Acid Kit بتنقية وتركيز الأحماض النووية من أنواع العينات التالية: