كياجين، 69181، مجموعة دي إن إيزي 96 للنباتات (6)

لتحضير 6 عينات صغيرة من الحمض النووي (96 عينة): 6 صفائح DNeasy 96، محاليل منظمة، كواشف، إنزيم RNase A، حاصرات S، أنابيب تجميع دقيقة (1.2 مل)، أغطية، صفائح شريطية AirPore

سمات

- حمض نووي نقي، خالٍ من الملوثات ومثبطات الإنزيمات
- استخلاص سريع للحمض النووي الجاهز للاستخدام
- لا استخلاص عضوي، ولا ترسيب بالإيثانول

تفاصيل المنتج

توفر مجموعات DNeasy Plant Kits عزلًا سريعًا وسهلًا للحمض النووي من عينات نباتية باستخدام تقنية السيليكا في أعمدة الطرد المركزي. تتراوح كمية الحمض النووي المستخلص عادةً بين 3 و260 ميكروغرامًا من الحمض النووي عالي الجودة، وذلك حسب نوع العينات المستخدمة (مثل القمح، والذرة، والأرابيدوبسيس، والطماطم، والتبغ) وقدرة غشاء السيليكا في مجموعة DNeasy على الارتباط. كما توفر مجموعات DNeasy Plant Kits تنقية الحمض النووي باستخدام تقنية السيليكا في لوحة ذات 96 بئرًا، حيث تتراوح كمية الحمض النووي المستخلص عادةً بين 1 و15 ميكروغرامًا، وذلك حسب نوع النبات. ويمكن أيضًا أتمتة عملية عزل الحمض النووي من الأنسجة النباتية باستخدام جهاز QIAcube Connect.

أداء

Abies alba (شجرة التنوب الفضية): Nicotiana tabacum (التبغ)
كستناء الحصان (Aesculus hippocastanum): أرز (Oryza sativa) 4
نبات الرشاد (Arabidopsis thaliana): نبات إبرة الراعي (Pelargonium sp.) 4
Avena sp. (الشوفان): Petunia sp. 4
Brassica napus (بذور اللفت الزيتية): Pinus sylvestris (الصنوبر الاسكتلندي)، P. brutia 5
براسيكا أوليراسيا (الكحلبي): حور زاحف (أسبن)
الهندباء البرية (Chicorium endivia): شجرة التنوب دوغلاس (Pseudotsuga menziesii)
Citrullini lanatus (البطيخ): Quercus robur، Q. petrea (البلوط) 6،7
Egeria sp .: رودودندرون sp. 2,4
Fagus sylvatica (خشب الزان) 1: Rubus idaeus (التوت)
Helianthus spp. (عباد الشمس): Solanum tuberosum (البطاطا)
الحشد الشائع (الشعير) 2: الطحالب (الطحالب)
Humulus sp. (الجنجل): Spinacia oleracea (السبانخ)
Hydrilla sp .: تاكسوس باكاتا (الطقسوس)
كالانشو النيابة: Triticum aestivum (القمح) 4
الترمس sp.: أولموس جلابرا (الدردار) 6
Lycopersicon esculentum (طماطم) 3: Vitis spp. (عنب) 6
Myriophyllum sp .: زيا ميس (الذرة)

تتيح مجموعات DNeasy Plant عزل الحمض النووي عالي الجودة بسرعة وكفاءة من مجموعة واسعة من أنواع النباتات وأنسجتها، بما في ذلك المصادر الأكثر تطلبًا (انظر الجدول "مجموعة مختارة من أنواع النباتات التي تتم معالجتها باستخدام مجموعات DNeasy"). يمكن أن تكون العينات طازجة أو مجمدة أو مجففة. يتضمن إجراء DNeasy Plant المُحسَّن عمود QIAshredder الدوار، وهو عمود ترشيح وتجانس فريد من نوعه يزيل حطام الخلايا بكفاءة ويُحسِّن التعامل مع العينات بعد التحلل.

اختيار أنواع النباتات المعالجة باستخدام مجموعات DNeasy

يتراوح المردود النموذجي بين 3 و260 ميكروغرام، مع حجم عينة يصل إلى 1 غرام من الوزن الرطب، وحجم استخلاص يتراوح بين 50 ميكرولتر و2 مل. وتختلف كميات الحمض النووي المستخلص بين الأنواع والأنسجة المختلفة تبعًا لحجم الجينوم، وعدد الصيغ الصبغية، وعدد الخلايا، وعمر عينة النسيج.

تُنتج طريقة DNeasy Plant حمضًا نوويًا نقيًا، خاليًا من السكريات المتعددة والمستقلبات الثانوية الأخرى التي غالبًا ما تُنقى معها باستخدام الطرق التقليدية. يمكن أن تتداخل هذه الشوائب مع قراءات قياس الطيف الضوئي وتُثبط التفاعلات الإنزيمية. تُظهر مسوحات الامتصاص للحمض النووي المُنقّى بواسطة DNeasy ذروة متناظرة عند 260 نانومتر (انظر الشكل "نقاء الحمض النووي من أوراق البلوط وإبر الصنوبر")، مما يؤكد خلو الحمض النووي من الشوائب، بما في ذلك مثبطات الإنزيم. يصل حجم الحمض النووي المُنقّى بواسطة DNeasy إلى 40 كيلوبايت (انظر الشكل "حمض نووي نقي (20-25 كيلوبايت) لتحليل التقييد"). يمكن استخدام الحمض النووي المُنقّى في مجموعة واسعة من التطبيقات (انظر الشكلين "تحليل تفاعل البوليميراز المتسلسل" و"تحليل RAPD").

مبدأ

تستخدم مجموعات DNeasy Plant Kits تقنية غشاء السيليكا المتطورة وإجراءات الطرد المركزي البسيطة لعزل الحمض النووي الخلوي الكامل عالي النقاء من أنسجة وخلايا النباتات أو الفطريات. تحل تقنية DNeasy محل إجراءات عزل الحمض النووي المعقدة مثل استخلاص CTAB أو الفينول أو الكلوروفورم. كما لا حاجة للترسيب بالكحول، لأن الحمض النووي المنقى جاهز للاستخدام الفوري.

إجراء

تُفكك العينات ميكانيكيًا أولًا، ثم تُحلل كيميائيًا (انظر مخطط "إجراءات DNeasy Plant وDNeasy 96 Plant"). يُزال الحمض النووي الريبوزي (RNA) بواسطة هضم RNAse أثناء عملية التحليل. تُزال بقايا الخلايا والبروتينات المترسبة والسكريات المتعددة، وتُجانس العينة بالطرد المركزي عبر عمود QIAshredder. تُضبط ظروف المحلول المنظم، ويُحمل المستخلص على عمود DNeasy Plant Mini. خلال دورة قصيرة، يرتبط الحمض النووي (DNA) بشكل انتقائي بغشاء السيليكا بينما تمر الملوثات. تُزال الملوثات المتبقية ومثبطات الإنزيم في خطوة أو خطوتين فعالتين للغسل. ثم يُستخلص الحمض النووي النقي في الماء أو محلول منظم منخفض الملوحة، ليصبح جاهزًا للاستخدام.

التطبيقات

- استخلاص الحمض النووي من النباتات والكائنات الحية الدقيقة المرتبطة بها
- تحليل تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وتحليل التسلسل الجيني من الجيل التالي (NGS)
- التكاثر بمساعدة العلامات الجينية
- أبحاث مسببات الأمراض النباتية
- دراسات على النباتات المعدلة وراثيًا
- الكشف عن سمات المقاومة

توفر مجموعات DNeasy Plant Kits تنقية الحمض النووي الجاهز للاستخدام من عينات نباتية، بما في ذلك الخلايا النباتية والأنسجة النباتية والفطريات. صُممت مجموعة DNeasy Plant Kit من أجل: