كياجين، 69206، مجموعة دي إن إيزي بلانت برو (250)

أنابيب تفتيت الأنسجة، أعمدة الطرد المركزي MB، محاليل منظمة، أنابيب تجميع (1.5 و2 مل)، لتحضير 250 عينة

سمات

- أداء فائق في تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) مع تقنية إزالة المثبطات الحاصلة على براءة اختراع (IRT)
- استخلاص سريع للحمض النووي الجاهز للاستخدام
- لا استخلاص عضوي، ولا ترسيب بالإيثانول
- تحلل وإطلاق الحمض النووي بكفاءة عالية من المواد النباتية الصلبة ومسببات الأمراض النباتية المرتبطة بها

تفاصيل المنتج

تتميز مجموعة DNeasy Plant Pro Kit بالعديد من الميزات المبتكرة للتغلب على تحديات استخلاص الحمض النووي من الأنسجة النباتية، مما يتيح استخلاص حمض نووي عالي الجودة من أصعب أنواع العينات، بما في ذلك أوراق الفراولة، وأوراق العنب، وإبر الصنوبر، وأنواع مختلفة من البذور. ويضمن زيادة إنتاجية الحمض النووي النباتي والحمض النووي لمسببات الأمراض النباتية، إلى جانب الإزالة الفائقة للمثبطات، نتائج عالية الأداء في التطبيقات اللاحقة الحساسة.

أداء

Abies alba (شجرة التنوب الفضية): Nicotiana tabacum (التبغ)
كستناء الحصان (Aesculus hippocastanum): أرز (Oryza sativa) 4
نبات الرشاد (Arabidopsis thaliana): نبات إبرة الراعي (Pelargonium sp.) 4
Avena sp. (الشوفان): Petunia sp. 4
Brassica napus (بذور اللفت الزيتية): Pinus sylvestris (الصنوبر الاسكتلندي)، P. brutia 5
براسيكا أوليراسيا (الكحلبي): حور زاحف (أسبن)
الهندباء البرية (Chicorium endivia): شجرة التنوب دوغلاس (Pseudotsuga menziesii)
Citrullini lanatus (البطيخ): Quercus robur، Q. petrea (البلوط) 6،7
Egeria sp .: رودودندرون sp. 2,4
Fagus sylvatica (خشب الزان) 1: Rubus idaeus (التوت)
Helianthus spp. (عباد الشمس): Solanum tuberosum (البطاطا)
الحشد الشائع (الشعير) 2: الطحالب (الطحالب)
Humulus sp. (الجنجل): Spinacia oleracea (السبانخ)
Hydrilla sp .: تاكسوس باكاتا (الطقسوس)
كالانشو النيابة: Triticum aestivum (القمح) 4
الترمس sp.: أولموس جلابرا (الدردار) 6
Lycopersicon esculentum (طماطم) 3: Vitis spp. (عنب) 6
Myriophyllum sp .: زيا ميس (الذرة)

تُمكّن مجموعة DNeasy Plant Pro Kit، أحدث إضافة إلى عائلة DNeasy Plant الموثوقة، من تنقية كميات أكبر بكثير من الحمض النووي من أصعب أنواع العينات، بما في ذلك أوراق الفراولة، وأوراق العنب، وإبر الصنوبر، وأنواع مختلفة من البذور (انظر الجدول "مجموعة مختارة من أنواع النباتات التي تمت معالجتها باستخدام مجموعات DNeasy" والشكل "كميات أكبر بكثير من الحمض النووي النقي"). توفر تقنية إزالة المثبطات (IRT) الحاصلة على براءة اختراع إزالة فائقة للمثبطات دون استخدام مواد كيميائية قاسية، مما ينتج عنه حمض نووي نقي مع تثبيط أقل لتفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) (انظر الشكل "إزالة فعالة لمثبطات تفاعل البوليميراز المتسلسل").

عندما تمت مقارنة قيم CT لتفاعلات PCR مع مستخلصات الحمض النووي النباتي التي تحتوي على مثبطات محتملة بقيم CT لتفاعل PCR مع إضافة الماء كعنصر تحكم والذي لا يمنع تضخيم الحمض النووي IC، لم يظهر المستخلص من مجموعة DNeasy Plant Pro أي تثبيط.

باستخدام مجموعة DNeasy Plant Pro، كانت كمية الحمض النووي المستخلص من أوراق الفراولة - وهي عينة نباتية صعبة الاستخلاص - أعلى بكثير من تلك التي تم الحصول عليها باستخدام مجموعات من الموردين T وZ. علاوة على ذلك، وفرت مجموعة DNeasy Plant Pro إزالة فائقة للمثبطات، ولم يُظهر مستخلص الحمض النووي أي تثبيط (انظر الشكل "كمية أعلى بكثير وإزالة فائقة للمثبطات"). كما يمكن لمجموعة DNeasy Plant Pro تنقية الحمض النووي البكتيري والفطري والفيروسي من عينات النباتات والجذور.

يمكن دمج هذه المجموعة بنجاح في سير عمل متكامل مع منتجات مُثبتة ومُحسّنة لتقنية التسلسل الجيني من الجيل التالي (NGS) (انظر الشكل "سير عمل NGS المُحسّن"). يُعدّ التحديد السريع والموثوق لمسببات الأمراض النباتية أمرًا بالغ الأهمية لتجنب انتشار الأمراض وتيسير إدارتها بفعالية. يُمكّن تنقية الحمض النووي للنباتات ومسببات الأمراض معًا باستخدام مجموعة DNeasy Plant Pro Kit من تحديد مجموعة واسعة من مسببات الأمراض بنجاح (انظر الشكل "التحديد الناجح لمسببات الأمراض النباتية بواسطة NGS").

مبدأ

تتضمن مجموعة DNeasy Plant Pro طريقة مبتكرة وحصرية لتنقية الحمض النووي الخلوي الكامل من الخلايا والأنسجة والبذور النباتية بسرعة وسهولة. بالإضافة إلى ذلك، يمكن استخدام هذه المجموعة لتنقية الحمض النووي البكتيري والفطري والفيروسي من عينات النباتات والجذور. تستخدم مجموعة DNeasy Plant Pro تقنية الخرز الدقيق، التي تحل محل إجراءات عزل الحمض النووي المعقدة مثل استخلاص CTAB أو الفينول أو الكلوروفورم، لاستخلاص حمض نووي عالي الجودة من أصعب أنواع العينات، بما في ذلك أوراق الفراولة وأوراق العنب وإبر الصنوبر وأنواع مختلفة من البذور. تستخدم مجموعة DNeasy Plant Pro الجيل الثاني من تقنية إزالة المثبطات (IRT) الحاصلة على براءة اختراع من QIAGEN لإزالة مثبطات تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR)، بما في ذلك السكريات المتعددة والمركبات الفينولية المتعددة وغيرها من المستقلبات الثانوية من المستخلصات النباتية أثناء عملية العزل. يؤدي تحسين تقنية IRT، بالإضافة إلى كيمياء التكسير والتحلل الفعالة، إلى إنتاج كميات كبيرة من الحمض النووي الخالي من المثبطات والذي يكون جاهزًا للاستخدام الفوري في التطبيقات اللاحقة، بما في ذلك PCR وqPCR وتحليل RAPD وتحليل RFLP والتهجين الجنوبي والتسلسل من الجيل التالي.

إجراء

تستخدم مجموعة DNeasy Plan Pro تقنية الخرز الدقيق، التي تحل محل إجراءات عزل الحمض النووي المعقدة لاستخلاص حمض نووي عالي الجودة من أصعب أنواع العينات. تُضاف العينات إلى أنبوب تفتيت الأنسجة الذي يحتوي على خرزة مصممة خصيصًا ومحلول منظم للتجانس السريع (انظر الشكل "التجانس السريع في أنابيب تفتيت الأنسجة"). يتم تحلل الخلايا وإطلاق الحمض النووي بطرق ميكانيكية وكيميائية. يُزال مثبطات تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) من الحمض النووي الجينومي المُحرر باستخدام تقنية إزالة المثبطات من الجيل الثاني (IRT) من QIAGEN، ثم يُجمع على غشاء سيليكا في عمود دوار. بعد ذلك، يُغسل الحمض النووي ويُستخلص من الغشاء، ويصبح جاهزًا لتفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وتفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي (qPCR) وتسلسل الجيل التالي (NGS) وغيرها من التطبيقات اللاحقة.

تساعد خطوة فصل المركبات الفينولية الاختيارية في الحصول على حمض نووي نقي حتى من العينات الغنية بالمركبات الفينولية، مثل أوراق الصنوبر أو العنب، وذلك عن طريق كسر الروابط بين الحمض النووي والمركبات الفينولية. تمنع هذه الخطوة فقدان الحمض النووي الذي قد يحدث في هذه العينات لولاها.

تُستخدم مجموعة DNeasy Plant Pro مع جهاز الخلط الدوامي أو جهاز تفتيت الخرز عالي السرعة، وذلك حسب احتياجات العينة. تُناسب طرق الخلط الدوامي أنسجة الأوراق الرخوة. أما أجهزة تفتيت الخرز عالية السرعة، مثل جهاز التجنيس PowerLyzer 24 أو TissueLyser II، فتُستخدم لتفتيت المواد النباتية الأكثر صلابة كالجذور والبذور والسيقان أو أنسجة الأوراق الصعبة. علاوة على ذلك، يُمكن أتمتة عملية تنقية الحمض النووي باستخدام مجموعة DNeasy Plant Pro بالكامل على جهاز QIAcube Connect.

التطبيقات

- استخلاص الحمض النووي من النباتات والكائنات الحية الدقيقة المرتبطة بها
- تحليل تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وتحليل التسلسل الجيني من الجيل التالي (NGS)
- التكاثر بمساعدة العلامات الجينية
- أبحاث مسببات الأمراض النباتية
- دراسات على النباتات المعدلة وراثيًا
- الكشف عن سمات المقاومة

توفر مجموعات DNeasy Plant Kits تنقية الحمض النووي الجاهز للاستخدام من عينات نباتية، بما في ذلك الخلايا النباتية والأنسجة النباتية والفطريات. صُممت مجموعة DNeasy Plant Pro Kit من أجل: