Product Description
٥٠ عمودًا من أعمدة RNeasy MinElute الدوارة، أنابيب تجميع، بروتينيز K، ديوكسي ريبونيوكلياز I خالي من الريبونيوكلياز، محلول معزز للديوكسي ريبونيوكلياز، محاليل منظمة خالية من الريبونيوكلياز، ماء خالي من الريبونيوكلياز
سمات
- طريقة جديدة للتغلب على التشابك الناتج عن الفورمالين
- إطلاق فعال للحمض النووي الريبي دون المساس بسلامته
- بروتوكول مبسط يوفر الحمض النووي الريبي في 85 دقيقة فقط
تفاصيل المنتج
صُممت مجموعة RNeasy FFPE خصيصًا لتنقية الحمض النووي الريبوزي الكلي من مقاطع الأنسجة المثبتة بالفورمالين والمضمنة في البارافين. تعمل ظروف التحلل والحضانة الخاصة على عكس تعديل الفورمالديهاي للحمض النووي الريبوزي. بالإضافة إلى ذلك، يُحرر محلول التحلل الحمض النووي الريبوزي بكفاءة من مقاطع الأنسجة مع تجنب المزيد من تحلله. تستخدم المجموعة أيضًا إنزيم ديوكسي ريبونوكلياز (DNase) ومحلول معزز له لإزالة تلوث الحمض النووي الجينومي على النحو الأمثل. تُمكّن أعمدة الطرد المركزي RNeasy MinElute من تنقية الحمض النووي الريبوزي الكلي بأحجام استخلاص منخفضة تصل إلى 10 ميكرولتر. يمكن أتمتة عملية التنقية بالكامل على جهاز QIAcube Connect.
شاهد الفيديو
مبدأ
يؤدي تثبيت الأنسجة بالفورمالين إلى تكوين روابط متقاطعة بين جزيئات الحمض النووي الريبوزي (RNA) وبين الحمض النووي الريبوزي والبروتين، مما يُضعف أداء الحمض النووي الريبوزي في الاختبارات الإنزيمية. كما قد تُؤدي ظروف التثبيت والتضمين إلى تجزئة الأحماض النووية بشكل كبير في عينات الأنسجة المُثبتة بالفورمالين والمُضمنة في البارافين (FFPE). تستخدم مجموعة RNeasy FFPE ظروف تحلل وحضانة خاصة لعكس تعديل الفورمالديهايد للحمض النووي الريبوزي. يُحرر محلول التحلل الحمض النووي الريبوزي بكفاءة من عينات أنسجة FFPE، مانعًا المزيد من تحلله. تسمح هذه الظروف المُحسّنة بتنقية جميع الحمض النووي الريبوزي القابل للاستخدام، مما يُؤدي إلى زيادة إنتاجية عينات FFPE باستخدام مجموعة RNeasy FFPE مقارنةً بالطرق الأخرى.
إجراء
يمكن إتمام إجراء RNeasy FFPE بالكامل في غضون 85 دقيقة فقط (انظر مخطط سير العمل "إجراء RNeasy FFPE"). لا يتطلب تحلل العينة باستخدام هضم البروتينيز K سوى 15 دقيقة. بعد التحلل، تُحضن العينات عند درجة حرارة 80 درجة مئوية لمدة 15 دقيقة. ثم يُعالج الحمض النووي الريبوزي منقوص الأكسجين (DNA) باستخدام إنزيم DNase لإزالة الحمض النووي الجينومي بكفاءة، بما في ذلك شظايا الحمض النووي الصغيرة. وأخيرًا، يُنقى الحمض النووي الريبوزي المركز (RNA) باستخدام أعمدة RNeasy MinElute الدوارة، ويُستخلص في حجم يتراوح بين 14 و30 ميكرولتر. يمكن أتمتة عملية التنقية بالكامل على جهاز QIAcube.
التطبيقات
تعزل مجموعة RNeasy FFPE جميع جزيئات الحمض النووي الريبوزي (RNA) التي يزيد طولها عن 70 نيوكليوتيدًا من عينات FFPE، مما يوفر شظايا RNA قابلة للاستخدام في العديد من التطبيقات اللاحقة، بما في ذلك تفاعل البوليميراز المتسلسل العكسي (RT-PCR). مع ذلك، يكون الحمض النووي الريبوزي المستخلص من عينات FFPE مجزأً بشدة، ولا يُنصح باستخدامه في التطبيقات اللاحقة التي تتطلب حمضًا نوويًا ريبوزيًا كامل الطول. قد تتطلب بعض التطبيقات تعديلات للسماح باستخدام الحمض النووي الريبوزي المجزأ (مثل تصميم مضخمات صغيرة لتفاعل RT-PCR). لتخليق الحمض النووي التكميلي (cDNA)، يُفضل استخدام بادئات عشوائية أو خاصة بالجينات بدلًا من بادئات أوليجو-dT.
Order Guidelines
1. Price & Stock Available on Request. Click to send email to: service@iright.com
2. Please DO NOT make payment before confirmation.
3. Minimum order value of $1,000 USD required.
Collaboration
Tony Tang
Email: Tony.Tang@iright.com
Mobile/WhatsApp/Wechat: +86-17717886924