Product Description
لتحقيق استقرار الحمض النووي الريبي (RNA) في 20 عينة نسيجية وزن كل منها 500 ملغ: 20 أنبوبًا بغطاء لولبي تحتوي كل منها على 5 مل من كاشف RNAprotect Tissue Reagent
سمات
- استقرار فوري للحمض النووي الريبي وحماية الحمض النووي الريبي
- سهولة الاستخدام والأمان في درجة حرارة الغرفة
- سهولة جمع وتخزين المناديل في أنابيب قابلة لإعادة الإغلاق
- تثبيت البكتيريا موجبة الجرام وسالبة الجرام
- لا حاجة لإزالة الوسط من الخلايا المفروزة أو المستنبتة
تفاصيل المنتج
توفر كواشف وأنابيب RNAprotect تعطيلًا فوريًا لإنزيم RNase وتثبيتًا للحمض النووي الريبي (RNA) في الأنسجة، ومزارع البكتيريا موجبة وسالبة الغرام، والخلايا المفروزة أو المزروعة، وذلك للحفاظ على نمط التعبير الجيني وتمكين تنقية الحمض النووي الريبي عالي الجودة بشكل متكرر. يتم تثبيت العينات في درجة حرارة الغرفة قبل إجراءات عزل الحمض النووي الريبي.
أداء
يضمن كاشف RNAprotect Tissue Reagent تعطيلًا فوريًا لإنزيم RNase، ويُثبّت ويحمي نمط التعبير الجيني للرنا في العينات أثناء الحصاد والتخزين (انظر الشكل "كاشف RNAprotect يمنع تحلل الرنا المرسال في الأنسجة"). تضمن الحماية الفورية بتقنية RNAprotect أن تعكس التحليلات اللاحقة بدقة نمط التعبير الجيني للأنسجة السليمة. يمكن أرشفة العينات دون خطر تحلل الرنا، حتى بعد دورات تجميد وإذابة متعددة (انظر الشكلين "الرنا المستقر في الأنسجة: درجات حرارة مختلفة ودورات تجميد وإذابة" و"أنابيب RNAprotect Tissue Tubes تمنع تغيرات الرنا في الأنسجة").
يمنع كاشف RNAprotect Cell Reagent تحفيز التعبير الجيني في الخلايا المعالجة ويحافظ على مستويات النسخ ويثبتها أثناء تخزين عينات الخلايا (انظر الأشكال "التثبيط الفعال لتحفيز PMA لتعبير c-fos" و "قياس أكثر موثوقية لنسخة CD83").
يُعدّ كاشف RNAprotect Bacteria مناسبًا للاستخدام مع مجموعة واسعة من أنواع البكتيريا، سواءً كانت موجبة الغرام (مثل المكورات العنقودية الذهبية والمتفطرة الطيرية) أو سالبة الغرام (مثل الإشريكية القولونية والسالمونيلا التيفية)، ويمنع حدوث أي تغييرات في الحمض النووي الريبوزي (انظر الشكلين "كاشف RNAprotect Bacteria يمنع تحلل الحمض النووي الريبوزي الرسول" و"تحليل GeneChip"). يمكن زراعة البكتيريا في وسط غذائي بسيط أو معقد قبل استخلاص الحمض النووي الريبوزي.
تحليل GeneChip. يُعد الحمض النووي الريبي المنقى بواسطة RNeasy من عينات RNAprotect المثبتة والمخزنة في ظل مجموعة متنوعة من الظروف مثاليًا للعمليات اللاحقة مثل التهجين الشمالي و RT-PCR.
مبدأ
بمجرد جمع العينة البيولوجية، يصبح الحمض النووي الريبوزي (RNA) فيها غير مستقر للغاية. تُمكّن كواشف وأنابيب RNAprotect من تعطيل إنزيمات RNase فورًا، وتثبيت الحمض النووي الريبوزي، والحفاظ على نمط التعبير الجيني. كما تمنع هذه الكواشف تحفيز الجينات أو تثبيطها الناتج عن معالجة العينة، مما يسمح بتحليل دقيق للتعبير الجيني. وهذا أمر بالغ الأهمية لملامح التعبير الجيني في البكتيريا. يؤدي التحلل الإنزيمي للحمض النووي الريبوزي إلى انخفاض أو فقدان العديد من النسخ، لأن جزيئات mRNA البكتيرية لها عمر نصف قصير جدًا لا يتجاوز بضع دقائق.
يتغلغل كاشف RNAprotect Tissue Reagent بسرعة في الأنسجة، مما يؤدي إلى استقرار فوري للحمض النووي الريبوزي (RNA). يوفر كاشف RNAprotect Cell Reagent استقرارًا فوريًا للحمض النووي الريبوزي في الخلايا المفروزة أو المستنبتة. يتم تثبيت الخلايا في درجة حرارة الغرفة، ويمكن تخزينها أو نقلها في درجة حرارة الغرفة قبل تنقية الحمض النووي الريبوزي.
إجراء
لحماية الحمض النووي الريبوزي (RNA) وتخزين العينات، تُغمر عينات الأنسجة في حجم مناسب من محلول RNAprotect Tissue Reagent فور جمعها. توفر أنابيب RNAprotect Tissue Tubes أحجامًا مُقاسة مسبقًا من المحلول في أنابيب قابلة لإعادة الإغلاق، مما يُسهّل التعامل مع العينات وتخزينها. يحافظ المحلول على الحمض النووي الريبوزي لمدة تصل إلى يوم واحد عند درجة حرارة 37 درجة مئوية، أو 7 أيام عند درجة حرارة تتراوح بين 18 و25 درجة مئوية، أو 4 أسابيع عند درجة حرارة تتراوح بين 2 و8 درجات مئوية، مما يسمح بمعالجة العينات ونقلها وتخزينها وشحنها دون الحاجة إلى النيتروجين السائل أو الثلج الجاف. كما يُمكن أيضًا وضع العينات عند درجة حرارة -20 درجة مئوية أو -80 درجة مئوية للتخزين طويل الأمد.
يعمل كاشف RNAprotect Cell Reagent على تثبيت التعبير الجيني في الخلايا فورًا. في التقنيات الأخرى، يلزم غسل الخلايا أو معالجتها (مثل المعالجة بالتربسين) قبل إضافة كاشف تثبيت الحمض النووي الريبوزي (RNA). يتم التخلص من أي تغييرات في التعبير الجيني قد تحدث أثناء خطوات الغسل أو المعالجة بإضافة كاشف RNAprotect Cell Reagent مباشرةً إلى الخلايا في وسط الاستنبات أو المحلول المنظم. كما يمكن تطبيق تثبيت الحمض النووي الريبوزي الفوري باستخدام كاشف RNAprotect Cell Reagent على الخلايا المترسبة غير الموجودة في وسط الاستنبات أو محلول التخزين. يجب ألا تتجاوز كمية المادة الأولية 1 × 10⁷ خلية.
بالنسبة لعينات البكتيريا، يُضاف حجمان من كاشف RNAprotect Bacteria Reagent مباشرةً إلى حجم واحد من مزرعة البكتيريا قبل استخلاص الحمض النووي الريبوزي (RNA)، مما يوفر استقرارًا فوريًا له. يتيح هذا الاستقرار وقتًا كافيًا لتحليل البكتيريا بكفاءة باستخدام بروتوكولات متعددة: التحليل الأنزيمي، أو التفتيت الميكانيكي، أو مزيج من الطريقتين. توصي شركة QIAGEN باستخدام جهاز TissueLyser للتفتيت الميكانيكي الفعال.
التطبيقات
- تنقية الحمض النووي الريبي الكلي
- تنقية الحمض النووي الريبوزي الميكروي
- تنقية الحمض النووي الريبوزي الميكروي
يمكن استخدام الحمض النووي الريبي (RNA) المثبت في كواشف وأنابيب RNAprotect للأغراض التالية:
Order Guidelines
1. Price & Stock Available on Request. Click to send email to: service@iright.com
2. Please DO NOT make payment before confirmation.
3. Minimum order value of $1,000 USD required.
Collaboration
Tony Tang
Email: Tony.Tang@iright.com
Mobile/WhatsApp/Wechat: +86-17717886924